PPAR-γ和survivin基因表達與直腸癌進展的關系

王麗紅 任東紅 禇菲菲 張志玲

(鄭州大學附屬鄭州中心醫院消化科，河南 鄭州 450000)

PPAR-γ和survivin基因表達與直腸癌進展的關系

王麗紅 任東紅 禇菲菲 張志玲

(鄭州大學附屬鄭州中心醫院消化科，河南 鄭州 450000)

目的探討過氧化物酶體增殖因子活化受體(PPAR)-γ和存活素(survivin)基因表達與直腸癌進展的關系。方法選取該院自2011年5月至2015年5月臨床以及病理資料均齊全并經手術切除方式獲得的直腸癌患者大體石蠟標本85例，取同期手術切除的腺瘤組織82例以及同期接受痔上黏膜環切手術治療后的良性病變組織80例。采用免疫組織化學法分析PPAR-γ及survivin蛋白表達，分析其與患者病理特征的關系，采用Logistic回歸分析PPAR-γ及survivin蛋白表達的相關因素。結果癌組織的PPAR-γ及survivin蛋白表達的陽性率明顯高于正常組織及腺瘤組織(P<0.05)。正常組織與腺瘤組織PPAR-γ及survivin蛋白表達的陽性率比較差異無統計學意義(P>0.05)。直腸癌患者PPAR-γ及survivin蛋白表達與病理情況的分化程度、淋巴結轉移及Dukes分級有關，而與年齡及性別無關。Logistic回歸分析法顯示，影響直腸癌患者PPAR-γ及survivin蛋白表達的相關因素有低分化、有淋巴結轉移以及Dukes分級為C～D級。結論PPAR-γ和survivin在直腸癌患者組織中高表達，與直腸癌患者的疾病進展有較大關聯。

過氧化物酶體增殖因子活化受體γ；存活素；直腸癌

過氧化物酶體增殖因子活化受體(PPAR)-γ作為過氧化物酶體自身增殖物的其中一種激活受體，對部分腫瘤細胞的生長以及細胞周期等方面的活動存在一定影響，而存活素(survivin)是一種近期新發現的凋亡抑制類蛋白，通常不表達于正常組織內，卻在特定腫瘤細胞中呈廣泛性表達〔1〕。有報道指出，深入研究并掌握以上兩種基因表達對直腸癌腫瘤細胞的增殖抑制作用以及凋亡活動有促進效果，進而提高臨床治療敏感性〔2〕。本文分析PPAR-γ和survivin的表達及二者與直腸癌進展的關系。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選取鄭州大學附屬鄭州中心醫院自2011年5月至2015年5月臨床以及病理資料均齊全并經手術切除方式獲得的直腸癌患者大體石蠟標本85例，其中男44例，女41例；年齡40～82〔平均(61.51±7.92)〕歲；患者均通過具備豐富臨床經驗的兩位病理醫師進行獨立診斷并復查，最終給予確診。其中含管狀腺癌60例，乳頭狀腺癌11例，黏液腺癌10例，印戒細胞癌4例；高分化30例，中分化32例，低分化23例；Dukes分級：A級21例，B級24例，C級26例，D級14例；淋巴結轉移情況：無轉移67例，有轉移18例。按照正常、腺瘤、高、中、低分化以及轉移癌的次序，制作出2個7×8規格點陣組織芯片，芯片直徑2.0 mm，片厚4 mm。同時選取同期手術切除的腺瘤組織82例，其中男42例，女40例；年齡39～81〔平均(62.53±7.31)〕歲。并選取同期接受痔上黏膜環切手術治療后的良性病變組織80例，男41例，女39例；年齡41～80〔平均(60.36±9.01)〕歲。不同組織標本對應患者的年齡及性別差異無統計學意義(P>0.05)。本研究經醫院倫理委員會批準。

1.2研究方法 以鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶(SP)法進行免疫組織化學法染色，其中試劑規格：兔抗PPAR-γ多克隆抗體以及survivin均為美國Santa cruz公司生產，且抗體工作濃度設置為1∶100，免疫組化檢測所用試劑盒為福州邁新公司生產，其具體步驟需嚴格根據說明書操作。結果評定：PPAR-γ蛋白于細胞中定位通常為細胞核，表現為棕黃顆粒狀；survivin蛋白定位在細胞質或細胞膜之上，極少數細胞核內可見其弱表達，屬于散在型陽性表達形式。借助高倍鏡觀察，隨機對5個視野進行計數，分別計算出其陽性細胞數及總細胞數，并計算陽性細胞所占比例。評定標準：陽性細胞率>90%為陽性，反之為陰性。

1.3統計學方法 應用SPSS21.0軟件進行χ2檢驗、Logistic回歸分析。

2 結 果

2.1不同組織PPAR-γ及survivin蛋白表達的陽性率比較 癌組織PPAR-γ及survivin蛋白表達的陽性率〔61例(71.76%)，63例(74.12%)〕明顯高于正常組織〔1例(1.25%)，2例(2.50%)〕及腺瘤組織〔5例(6.10%)，4例(4.88%)〕(P<0.05)。正常組織與腺瘤組織比較差異無統計學意義(P>0.05)。

2.2PPAR-γ及survivin蛋白表達與直腸癌患者病理情況的關系 見表1。直腸癌患者PPAR-γ及survivin蛋白表達與分化程度、淋巴結轉移及Dukes分級有關(P<0.05)，而與年齡及性別無關。

表1 PPAR-γ及survivin蛋白表達與直腸癌患者病理情況的關系〔n(%)〕

2.3影響直腸癌患者PPAR-γ及survivin蛋白表達的Logistic回歸分析 影響直腸癌患者PPAR-γ及survivin蛋白表達的相關因素有低分化、有淋巴結轉移以及Dukes分級為C～D級。見表2。

