Roche Cobas e411電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析系統(tǒng)性能評(píng)估

胡海巖，尹麗娟，張靜，馮濤，蔣春林，杜爽

1.內(nèi)蒙古自治區(qū)興安盟人民醫(yī)院 a.檢驗(yàn)科 b.輸血科，內(nèi)蒙古 烏蘭浩特 137400；2.哈爾濱二四二醫(yī)院 檢驗(yàn)科，黑龍江 哈爾濱 150060

Roche Cobas e411電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析系統(tǒng)性能評(píng)估

胡海巖1a，尹麗娟2，張靜1a，馮濤1a，蔣春林1a，杜爽1b

1.內(nèi)蒙古自治區(qū)興安盟人民醫(yī)院 a.檢驗(yàn)科 b.輸血科，內(nèi)蒙古 烏蘭浩特 137400；2.哈爾濱二四二醫(yī)院 檢驗(yàn)科，黑龍江 哈爾濱 150060

目的就人絨毛膜促性腺激素（β-HCG）作為急診項(xiàng)目在Roche Cobas e411電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析系統(tǒng)上的性能進(jìn)行分析評(píng)估。方法根據(jù)美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)（CLSI）文件，中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T408-2012《臨床化學(xué)設(shè)備線性評(píng)價(jià)指南》，使用患者血清和室間質(zhì)評(píng)物，通過β-HCG對(duì)儀器的精密度、準(zhǔn)確度、線性及可報(bào)告范圍與實(shí)驗(yàn)室內(nèi)參考儀器進(jìn)行比對(duì)，以評(píng)估同一項(xiàng)目在實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果是否具有一致性。結(jié)果使用患者混合血清完成β-HCG的精密度測(cè)定試驗(yàn)，批內(nèi)精密度和總精密度CV值小于廠家聲明的CV值；使用室間質(zhì)評(píng)物完成準(zhǔn)確度測(cè)定試驗(yàn)，5份質(zhì)評(píng)物的檢測(cè)結(jié)果與回報(bào)靶值的偏倚在9.8%～13.8%，均在室間質(zhì)評(píng)的測(cè)量范圍內(nèi)；選取接近β-HCG檢測(cè)上限的高值標(biāo)本進(jìn)行線性評(píng)估試驗(yàn)，顯示數(shù)據(jù)組在0.1～9572 mIU/mL，具有臨床可接受的非線性；臨床可報(bào)告范圍為0.1～957200 mIU/L。選擇20個(gè)患者標(biāo)本進(jìn)行比對(duì)試驗(yàn)，計(jì)算與參考儀器間的絕對(duì)偏倚均＜12.5%，比對(duì)通過。結(jié)論β-HCG在Roche Cobas e411電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析系統(tǒng)上的精密度、準(zhǔn)確度符合要求，線性及可報(bào)告范圍可滿足臨床應(yīng)用。

人絨毛膜促性腺激素；電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析系統(tǒng)；性能驗(yàn)證；精密度；準(zhǔn)確度；線性

引言

根據(jù)國(guó)家實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可委及等級(jí)醫(yī)院評(píng)審的相關(guān)要求，臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)其擬開展的定量檢驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行性能評(píng)價(jià)，判斷其是否滿足臨床應(yīng)用的要求，以確定其能否作為臨床診療的指標(biāo)正式投入使用。對(duì)于已開展的檢驗(yàn)項(xiàng)目也要定期進(jìn)行性能評(píng)估，以了解其是否長(zhǎng)期處于一個(gè)較為穩(wěn)定的狀態(tài)。只有檢測(cè)系統(tǒng)處于穩(wěn)定狀態(tài)，檢驗(yàn)科才能提供準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，從而為臨床提供診療支持[1-3]。

2010年，人絨毛膜促性腺激素作為平診項(xiàng)目在我科開始檢測(cè)。應(yīng)臨床需求以及等級(jí)醫(yī)院評(píng)審的規(guī)定，2016年起該項(xiàng)目被列入急診項(xiàng)目在Roche Cobas e411電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析系統(tǒng)上進(jìn)行檢測(cè)。正式使用前，我們按照規(guī)定對(duì)其在該儀器上的檢測(cè)性能進(jìn)行了評(píng)估，其內(nèi)容包括精密度、準(zhǔn)確度，線性及可報(bào)告范圍和與參考儀器的室內(nèi)比對(duì)[4-7]。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本

