頂空毛細管氣相色譜法測定硫酸特布他林有機溶劑殘留

李偉強，李 繼，王蓀璇，李 霞

（1．兵器工業衛生研究所521醫院，陜西 西安 710065； 2．陜西省食品藥品檢驗所，陜西 西安 710065）

頂空毛細管氣相色譜法測定硫酸特布他林有機溶劑殘留

李偉強1，李 繼2，王蓀璇2，李 霞2

（1．兵器工業衛生研究所521醫院，陜西 西安 710065； 2．陜西省食品藥品檢驗所，陜西 西安 710065）

目的建立測定硫酸特布他林原料藥中3種有機溶劑殘留量的氣相色譜法。方法 采用頂空毛細管氣相色譜法，以1%二甲亞砜水溶液為溶劑，DB－624型毛細管柱（30．0m×320 m，1．8 m），氮氣為載氣，氫火焰離子化檢測器（FID），柱溫采用程序升溫。結果 甲醇、異丙醇與甲苯3種有機溶劑均達到了完全分離，在考察的質量濃度范圍內線性關系均良好，最低檢測限分別為2．4，2．6，0．8 g／m L，高、中、低3種質量濃度的回收率均大于98%。結論 該方法靈敏度、準確度均達到有機溶劑殘留量的檢測要求，可用于硫酸特布他林中甲醇、異丙醇與甲苯殘留的檢測和分析。

硫酸特布他林；有機溶劑殘留；頂空毛細管氣相色譜法；質量控制

Abstract：Ob jective To establish a headspace capillary gas chromatography method for simultaneously determining the residual organic solvents in terbutaline sulfate．M ethods The headspace capillary gas chromatography method was adopted with 1% aqueous solution of DMSO as the solvent．The DB－624 capillary column（30．0 m×320μm，1．8μm）was adopted with N2used as the carrier gas．Temperature programming was used for column temperature by FID detector．Resu lts The 3 residual organic solvents（methanol，isopropanol，methylbenzene）were completely separated．A good linearity in the experimental concentration was shown．The limit of detection was 2．4，2．6 and 0．8μg／mL．The average recoveries of 3 kinds of high，medium and low concentrations were all more than 98%．Conclusion The sensitivity and accuracy of this method are up to the requirement for the detection of residual organic solvents，which can be used for the detection and analysis of 3 residual solvents（methanol，isopropanol and toluene）in terbutaline sulfate．

Key words：terbutaline sulfate；residual organic solvent；headspace capillary gas chromatography；quality control

硫酸特布他林的化學名為（±）α－[（叔丁氨基）甲基]－3，5－二羥基苯甲醇硫酸鹽（2∶1），為選擇性 β2受體激動劑。因其能舒張支氣管平滑肌并解除其痙攣，且對心臟興奮作用較小，臨床廣泛用于治療支氣管哮喘、慢性支氣管炎、肺氣腫和其他肺部疾病引起的支氣管痙攣[1－3]。目前，國內外文獻報道大多為硫酸特布他林的合成[4]、含量測定[5]、有關物質測定[6]等，對其合成中使用的有機溶劑殘留的控制尚未見報道。本研究中的硫酸特布他林在藥品合成過程中使用了甲醇、異丙醇和甲苯等有機溶劑。根據國際人用藥品注冊技術協調會（ICH）對有機溶劑殘留量測定的指導原則[7]，遵循2015年版《中國藥典（四部）》“殘留溶劑測定法”[8]及相關研究[9－15]，結合企業提供的生產工藝，采用頂空氣相色譜法，以1%二甲亞砜水溶液溶解樣品，同時測定工藝合成中涉及的甲醇、異丙醇和甲苯等3種有機溶劑殘留，效果滿意。現報道如下。

1 儀器與試藥

1．1 儀器

Agilent6890N型氣相色譜儀，氫火焰離子化檢測器（FID），ChemStation色譜工作站(美國 Agilent公司)；SPB－3型全自動空氣源（北京中惠普分析技術研究所）；賽多利斯BS－224s型電子分析天平（精度為0．1mg）；Millipore超純水機(美同Millipore公司)。

1．2 試藥

硫酸特布他林（印度Shimoga Chemicals公司，批號分 別 為 TBS／051／13－14，TBS／052／13－14，TBS／053／13－14）；甲醇、異丙醇、甲苯（分析純，國藥集團化學試劑有限公司）；二甲基亞砜（DMSO，色譜純，德國Merck公司）；水（自制高純水）。

2 方法與結果

2．1 色譜條件與系統適用性試驗

色譜柱：Agilent DB－624型毛細管柱（30．0 m×320μm，1．8μm）；載氣：高純氮；流速：1．5 m L／min；分流比：10∶1；程序升溫：起始柱溫40℃，保持2min后，以5℃ ／min升溫至70℃，再以20℃ ／min升溫至200℃，保持10min；進樣口溫度：200℃，檢測器溫度：220℃；頂空平衡溫度：85℃，平衡時間：30min，頂空定量環體積：1m L，定量環溫度：95℃，傳輸線溫度：105℃。

2．2 溶液制備

稱取甲醇、異丙醇和甲苯各適量，精密稱定，置同一25 m L容量瓶中，以1%DMSO水溶液為溶劑制成每1mL中含甲醇30．04mg、異丙醇50．50mg、甲苯8．94mg的溶液，作為混合對照品貯備液Ⅰ；精密移取該溶液5mL至50mL容量瓶中，加1%DMSO水溶液稀釋至刻度，制成每1mL中含甲醇3．004mg、異丙醇5．050mg、甲苯0．894mg的混合對照品貯備液Ⅱ。精密量取對照品貯備液Ⅱ5mL至50mL容量瓶中，加1%DMSO水溶液稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

