脂肪細胞因子與肝纖維化乙型肝炎患者肝功能、纖維化及炎癥活動程度的相關性研究

林介軍 周建偉 朱方超 宋麗 鮑洛文 黃智銘

脂肪細胞因子與肝纖維化乙型肝炎患者肝功能、纖維化及炎癥活動程度的相關性研究

林介軍 周建偉 朱方超 宋麗 鮑洛文 黃智銘

目的 探討肝纖維化乙型肝炎患者脂肪細胞因子與肝功能、纖維化及炎癥活動程度的相關性。方法 選擇肝纖維化乙型肝炎患者56例為觀察組，健康體檢者20例為對照組。比較兩組網膜素、瘦素、脂聯素和內臟脂肪素水平，分析觀察組各脂肪細胞因子水平與肝功能指標、HBV-DNA的相關性。觀察組行肝組織活檢并評價肝組織炎癥活動度（HA）和肝組織纖維化分期（HF），比較不同HA分度和不同HF分期患者的脂肪細胞因子水平。結果 兩組脂聯素、瘦素、內臟脂肪素比較差異均無統計學意義（均P＞0.05），觀察組網膜素水平顯著高于對照組（P＜0.05）。觀察組網膜素、內臟脂肪素、瘦素和脂聯素與ALT、AST、HBV-DNA均無相關性（均P＞0.05），HA分度0～1者（23例）與HA分度2～3者（33例）各脂肪細胞因子比較差異均無統計學意義（均P＞0.05），HFS1～S2期者（21例）與HFS3～S4期者（35例）脂聯素、瘦素和內臟脂肪素比較差異均無統計學意義（均P＞0.05），而網膜素水平升高，差異有統計學意義（P＜0.05）。 結論 肝纖維化乙型肝炎患者的網膜素水平升高，且與肝纖維化嚴重程度相關，進一步探討網膜素與肝纖維化的關系對于預防乙型肝炎后肝硬化可能具有一定的意義。

肝纖維化 乙型肝炎 脂肪細胞因子

越來越多的研究發現，脂肪細胞因子在肝臟脂肪變性、炎癥壞死及肝硬化方面起重要作用[1-3]。肥胖和胰島素抵抗可加快慢性肝病患者肝纖維化進程，這一進程也是多種脂肪細胞因子參與的結果[4]。國外研究提示，丙型肝炎病毒感染與胰島素抵抗密切相關[5-6]，甚至認為丙型肝炎是胰島素抵抗的獨立危險因素[7]。國內也有研究認為，慢性丙型肝炎伴脂肪肝者某些脂肪細胞因子如網膜素水平低于未合并脂肪肝的丙肝患者[8]，提示丙型肝炎患者的疾病進展與脂肪細胞因子有關。乙型肝炎是國內最為常見的肝炎性疾病，也是國內肝硬化的主要原因。本研究旨在探討肝纖維化的乙型肝炎患者血清脂肪細胞因子特點，分析脂肪細胞因子與肝功能、纖維化及炎癥活動程度的相關性，現報道如下。

1 對象和方法

1.1 對象 選擇2014年4月至2016年3月在溫州市中心醫院消化內科診治的肝纖維化患者56例為觀察組，其中男32例，女24例；年齡33～63（46.8±11.2）歲；BMI（24.8±2.1）kg/m2。納入標準：乙型肝炎患者；根據慢性乙型肝炎防治指南（2015更新版）標準[9]，經肝臟病理證實為肝纖維化；患者未開始進行抗病毒治療。排除標準：失代償期肝硬化患者；其他肝臟疾病如脂肪性肝炎、酒精性肝病、其他病毒性肝炎、藥物性肝炎、膽汁性肝硬化、自身免疫性肝炎等患者；合并其他嚴重疾病如腫瘤、腎病、冠心病、肺纖維化、免疫風濕性疾病；不同意參與研究者。選擇同期在本院進行體檢的20例健康體檢者為對照組，其中男13例，女7例；年齡32～64（45.7±10.8）歲；BMI（24.7±2.3）kg/m2。兩組性別、年齡、BMI比較差異均無統計學意義（均P＞0.05）。本研究經醫院倫理委員會批準，研究對象或其家屬均知情同意。