選取無溶血、黃疸、脂血的患者新鮮血清，冷藏待用；將部分標(biāo)本進(jìn)行混合并分裝，冷凍待用。

1.2 質(zhì)控品

選擇2016年衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心全國(guó)腫瘤標(biāo)志物第一次室間質(zhì)量評(píng)價(jià)質(zhì)控品，批號(hào)為201611～201615。

1.3 試劑與儀器

Roche電化學(xué)發(fā)光人絨毛膜促性腺激素（β-HCG）檢測(cè)試劑盒，儀器為Roche Cobas e411電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析系統(tǒng)。實(shí)驗(yàn)室參考儀器為Roche Cobas c602全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光儀。

1.4 方法

工作人員在經(jīng)過培訓(xùn)、考核合格后對(duì)儀器進(jìn)行操作，在當(dāng)日室內(nèi)質(zhì)控在控的情況下進(jìn)行試驗(yàn)。1.4.1 精密度試驗(yàn)

參照美國(guó)臨床與實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)（CLSI）EP15-A2《用戶對(duì)精密度和準(zhǔn)確度性能的核實(shí)試驗(yàn)-批準(zhǔn)指南》[8]，選擇高、低濃度的新鮮混合血清在當(dāng)日室內(nèi)質(zhì)控在控的情況下進(jìn)行試驗(yàn)[9-10]。每個(gè)濃度標(biāo)本在每個(gè)工作日重復(fù)測(cè)定4次，連續(xù)測(cè)定5個(gè)工作日，計(jì)算出均值（X），標(biāo)準(zhǔn)偏差（S）和變異系數(shù)（CV）。與廠家聲明的CV值進(jìn)行比較，如實(shí)驗(yàn)結(jié)果小于廠家聲明，則判定評(píng)估合格。

1.4.2 準(zhǔn)確度試驗(yàn)

取2016年衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心第一次全國(guó)室間質(zhì)評(píng)樣本進(jìn)行檢測(cè)，共5個(gè)濃度，批號(hào)分別為201611、201612、201613、201614、201615。每個(gè)樣本測(cè)定兩次，與回報(bào)靶值進(jìn)行比較評(píng)價(jià)。

1.4.3 線性范圍評(píng)估試驗(yàn)

根據(jù)中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T408-2012《臨床化學(xué)設(shè)備線性評(píng)價(jià)指南》，選取接近試劑盒聲明的上、下限的新鮮血清（高值H，低值L）各一份。按6L、5L+1H、4L+2H、3L+3H、2L+4H、1L+5H、6H配成7個(gè)濃度水平，每個(gè)濃度測(cè)定兩次，兩次的測(cè)定值計(jì)算得出均值。根據(jù)高低值標(biāo)本的濃度和配比計(jì)算預(yù)期值，將測(cè)定值和預(yù)期值輸入Excel表格，進(jìn)行多項(xiàng)回歸分析，擬合出一階、二階、三階多項(xiàng)式。

通過對(duì)回歸方程的回歸系數(shù)進(jìn)行t檢驗(yàn)，判斷其為線性或非線性。如非線性系數(shù)無顯著性，則認(rèn)為數(shù)據(jù)組具有線性，此時(shí)對(duì)數(shù)據(jù)組進(jìn)行精密度檢驗(yàn)。精密度符合線性判斷要求時(shí)，數(shù)據(jù)分析結(jié)束，判斷數(shù)據(jù)組具有統(tǒng)計(jì)學(xué)線性或一階線性。如任一非線性系數(shù)具有顯著性，數(shù)據(jù)組則為非線性。而后進(jìn)行臨床標(biāo)準(zhǔn)的線性與非線性檢驗(yàn)，計(jì)算ADL（最優(yōu)擬合曲線與直線的平均差異值）。設(shè)定PctBnd（有臨床意義的臨界相關(guān)界值）＜5%為臨床可允許的誤差，將ADL與臨界值比較，ADL小于臨界值，判定為臨床可接受的非線性。否則，判定為臨床不可接受的非線性[7]。

1.4.4 可報(bào)告范圍確定試驗(yàn)

使用線性范圍評(píng)估試驗(yàn)的上限標(biāo)本，根據(jù)臨床需求做機(jī)上百倍稀釋測(cè)定。測(cè)定結(jié)果與原結(jié)果做偏差計(jì)算，結(jié)果＜1/2TE即判斷稀釋結(jié)果與原結(jié)果的差異可接受。可報(bào)告范圍上限為該上限標(biāo)本結(jié)果的100倍。

1.4.5 室內(nèi)比對(duì)試驗(yàn)

