低增殖活性胃腸神經內分泌腫瘤組織中IMP3的表達及意義

尓麗綿，吳明利，李 勇，譚碧波，高 揚，王順平，丁 妍，楊會釵

低增殖活性胃腸神經內分泌腫瘤組織中IMP3的表達及意義

尓麗綿1，吳明利1，李 勇2，譚碧波2，高 揚1，王順平1，丁 妍3，楊會釵3

目的 探討胰島素樣生長因子Ⅱ mRNA結合蛋白3(insulin-like growth factor ⅡmRNA binding protein 3, IMP3)在低增殖活性胃腸神經內分泌腫瘤(gastrointestinal neuroendocrine tumor, GI-NET)組織中的表達及意義。方法 采用免疫組化法檢測IMP3在GI-NET中的表達，并復習相關文獻。結果 IMP3在GI-NET細胞質中的表達，陽性率為67.5%(81/120)，增殖分級G1及G2中陽性率分別為61.9%、80.5%，兩組相比差異有統計學意義(P=0.046)；IMP3過表達與腫瘤大小及微創治療預后相關(P<0.05)，腫瘤浸潤至黏膜下層以下組中IMP3表達亦高于局限于黏膜層組，但差異無統計學意義(P>0.05)。結論 IMP3可能在GI-NET的增殖生長中起重要作用。IMP3蛋白可能成為GI-NET的內鏡診療效果及預后評價的指標。

胃腫瘤；胃腸神經內分泌腫瘤；IMP3；內鏡

胰島素樣生長因子Ⅱ mRNA結合蛋白3(insulin-like growth factor Ⅱ mRNA binding protein 3, IMP3)是一種具有高度保守性的mRNA結合蛋白，在正常成人體內通常檢測不到，但在胚胎期水平較高，對胚胎的發育有一定的促進作用。病理狀態下，IMP3表達與多種惡性腫瘤相關[1]，其與胃腸神經內分泌腫瘤(gastrointestinal neuroendocrine tumor, GI-NET)的關系尚未見報道。為探討IMP3在分化良好的低增殖活性GI-NET中的表達，本實驗采用免疫組化法檢測經內鏡切除或活檢GI-NET組織中IMP3的表達，并進一步結合內鏡下形態及術后病理分析在預后良好的GI-NET中IMP3的預警作用，進一步分析IMP3與GI-NET生物學特性的相關性。

1 材料與方法

1.1 材料 收集2006年1月～2014年12月河北醫科大學第四醫院收治的資料完整、診斷明確的GI-NET患者120例，男性59例，女性61例，年齡19～79歲，平均(52±12.5)歲，108例接受內鏡微創切除術，9例手術，3例姑息治療。納入及排除標準：所選病例均為病理免疫組化證實為GI-NET，且依據WHO胃腸胰神經內分泌腫瘤的診斷及分級標準[3]符合病理增殖分級G1、G2。排除并發其他腫瘤及接受過放、化療的患者。排除內鏡切除切緣陽性患者。記錄所有患者的年齡、性別、腫瘤的功能狀態、發生部位、分級(G1、G2級)、轉移情況及治療方法等。本實驗通過醫院倫理委員會審核，所有入選患者及健康體檢者均簽署知情同意書。

1.2 免疫組化 標本均經10%中性福爾馬林固定，常規石蠟包埋，4 μm厚切片，HE染色，光鏡觀察，免疫組化采用SP兩步法。石蠟標本常規切片，脫蠟至水后，于抗體修復液中微波修復，詳細步驟按試劑說明書進行。染色設已知陽性對照，陰性對照用PBS替代，DAB顯色，蘇木精對比染色。免疫組化抗體IMP3稀釋比為1 ∶100，購自美國Immuway公司，IMP3陽性為細胞質呈棕黃色。將陽性染色細胞數>30%記為陽性。

2 結果

2.1 臨床及內鏡下病理特征 120例GI-NET中男性59例，女性61例，年齡19～79歲，平均年齡(52±12.5)歲，增殖分級G1期84例，G2期36例。GI-NET多位于胃及直腸(113/120)，腫瘤直徑多<2 cm(111/120)，內鏡下形態多表現為黏膜下腫物(89/120)，其次為息肉型及平坦充血型。120例均有完整隨訪資料，隨訪時間截至2015年6月，中位隨訪時間40個月(7～99個月)。

2.2 IMP3在GI-NET中的表達 IMP3主要表達于細胞質，在部分細胞胞核中也有表達(圖1)。GI-NET中IMP3的陽性率為67.5%%(81/120)，其中G1期為61.9%，G2期為80.5%，兩組相比差異有統計學意義(P=0.046)。