1.2 方法

1.2.1 檢測指標 觀察組抽取空腹靜脈血5ml，應用美國貝克曼庫爾特公司的AU5800全自動生化分析儀檢測肝功能，包括ALT、AST，應用美國應用生物公司的ABI 7300型熒光定量PCR擴增儀（美國應用生物公司）檢測血清HBV-DNA水平。兩組均應用美國Bio-Tek公司酶標儀采用ELISA法檢測血清網膜素、瘦素、脂聯素和內臟脂肪素。網膜素試劑盒購自瑞士Apotech公司，批內CV 5.1%，批間CV 10.2%。脂聯素、內臟脂肪素試劑盒購自美國Phoenix Pharmaceuticals公司，脂聯素批內CV 8.3%，批間CV 10.1%；內臟脂肪素批內CV 5.6%，批間CV 7.0%。瘦素試劑盒購自美國Diagnosis Systems Laboratories公司，批內CV 5.1%，批間CV 6.5%。

1.2.2 組織病理學檢查 對所有觀察組患者進行肝組織活檢。肝組織活檢采用左側臥位，局部麻醉后在B超引導下快速穿刺活檢，避開肝臟大的血管和膽管，取病理標本后常規制片，行HE、膠原纖維及網織纖維染色。根據慢性乙型肝炎防治指南（2015更新版）[9]評價肝組織炎癥活動度（histologic activity,HA）和肝組織纖維化（histologic fibrosis,HF）分期，HA分為4度：0（無）、1（輕度）、2（中度）和3（重度），HF分為S1～S4 4期，其中S1、S2期為輕度肝纖維化，S3、S4期為重度肝纖維化（S4期為早期肝硬化）。

1.3 統計學處理 采用SPSS 16.0統計軟件。計量資料以表示，組間比較采用兩獨立樣本t檢驗；計數資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗。各脂肪細胞因子水平與肝功能、HBV-DNA之間的關系采用Pearson相關分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組對象各脂肪細胞因子水平比較 見表1。

表1 兩組對象各脂肪細胞因子水平比較

由表1可見，兩組脂聯素、瘦素和內臟脂肪素比較差異均無統計學意義（均P＞0.05），觀察組網膜素水平高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。

2.2 觀察組各脂肪細胞因子水平與肝功能指標、HBVDNA的相關性分析 見表2。

表2 觀察組各脂肪細胞因子水平與ALT、AST、H B V-D N A的相關性分析

由表2可見，分別以各脂肪細胞因子的數據為因變量，以肝功能指標中的ALT、AST及HBV-DNA水平作為自變量，結果顯示網膜素、內臟脂肪素、瘦素和脂聯素與ALT、AST、HBV-DNA均無相關性（均P＞0.05）。

2.3 不同HA分度患者脂肪細胞因子水平比較 將HA分度0～1者作為HA低度組，HA分度2～3者作為HA高度組，兩組脂聯素、瘦素、內臟脂肪素和網膜素比較差異均無統計學意義（均P＞0.05），見表3。

表3 不同H A分度患者脂肪細胞因子水平比較

2.4 不同HF分期患者各脂肪細胞因子水平比較 將HFS1～S2期者作為低HF分期組，HFS3～S4期者作為高HF分期組，兩組脂聯素、瘦素和內臟脂肪素比較差異均無統計學意義（均P＞0.05），高HF分期組網膜素水平高于低HF分期組，差異有統計學意義（P＜0.01），見表4。

表4 不同H F分期患者各脂肪細胞因子水平比較

3 討論

網膜素是2003年發現的特異性表達于網膜脂肪組織的細胞因子，它與脂肪組織分泌的其他細胞因子如瘦素、脂聯素和內脂素等共同參與了糖代謝及血管內皮功能調節。本研究顯示4種脂肪細胞因子中，僅有網膜素在兩組之間存在差異，表現為肝纖維化者網膜素水平顯著高于對照組。國內有研究發現，合并脂肪肝的糖尿病患者的網膜素水平低于未合并脂肪肝的糖尿病患者[10-12]。而國外一項研究發現，非酒精性脂肪肝患者網膜素水平升高，甚至可以預測肝細胞氣球樣變，提示高網膜素與肝細胞壞死之間存在關聯[13]。在本研究中，觀察組患者網膜素水平升高，與國外Yilmaz等[13]的研究結果相似。最近Eisinger等[14]探討了失代償期肝硬化患者血清網膜素水平，發現其網膜素水平顯著高于健康對照組，也與本研究的結果相似。不同的研究之間存在較大差異，考慮與所研究的人群和肝臟疾病不同有關，提示網膜素在不同病因學肝病中的改變是不一樣的，發揮的作用也存在差異。