選擇盡可能覆蓋檢測(cè)范圍的20個(gè)新鮮患者血清，分裝兩份冷藏保存待用。選擇同一時(shí)間在兩臺(tái)儀器上同時(shí)檢測(cè)，每個(gè)標(biāo)本測(cè)定2次，取平均值。將比對(duì)儀器的均值與參考儀器均值做百分偏倚計(jì)算，結(jié)果小于1/2 允許總誤差（Total Error, TE）即判斷比對(duì)通過，認(rèn)為兩儀器檢測(cè)結(jié)果具有一致性。

2 結(jié)果

2.1 精密度試驗(yàn)結(jié)果

β-HCG批內(nèi)精密度和總精密度的檢測(cè)結(jié)果均小于廠家要求（CV≤8.3%），驗(yàn)證通過。具體結(jié)果，見表1～2。

表1 Roche Cobas e411電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析系統(tǒng)檢測(cè)β-HCG批內(nèi)精密度驗(yàn)證結(jié)果

表2 Roche Cobas e411電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析系統(tǒng)檢測(cè)β-HCG總精密度驗(yàn)證結(jié)果

2.2 準(zhǔn)確度試驗(yàn)結(jié)果

β-HCG準(zhǔn)確度檢驗(yàn)結(jié)果，見表3。檢測(cè)結(jié)果與回報(bào)靶值進(jìn)行偏倚計(jì)算，結(jié)果符合要求，驗(yàn)證通過。

2.3 線性范圍試驗(yàn)結(jié)果

Roche Cobas e411電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析系統(tǒng)檢測(cè)β-HCG線性評(píng)價(jià)測(cè)定結(jié)果和線性評(píng)價(jià)t檢驗(yàn)，見表4～5。

經(jīng)過t檢驗(yàn)后（t=4.57＞t0.05），顯示三階系數(shù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，即三階方程為最佳擬合方程。數(shù)據(jù)擬合結(jié)果是統(tǒng)計(jì)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)的非線性。對(duì)數(shù)據(jù)組進(jìn)行精密度檢驗(yàn)，計(jì)算14次測(cè)定的平均濃度C=4613.943，回歸標(biāo)準(zhǔn)誤σ=60.13598，不精密度σ/C=1.3%。ADL為0.59%。最優(yōu)擬合方程是三階方程，在L（樣本數(shù)）×R（重復(fù)測(cè)量次數(shù)）=14和σ/C=1.3%時(shí)，查臨界值表為5.4%～5.9%，未標(biāo)注字母“P”。表明測(cè)量數(shù)據(jù)的精密度符合做線性評(píng)價(jià)的要求。最終結(jié)論為ADL=0.59%，小于臨界值，數(shù)據(jù)組0.1～9572 mIU/mL具有臨床可接受的非線性。

表3 Roche Cobas e411電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析系統(tǒng)檢測(cè)β-HCG準(zhǔn)確度驗(yàn)證結(jié)果 (mIU/mL)

表4 Roche Cobas e411電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析系統(tǒng)檢測(cè)β-HCG線性評(píng)價(jià)測(cè)定結(jié)果 (mIU/mL)

表5 Roche Cobas e411電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析系統(tǒng)檢測(cè)β-HCG線性評(píng)價(jià)t檢驗(yàn)

2.4 可報(bào)告范圍確定試驗(yàn)結(jié)果

Roche Cobas e411電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析系統(tǒng)檢測(cè)β-HCG可報(bào)告范圍試驗(yàn)結(jié)果，見表6。此次試驗(yàn)可報(bào)告范圍為該上限結(jié)果乘以百倍后，確定可報(bào)告范圍為0.1～957200.0 mIU/mL。

2.5 室內(nèi)比對(duì)試驗(yàn)結(jié)果

20個(gè)覆蓋檢測(cè)范圍的標(biāo)本測(cè)定后，本儀器與參考儀器間的偏倚在-0.58% ～ +12.0%之間，絕對(duì)值＜±12.5%。比對(duì)通過，認(rèn)為兩儀器檢測(cè)結(jié)果具有一致性。

3 討論

檢驗(yàn)科綜合各方面的需求，選定檢測(cè)系統(tǒng)為臨床提供數(shù)據(jù)支撐，出具檢驗(yàn)結(jié)果的可靠與否直接影響到臨床醫(yī)生對(duì)病患的診療。因此熟悉檢測(cè)系統(tǒng)的特點(diǎn)，掌握其性能指標(biāo)就成為了檢驗(yàn)科工作人員的必修課之一。

