白細(xì)胞介素17A在肺炎鏈球菌急性中耳炎黏膜免疫中的作用△

徐江紅 梁瓊 劉向 李雯 戴文佳

·基礎(chǔ)研究·

白細(xì)胞介素17A在肺炎鏈球菌急性中耳炎黏膜免疫中的作用△

徐江紅 梁瓊 劉向 李雯 戴文佳

目的探討白細(xì)胞介素17A(IL-17A)在肺炎鏈球菌急性中耳炎(AOM)黏膜免疫中的作用。方法6～8周無(wú)特定病原體(SPF)級(jí)BALB/c小鼠，在感染前24 h腹腔注射200 μg IL-17A抗體中和體內(nèi)的IL-17A,注射相同劑量的Ig2a抗體作為對(duì)照組(Ig2a)，經(jīng)鼓膜途徑注射肺炎鏈球菌，感染后第5天取中耳灌洗液，酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA)檢測(cè)IL-17A、CXCL2和CXCL5的水平。取中耳聽泡，乙二胺四乙酸(EDTA)脫鈣，常規(guī)石蠟切片，蘇木素-伊紅(HE)染色，評(píng)估中耳炎的嚴(yán)重程度。新型肺炎鏈球菌PsaA蛋白疫苗經(jīng)鼻腔途徑免疫小鼠，末次免疫后2周取小鼠的脾臟，制成細(xì)胞懸液，PsaA抗原刺激72 h，ELISA檢測(cè)培養(yǎng)上清液IL-17A的水平；末次免疫后2周經(jīng)鼓膜途徑注射肺炎鏈球菌，攻毒后5 d取中耳灌洗液，ELISA檢測(cè)IL-17A、CXCL2和CXCL5的水平。中耳攻毒后5 d取中耳黏膜，抽提RNA，反轉(zhuǎn)錄cDNA,熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測(cè)IL-6、防御素β2和CXCL2 mRNA的表達(dá)水平。結(jié)果在固有免疫中，中和體內(nèi)的IL-17A，感染肺炎鏈球菌后，中耳有更嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)，且中耳IL-17A、CXCL2和CXCL5分泌減少；在適應(yīng)性免疫中，新型肺炎鏈球菌PsaA蛋白疫苗在CTB黏膜佐劑作用下經(jīng)鼻腔途徑免疫后，脾上清液分泌了較高水平的IL-17A，中耳攻毒后中耳黏膜灌洗液中檢測(cè)到較高水平IL-17A，相關(guān)細(xì)胞因子CXCL2、CXCL5水平增高，中耳黏膜IL-6、防御素β2、CXCL2 mRNA表達(dá)量明顯增高。結(jié)論IL-17A在肺炎鏈球菌AOM黏膜免疫中起重要的保護(hù)作用，為AOM的治療和新一代疫苗的設(shè)計(jì)及免疫策略的選擇提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。(中國(guó)眼耳鼻喉科雜志，2017，17：318-322,332)