本研究相關分析表明，血清各脂肪細胞因子水平與ALT、AST、HBV-DNA均無相關性。Eisinger等[14]以肝硬化患者為研究對象，也未發現網膜素水平與肝功能存在相關性；凌偉等[8]以丙型肝炎患者為研究對象，未發現網膜素與肝功能和HCV病毒載量及基因型存在相關性，也與本研究結果相似。本研究這一結果提示，一方面，血清脂肪細胞因子水平與肝細胞損傷和病毒復制關系并不密切，另一方面，也不能完全排除研究對象的因素。本研究入選的觀察組均為代償期肝硬化患者，肝功能損傷較輕，肝功能對網膜素水平的影響可能難以顯現出來，需要進一步的研究驗證。

本研究未發現不同肝組織炎癥活動度之間的脂肪細胞因子水平存在差異，進一步提示血清脂肪細胞因子水平與肝細胞損傷和病毒復制無明顯相關性。纖維化分期高的慢性乙肝患者的網膜素水平顯著高于纖維化水平低的患者，提示網膜素與乙肝纖維化有關，可能參與了慢性乙型肝炎向肝硬化的進展。李莉等[4]的研究發現，隨著肝纖維化程度的加重，p53的含量不斷增多，提示p53可能參與了慢性乙型肝炎纖維化的發生，且該纖維化過程與乙酰化修飾有關。而Zhang等[15]的研究發現，網膜素可以通過去乙酰化增加p53的穩定性，抑制肝細胞的增生。因此，我們推測p53可能是網膜素影響肝纖維化的機制之一。但是較高的網膜素水平和較高的肝纖維化分期之間的因果關系尚難以判定，需要前瞻性的研究來證實。其他脂肪細胞因子如脂聯素、瘦素等在肝纖維化中的作用仍存在爭議[16]，在本研究中未發現脂聯素、瘦素與慢性乙肝患者的炎癥和纖維化存在明顯相關性。

本研究的缺陷在于，首先，這是一個橫斷面研究，難以解釋各指標之間的因果關系，尤其是涉及到網膜素此類新型脂肪細胞因子，其生理作用和病理生理作用尚未完全清楚；其次，本研究的主要研究對象是乙肝患者，雖然減少了研究對象的異質性，但是縮小了適用范圍，研究結果的推廣應慎重。

綜上所述，肝纖維化乙型肝炎患者的網膜素水平升高，且與肝纖維化嚴重程度相關，進一步探討網膜素與肝纖維化的關系對于預防乙型肝炎后肝硬化可能具有一定的意義。

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Association of serum adipocytokine levels w ith liver function,fibrosis and inflammatory activity in patients w ith hepatitis B

LIN Jiejun,ZHOU Jianw ei,ZHU Fangchao,et al.Department of Gastroenterology,Wenzhou Central Hospital,Wenzhou 325000, China

Liver fib rosis Hepatitis B Fatty cytokine

2017-01-12）（本文編輯：馬雯娜）

10.12056/j.issn.1006-2785.2017.39.16.2017-99

325000 溫州醫科大學定理臨床學院/溫州市中心醫院消化內科（林介軍、周建偉、朱方超、宋麗、鮑洛文）；溫州醫科大學附屬第一醫院消化內科（黃智銘）

黃智銘，E-mail：zg w z005005@163.com

【 Abstract】 Objective To investigate the association of serum adipocytokine levels w ith liver function,severity of fib rosis and inflammatory activity in patients w ith hepatitis B. Methods Fifty six hepatitis B patients w ith hepatic fibrosis(study g roup) and 20 healthy sub jects (control group)were enrolled in the study.The serum levels of lep tin,ad iponectin and visfatin were measured and com pared between two g roups.Liver biopsy was performed in study group and the inflammatory activity of liver tissue (HA)and hepatic fib rosis staging (HF)were evaluated.The correlation of various serum cytokine levels w ith liver function,HBV-DNA load,inflammatory activity and fib rosis stages was analyzed by Pearson correlation analysis in study group. Results Serum omentin level in study group was significantly higher than that in control g roup(P＜0.05),while there were no significant differences in serum adiponectin,lep tin and visfatin levels between two g roups(all P＞0.05).Pearson correlation analysis showed that there was no correlation between retinal pigment,visceral fat hormone,lep tin,ad iponectin and ALT,AST, HBV-DNA in study g roup(P＞0.05).There were no significantd ifferences in serum adiponec tin,lep tin,visfatin and omentilevels between HA 0-1 (low HA index,n=23)and HA 2-3(high HA index,n=33)patients(all P＞0.05),and there were also no differences in ad iponectin,lep tin and visfatin levels between low HF stage(HFS1-S2,n=21)and high HF stage(HFS3-S4,n=35) patients(all P＞0.05),however,the omentin level in high HF stage patients was significantly higher than that in low stage patients (P＜0.05).Conclusion Serum omentin levelis elevated in hepatitis B patients with liver fibrosis and is associated w ith liver fib rosis severity.