隨著臨床實(shí)驗(yàn)室的規(guī)范化管理和ISO15189認(rèn)可的不斷深入，各個(gè)廠家在儀器正式投入臨床使用前就按照CLSI及相關(guān)文件的規(guī)定對(duì)其所能開展的檢測(cè)項(xiàng)目進(jìn)行了性能評(píng)價(jià)工作，為實(shí)驗(yàn)室提供完整的性能評(píng)價(jià)報(bào)告。儀器進(jìn)入檢驗(yàn)科后，工作人員只需對(duì)其進(jìn)行定期驗(yàn)證即可。本實(shí)驗(yàn)室于2013年9月順利通過了國(guó)家認(rèn)可委關(guān)于醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可（ISO15189）的現(xiàn)場(chǎng)評(píng)審，在質(zhì)量管理上有了更加規(guī)范化的要求和流程。根據(jù)科室質(zhì)量管理體系的規(guī)定，每年要對(duì)儀器進(jìn)行性能評(píng)價(jià)的驗(yàn)證，其結(jié)果也要符合相應(yīng)要求。

表6 Roche Cobas e411電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析系統(tǒng)檢測(cè)β-HCG可報(bào)告范圍試驗(yàn)結(jié)果 (mIU/mL)

4 結(jié)論

性能評(píng)價(jià)中，精密度檢測(cè)是所有性能評(píng)價(jià)的基礎(chǔ)[10-12]；準(zhǔn)確度是指測(cè)量值與真實(shí)值之間相符合的程度，是檢測(cè)系統(tǒng)或檢測(cè)方法重要的分析性能之一，是臨床可報(bào)告范圍、分析靈敏度及參考區(qū)間等評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)。這兩個(gè)指標(biāo)應(yīng)用的驗(yàn)證方法較為常見，在此不再贅述。線性范圍是指測(cè)定值與稀釋倍數(shù)成線性關(guān)系的范圍，它保證了樣本檢測(cè)結(jié)果在線性范圍內(nèi)準(zhǔn)確可靠[12-14]。本研究使用中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T408-2012《臨床化學(xué)設(shè)備線性評(píng)價(jià)指南》對(duì)β-HCG的線性范圍做了評(píng)價(jià)。這種方法應(yīng)用不多，但能夠敏感的檢出非線性關(guān)系[14-16]。在此為同行加以歸納，以備參考。

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本文編輯 劉峰

Performance Evaluation of Roche Cobas e411 Electrochemical Luminescence Automatic Immunoassay System

HU Haiyan1a, YIN Lijuan2, ZHANG Jing1a, FENG Tao1a, JIANG Chunlin1a, DU Shuang1b
1.a.Department of Clinical Laboratory; b.Department of Blood Transfusion, Xing’an League People’s Hospital of Inner Mongolia Autonomous Region, Ulan Hot Inner Mongolia 137400, China; 2.Department of Clinical Laboratory, Harbin 242ndHospital, Harbin Heilongjiang 150060, China

ObjectiveThis paper aims to evaluate and analyze the performance of Roche Cobas e411 electrochemical luminescence full automatic immune system with β-HCG.MethodsAccording to the clinical and laboratory standards institute (CLSI) file and the People’s Republic of China health industry standard WS/T408-2012 linear evaluation guide clinical chemistry equipment, patients serum, ventricular interstitial material and β-HCG were used to evaluate precision, accuracy, linear reportable range of this machine by comparing the results of Roche Cobas e411 with reference instruments, in order to find whether they had the same results.ResultsMixed serum in patients was used to complete the β-HCG precision test, and results showed that total CV value and CV value within the group were less than manufacturer statement CV value. External quality assessment was used to complete measurement accuracy test, the bias between 5 quality assessment and return target value were all in the range of 9.8%～13.8%, which were all in the range of external quality assessment. High value specimens which close to β-HCG superior limit were chosen to complete linear evaluation experiment, results showed that the data set were in the range of 0.1～9572 mIU/mL, with clinical acceptable nonlinear. 20 patients’specimens were selected to do comparison test, absolute bias of calculation and reference instruments were less than 12.5%, results showed that the test was passed.Conclusionβ-HCG tests in Roche Cobas e411 electrochemical luminescence full automatic immune system show that precision and accuracy of the machine meet the requirements, and linear and reportable range are acceptable in clinical.

human chorionic gonadotropin; electrochemical luminescence full automatic immune system; performance veri fication; precision; accuracy; linear

R446.1

B

10.3969/j.issn.1674-1633.2017.09.021

1674-1633(2017)09-0087-03

2016-11-23

2017-01-06

作者郵箱：283132066@qq.com