圖1 GI-NET中IMP3呈胞質彌漫強陽性，SP兩步法

2.3 IMP3表達與GI-NET臨床及內鏡下病理特征之間的關系 IMP3表達與患者性別、年齡及浸潤深度無明顯相關(P=0.647、0.237、0.064)，而與腫瘤的增殖分級、腫瘤大小及內鏡微創治療預后存在相關關系：即IMP3陽性率隨腫瘤分級的增高而增高(P=0.046)。瘤體直徑>2 cm的IMP3表達高于瘤體直徑≤2 cm組，內鏡微創治療復發組中IMP3表達明顯增高(表1)。

3 討論

神經內分泌腫瘤(neuroendocrine neoplasm, NEN)是一組來源神經內分泌細胞的少見腫瘤，這些腫瘤在神經內分泌標志物的表達和生長形式上有一些共同特點，他們可以分泌多肽從而引起激素分泌綜合征[2-3]。可發生于全身許多器官和組織，其中以胃腸胰NEN最為常見。在WHO(2010)分類[4]中NEN根據組織學和增殖活性分為神經內分泌瘤(neuroendocrine tumors, NET)、神經內分泌癌(neuroendocrine carcinoma, NEC)和混合型神經內分泌腺癌。G1級和G2級歸為NET范疇。GI-NET即上述分級中的NET G1及G2，是一類發生于胃腸道、Ki-67增殖活性較低(<20%)的NEN。多為無功能性，呈惰性生長。GI-NET起源于胃腸黏膜Lieberkuhn隱窩深部腸嗜鉻樣細胞(Kulchitsky)，該細胞來源于胚胎神經嵴，是胃腸道中分布最廣、數量最多的神經內分泌細胞，可以分泌5-羥色胺、組胺、緩激肽、激肽釋放酶和前列腺素等20余種物質，引起皮膚潮紅、腹瀉、腹痛、呼吸困難、心血管異常等臨床綜合征，即類癌綜合征。文獻報道[5]GI-NET類癌綜合征發生率不足10%。本組120例患者均未出現類癌綜合征癥狀；GI-NET生長緩慢，臨床上主要表現為非特異的消化系統癥狀，早期不易發現并診斷。

表1 IMP3表達與胃腸神經內分泌腫瘤臨床病理特征的關系

*Fisher檢驗

GI-NET術前超聲內鏡檢查可以確定腫瘤大小、浸潤深度、周圍鄰近臟器有無侵犯以及周圍有無腫大的淋巴結，對于腫瘤術前分期、臨床選擇治療方式可以提供很好的指導作用[6-7]，可明確病變浸潤層次更為安全有效的指導內鏡下切除，如黏膜下層完整，病灶直徑均<2 cm，可采用EMR術，省時且減少并發癥，如黏膜下層受侵者則采取ESD術，以確保病變被完整切除。本組120例患者均經超聲內鏡檢查明確病變深度，其中108例接受鏡下切除治療，近年來通過Ki-67陽性指數及核分裂象數進行對腫瘤增殖活性的評估。國外學者對NET的生物學行為研究發現腫瘤直徑<1 cm且分化良好者轉移率為2%，>1 cm者轉移率達3%～8%[8]。既往研究大多提示直徑<2 cm且未見淋巴結轉移的GI-NET胃鏡治療安全有效[9]，這與我們的研究結果一致，本組中3例轉移患者腫瘤直徑均>2 cm。108例接受內鏡下切除術患者隨訪7～99個月，23例患者再次追加鏡下治療。

IMP3是一種癌胚蛋白，可表達于人類多種腫瘤的細胞質，而在癌旁正常組織中幾乎不表達，是腫瘤細胞增殖以及轉移的關鍵因素之一[10-11]。IMP3可間接調控IGF-Ⅱ基因表達，而IGF-Ⅱ通過激活和結合IGFI受體使酪氨酸激酶氧化磷酸化，氧化磷酸化的IGFI受體再將促有絲分裂的信號傳到細胞內，促進腫瘤細胞有絲分裂、抑制凋亡[12]。近年來文獻報道[13-14]顯示，IMP3表達與原發性消化道腫瘤、肺癌、腎癌、惡性間皮瘤等相關，并且提示遠處癌轉移的可能性和不良的預后。Del Gobbo等[15]對76例肺NEN進行觀察，發現IMP3與肺NEN預后相關，并與Ki-67增殖指數分級相關，>4%的非典型NEN復發及轉移率較高。