取硫酸特布他林樣品1．0 g，精密稱定，置10mL容量瓶中，用1%DMSO水溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

2．3 方法學考察

專屬性試驗：精密量取對照品溶液、空白溶劑及供試品溶液各5 m L，分別置20 m L頂空瓶中，密封，按擬訂色譜條件進樣分析，記錄色譜圖，見圖1?？芍?，所建方法的專屬性良好，各組分均完全分離，相鄰色譜峰的分離度均大于1．5，理論板數均不低于5 000。

線性關系考察：精密量取對照品貯備液Ⅰ0．1，0．5，1．0，1．5，2．0 m L，分別置100m L容量瓶，用1%DMSO水溶液為溶劑稀釋至刻度，搖勻，得標準曲線系列溶液。取上述溶液各5m L，分別置20 m L頂空瓶中，密封。按擬訂色譜條件進樣分析，記錄色譜圖，以各組分峰面積（Y）為縱坐標、質量濃度（X）為橫坐標進行線性回歸。結果見表1。

精密度試驗：量取同一對照品溶液5m L，置20m L頂空瓶中，加蓋，密封，按擬訂色譜條件，連續進樣5次，測定，記錄色譜圖。結果甲醇、異丙醇及甲苯峰面積的RSD分別為1．72%，2．75%和1．43%（n＝5），表明儀器精密度良好。

重復性試驗：取同一批號的樣品（批號TBS／051／13－14），依法制備6份供試品溶液，按擬訂條件進樣分析。結果異丙醇的平均含量為0．066%，RSD為3．80%（n＝6），其他溶劑均未檢出，表明方法重復性良好。

穩定性試驗：取同一對照品溶液，分別于0，2，4，8，12，16，20，24 h時進樣測定。結果甲醇、異丙醇及甲苯峰面積的 RSD值分別為0．91%，1．52%和2．46%（n＝8），表明供試品溶液在24 h內穩定。

圖1 氣相色譜圖

表1 回歸方程及線性范圍（n＝6）

定量限與檢測限確定：逐步稀釋對照品溶液，以信噪比（S／N）≥3確定檢測限，以 S／N≥10確定定量限。結果甲醇、異丙醇及甲苯的檢測限分別為2．4，2．6，0．8μg／m L，定量限分別為7．2，7．8，2．4μg／m L。

加樣回收試驗：稱取已知殘留溶劑含量的供試品（批號為TBS／051／13－14）約0．5 g，精密稱定，共9份，置10 mL容量瓶中，分別精密加入混合對照品貯備液Ⅱ0．8，1．0，1．2 m L，各3份，以1%DMSO水溶液稀釋至刻度，搖勻，制得低、中、高 3種質量濃度的樣品溶液。再精密量取上述溶液各5mL分別置20mL頂空瓶中，密封，按擬訂色譜條件進樣測定，計算回收率。結果見表2。

2．4 樣品測定

依法制備供試品溶液，按擬訂色譜條件進樣分析，按外標法計算各有機溶劑殘留量。結果見表3。

表2 甲醇、異丙醇和甲苯加樣回收試驗結果

表3 樣品中殘留溶劑測定結果（n＝3）

3 討論

試驗中比較了 DMSO和 N，N－二甲基甲酰胺（DMF）2種有機溶劑，結果DMSO無論對樣品還是對照品的溶解性均良好，且對主成分的測定無干擾。同時，優化了DMSO的濃度，結果1%DMSO水溶液效果最好。

試驗中考察了DB－1型與DB－624型2種不同極性的毛細管柱，結果在非極性的DB－1型毛細管柱中甲醇和異丙醇的分離效果差，且峰形拖尾較嚴重。當使用中極性的DB－624型色譜柱時，各組分峰形良好，分離度滿足檢測需要。故最終選擇DB－624型毛細管色譜柱，頂空進樣法，10∶1的分流比測定，結果各待測組分均能達到有效分離，峰形良好。

藥品中有機溶劑的殘留量雖有較多報道，但不同藥品測定的種類和方法各異。甲醇、異丙酯和甲苯等3種有機溶劑均為硫酸特布他林合成中使用并且2015年版《中國藥典》要求檢查的對人體有害的有機溶劑。本研究中建立的檢測方法靈敏度、準確度均達到有機溶劑殘留量的檢測要求，可用于硫酸特布他林中甲醇、異丙醇與甲苯殘留的檢測和分析，且對于硫酸特布他林的質量控制和安全使用有重要意義。

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Determ ination of Three Residual Solvents in Terbutaline Sulfate by Headspace Capillary Gas Chrom atography

Li Weiqiang1，Li Ji2，Wang Sunxuan2，Li Xia2
(1．Weapon Sanitation Institute 521 Hospital，Xi′an，Shaanxi，China 710065；2．Shaanxi Provincial Institute for Food and Drug Control，Xi′an，Shaanxi，China 710065）

R927．11；R974

A

1006－4931(2017)18－0022－03

10．3969／j．issn．1006－4931．2017．18．007

2017－04－10；

2017－06－08)

李偉強（1976－），男，大學本科，主管藥師，研究方向為臨床藥學，（電子信箱）2675611626＠qq．com。

李霞（1974－），女，碩士研究生，主任藥師，研究方向為藥品質量分析和質量標準，（電話）029－62288429（電子信箱）1012575910＠qq．com。