miR-205在鼻咽癌組織中的表達及對細胞增殖、侵襲能力的影響△

高英 謝麗

·基礎研究·

miR-205在鼻咽癌組織中的表達及對細胞增殖、侵襲能力的影響△

高英 謝麗＊

目的探討miR-205在鼻咽癌組織中的表達及對細胞增殖、侵襲能力的影響。方法選取57例初治鼻咽癌患者和40例對照組，利用實時熒光定量聚合酶鏈反應(PCR)技術檢測2組組織中的miR-205表達。培養人鼻咽癌細胞CNE-2，根據轉染物不同，將細胞分為miR-205 minic組、minic-對照組、miR-205 inhibitor組和inhibitor-對照組，利用實時熒光定量PCR技術檢測各轉染組細胞中miR-205表達，四氮唑藍(MTT)比色法檢測各轉染組細胞增殖情況，劃痕實驗檢測各轉染組細胞遷移能力，Transwell法檢測各轉染組細胞侵襲能力。結果鼻咽癌組織中miR-205的相對表達量為1.85±0.17，高于對照組的1.14±0.12，差異有統計學意義(t=25.099，P<0.05)。鼻咽癌組織中miR-205的相對表達量與臨床分期、病理分級和頸淋巴結轉移有關(P<0.05)。miR-205 minic組細胞中miR-205的相對表達量為0.87±0.12，顯著高于miR-205 inhibitor組、minic-對照組和inhibitor-對照組，分別為0.34±0.09、0.53±0.11和0.55±0.12，且miR-205 inhibitor組低于minic-對照組和inhibitor-對照組(P<0.001)。miR-205 minic組細胞48 h、72 h和96 h的增殖能力顯著高于minic-對照組和inhibitor-對照組，而miR-205 inhibitor組則低于minic-對照組和inhibitor-對照組(P<0.001)。miR-205 minic組細胞遷移率和侵襲細胞數均高于miR-205 inhibitor組、minic-對照組和inhibitor-對照組，且miR-205 inhibitor組細胞遷移率和侵襲細胞數均低于minic-對照組和inhibitor-對照組(P<0.001)。結論miR-205在鼻咽癌組織中呈高表達，下調miR-205表達可減少鼻咽癌CNE-2細胞增殖、抑制細胞遷移和侵襲能力。(中國眼耳鼻喉科雜志，2017，17：328-332)

鼻咽癌；miR-205；細胞增殖；侵襲能力

鼻咽癌是鼻咽黏膜好發的惡性腫瘤，病因多樣且存在地域差異[1]。由于其起病隱匿，惡性程度高，多數患者臨床確診時已處于中晚期，嚴重影響預后[2]。中晚期鼻咽癌患者初治反應率較低，且5年生存率<60%[3]。目前，鼻咽癌的發病機制尚未完全闡明。有研究[4]指出，鼻咽癌的發病及進展是多因素、多基因、多步驟共同作用的結果。微小RNA(micro RNA，miRNA，miR)是機體廣泛存在、高度保守、含20個核苷酸的小RNA，與多種惡性腫瘤的發生及進展密切相關[5]。miR-205作為miRNA的重要類型，在食管癌[6]、神經膠質瘤[7]、卵巢癌[8]等多種惡性腫瘤中發揮重要作用。本研究對鼻咽癌組織中miR-205的表達進行檢測，并利用轉染miR-205模擬物或抑制物的方法，探討其對人鼻咽癌CNE-2細胞增殖、侵襲能力的影響，以期為鼻咽癌的發病機制研究提供基礎資料。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2014年3月～2016年4月在本科住院治療的初治鼻咽癌患者57例，其中男性36例、女性21例；年齡28～74歲，平均(43.2±9.5)歲。所有患者均經病理學檢驗確診，均未接受放、化療。臨床分期：Ⅰ期4例、Ⅱ期6、Ⅲ期31例、Ⅳ期16例；病理分級：未分化癌23例、低分化鱗狀細胞癌34例；頸淋巴結轉移32例。同期選取因其他疾病行鼻內鏡手術的鼻咽部標本40例作為對照組，均排除鼻咽癌，其中男性24例、女性16例，年齡27～73歲，平均(44.1±10.2)歲。2組研究對象性別、年齡等一般資料差異無統計學意義。鼻咽癌患者均取治療前活檢標本，對照組通過鼻內鏡取鼻咽黏膜組織，保存于-70 ℃液氮中。……