綜上表明，IMP3可能在腫瘤浸潤和轉移中發揮重要作用。對本組內鏡切除或活檢的NET組織，通過免疫組化檢測腫瘤組織中IMP3表達，發現IMP3在G2期GI-NET中IMP3陽性率高于G1期GI-NET，進一步結合內鏡下形態及術后病理分析發現GI-NET組織內IMP3的表達與腫瘤大小相關，腫瘤浸潤至黏膜下層組中IMP3表達也呈升高趨勢，由此推測IMP3蛋白可能在NET的增殖及侵襲中起著某種至關重要的作用。且在內鏡微創隨訪中發現微創治療復發再次治療組中IMP3陽性率高于隨訪無明顯變化組。由此推測IMP3或許可能成為GI-NET的內鏡診療效果及預后評價的指標，這有待于大樣本臨床內鏡治療病例的積累及長期的臨床觀察。

[1] Okada K, Fujiwara Y, Nakamura Y,etal. Oncofetal protein, IMP-3, a potential marker for prediction of postoperative peritoneal dissemination in gastric adenocarcinoma[J]. J Surg Oncol, 2012,105(8):780-785.

[2] Modlin I M, Shapiro M D, Kidd M. Siegfried oberndorfer: origins and perspectives of carcinoid tumors[J]. Hum Pathol, 2014,35(12):1440-1451.

[3] Obeg K E. Gastrintestinal neuroendocrine tumors[J]. Ann Oncol, 2010,21 Suppl 7:Vii72-80.

[4] Bosman F T, Carneiro F, Hruban R H,etal. WHO classification of tumours of the digestive system[M]. 4th ed. Lyon: IARC Press, 2010:1-314.

[5] Gustafsson B I, Kidd M, Modlin I M. Neuroendocrine tumors of the diffuse neuroendocrine system[J]. Curr Opin Oncol, 2008,20(1):1-12.

[6] De Angelis C, Manfrè S F, Bruno M,etal. Hegemony and cost-effectiveness of endoscopic ultrasound (EUS) in the field of gastroenteropancreatic-neuroendocrine tumors (GEP-NETs)[J]. Minerva Med, 2014,105(5):363-370.

[7] Zhong D D, Wang C H, Xu J H,etal. Endoscopic ultrasound features of gastric schwannomas with radiological correlation: a case series report[J]. World J Gastroenterol, 2012,18(48):7397-7401.

[8] Spampatti M P, Massironi S, Rossi R E,etal. Unusually aggressive type 1 gastric carcinoid: a case report with a review of the literature[J]. Eur J Gastroenterol Hepatol, 2012,24(5):589-593.

[9] Kwon Y H, Jeon S W, Kim G H,etal. Long-term follow up of endoscopic resection for type 3 gastric NET[J]. World J Gastroenterol, 2013,19(46):8703-8708.

[10] 張亞欣, 蔣 欣, 江 月, 等. 子宮頸鱗狀細胞癌中IMP3表達與MVD的相關性分析[J]. 臨床與實驗病理學雜志, 2014,30(9):996-999.

[11] 林黎娟, 蔡英蘭, 金 政, 等. 胰島素生長因子II mRNA結合蛋白3在胃癌組織中的表達及其意義[J]. 中華普通外科雜志, 2013,28(6):473-474.

[12] Williams C, Hoppe H J, Rezgui D,etal.An exon splice enhancer primes IGF2: IGF2R binding site structure and function evolution[J]. Science, 2012,338(6111):1209-1213.

[13] Lee D J, Xylinas E, Rieken M,etal. Insulin-like growth factor messenger RNA-binding protein 3 expression helps prognostication in patients with upper tract urothelial carcinoma[J]. Eur Urol, 2014,66(2):379-385.

[14] Mhawech-Fauceglia P, Yan L, Liu S, Pejovi T. ER+/PR+/TFF3+/IMP3- immuno-profile distinguishes endometrioid from serous and clear cell carcinomas of the endometrium: a study of 401 cases[J]. Histopathology, 2013,62(7):976-985.

[15] Del Gobbo A, Vaira V, Guerini Rocco E,etal. the oncofetal protein IMP3: a useful marker to predict poor clinical outcome in neuroendocrine tumors of the lung[J]. J Thorac Oncol, 2014,9(11):1656-1661.

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河北省醫學科學研究重點課題(20160620、ZL2014 0022)

河北醫科大學第四醫院1內鏡科、2外三科、3病理科，石家莊 050010

爾麗綿，女，博士，副主任醫師。E-mail: hbsyelm@163.com 李 勇，男，博士，主任醫師，通訊作者。E-mail: li_yong_hbth@126.com

時間：2017-8-20 15:27 網絡出版地址：http://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1073.R.20170820.1527.018.html

R 735.2

A

1001-7399(2017)08-0910-03

10.13315/j.cnki.cjcep.2017.08.018

接受日期：2017-03-28