表2 影響直腸癌患者PPAR-γ、survivin蛋白表達的Logistic回歸分析

3 討 論

臨床治療直腸癌通常以手術方式為主，但是由于患者術后易出現復發現象，因此，醫生多于術前對患者進行放、化療等形式治療，以期提高臨床治療效果。但臨床研究統計發現，即使結合其他多種治療手段進行綜合治療，患者的復發以及轉移等情況仍未得到有效改善〔3〕。近期研究表明，直腸癌整個發展過程中有多種蛋白以及基因的參與，其自健康組織發展為癌細胞需經歷多個階段，且有關其發病的一項重要機制在于患者細胞凋亡存在調節紊亂現象〔4〕。找出和直腸癌發病存在重要關聯的新型標志物，將其作為疾病治療的靶點，有助于臨床對直腸癌患者病情診斷以及預后效果預估等工作。有報道指出PPAR-γ在諸多腫瘤中高表達，且survivin基因不僅廣泛表達于各類腫瘤內，且其凋亡作用最強〔5〕。

本研究結果符合曾錦榮等〔6〕的報道結果，提示PPAR-γ和survivin基因表達在直腸癌患者中具有更高的陽性率，可能與直腸癌進展存在一定聯系。原因主要可能是因為PPAR-γ和survivin的生化作用機制發揮的調節作用而導致。其中PPAR-γ屬于通過配體進行激活的一種核轉錄性因子，是核激素類受體超家族一員，具備調節脂質以及糖等代謝作用，同時其對脂肪分化以及能量平衡等均發揮關鍵性調節功能。臨床研究發現，PPAR-γ可表達于人類多種腫瘤內，可作為多種腫瘤細胞臨床病理分期和預后效果評估等工作的評定指標〔7〕。本研究發現，對正常健康直腸組織以及腺瘤組織進行檢測，其內PPAR-γ蛋白均呈低表達狀態，但直腸癌患者腫瘤組織內的PPAR-γ卻為高表達，進一步證實PPAR-γ表達和直腸癌發病直接相關。而survivin是一種典型的凋亡抑制類蛋白，研究發現該基因在正常組織中不表達，而是選擇性單純表達于惡性腫瘤內。目前有關survivin基因的研究結果顯示，其屬于IAP家族，能夠抑制細胞凋亡，其在人肝癌、肺癌以及結腸癌等多種惡性腫瘤中均呈現高表達狀態〔8〕。本研究結果證實survivin基因于直腸癌發病早期激活，從而形成癌癥期的大量表達。具體來說，survivin基因作用機制在于其能夠阻止細胞凋亡，并延伸腫瘤細胞整體生存期，進而加大該細胞發生基因改變的概率，從而促進直腸癌發展。由此可知，survivin基因的被激活時間為直腸癌發病初期，進而可將survivin當做直腸癌發病早期高效標志物。

本研究結果還符合趙長林等〔9〕的報道。隨著低分化、有淋巴結轉移及Dukes分級為C～D級的情況發生，患者的病情嚴重程度也隨之變重，這將促進PPAR-γ及survivin蛋白的進一步表達。同時，也可能因為直腸癌患者PPAR-γ和survivin基因二者表達之間同樣存在一定關聯，預示著兩種指標在影響直腸癌發病以及病情發展等方面可能存在一定協同作用，但具體機制目前尚未明確，仍需深入研究總結。

1Wang W，Shao Y，Tang S，etal.Peroxisome proliferator-activated receptor-γ (PPARγ) Pro12Ala polymorphism and colorectal cancer (CRC) risk〔J〕.Int J Clin Exp Med，2015；8(3)：4066-72.

2陳倩倩，毋永娟.結直腸癌腫瘤干細胞標志物的研究進展〔J〕.基礎醫學與臨床，2014；34(3)：422-5.

3尹 鵬，胡 君，儲著凌，等.替米沙坦通過上調PPAR-γ促進結腸癌SW480細胞TIMP-1表達的實驗研究〔J〕.西部醫學，2014；26(2)：160-2.

4章向成，陳光俠，張 紅，等.尼美舒利通過PPA Rγ途徑抑制結腸癌細胞增殖〔J〕.重慶醫學，2015；44(4)：446-9.

5Anderson JR，Mortimer K，Pang L，etal.Evaluation of the PPAR-γ agonist pioglitazone in mild asthma：a double-blind randomized controlled trial〔J〕.PLoS One，2016；11(8)：e0160257.

6曾錦榮，莫碧文，王績英，等.過氧化物酶體增殖因子激活受體激動劑對A549細胞裸鼠移植瘤Caspase-3、Survivin表達的影響〔J〕.中國藥理學通報，2013；29(10)：1418-22.

7郭建霞，張小云，趙春林，等.Wnt/β-catenin信號通路相關因子與結腸癌患者預后的相關性研究〔J〕.河北醫藥，2016；38(3)：371-3.

8Kole L，Sarkar M，Deb A，etal.Pioglitazone，an anti-diabetic drug requires sustained MAPK activation for its anti-tumor activity in MCF7 breast cancer cells，independent of PPAR-γ pathway〔J〕.Pharmacol Rep，2016；68(1)：144-54.

9趙長林，孫 壯，張甘露，等.直腸癌組織PI3K和Survivin及VEGF表達與腫瘤侵襲轉移相關性的探討〔J〕.中華腫瘤防治雜志，2012；19(1)：63-7.

〔2016-12-11修回〕

(編輯 袁左鳴/滕欣航)

王麗紅(1975-)，女，碩士，副主任醫師，主要從事胃腸道疾病的基礎與臨床研究。

R73

A

1005-9202(2017)16-3998-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2017.16.041