實施去除白細胞血液成分輸注后血小板抗體與血小板輸注療效的探討

邱芳，朱穎，鄒麗萍

實施去除白細胞血液成分輸注后血小板抗體與血小板輸注療效的探討

邱芳，朱穎，鄒麗萍

（贛南醫學院第一附屬醫院輸血科，江西 贛州 341000）

目的 探討反復輸注去除白細胞血液成分和單采血小板后，HLA-Ⅰ抗體和HPA抗體產生的概率及其與血小板輸注療效的關系。方法 選擇有反復輸注去除白細胞血液成分和單采血小板史，現因血小板計數低而需要輸單采血小板的患者，采集其血樣，應用ELISA方法對進行HLA-Ⅰ抗體和HPA抗體的檢測，然后給患者選擇保存期在3 d內的單采血小板進行輸注，輸血后1 h再次采集血樣應用血細胞分析儀進行血小板計數。 結果 輸注去除白細胞血液成分次數＜10次、10～40次、＞40次的患者HLA-Ⅰ抗體陽性率分別為7.5%、20.0%、30.0%。輸注去除白細胞單采血小板次數＜3次、3～8次、＞8次的患者HPA抗體陽性率分別為0%、8%、16%。HLA-Ⅰ抗體和HPA抗體陽性的患者的血小板輸注無效率分別60.9%、100.0%，顯著高于抗體陰性組的輸注無效率1.5%。結論 多次反復輸血可導致血小板抗體的產生，且與反復輸血次數成正比。HLA-Ⅰ抗體和HPA抗體陽性能增加血小板無效輸注的概率，因此輸血前進行血小板抗體篩查及配合性輸注能有效保障血小板的輸注效果及安全性。

HLA-Ⅰ抗體；HPA抗體；血小板輸注無效

血小板是血液的三大有形成分之一，在止血、傷口愈合、血栓形成、炎癥反應、血脂代謝及器官移植排斥等生理和病理過程中具有重要作用[1-2]。血小板輸注是預防和治療出血的重要手段。隨著血小板在臨床治療中的廣泛應用，其輸注過程中所發現的問題也日益突出，特別是血小板無效輸注。近幾年，我市所有血液成分均進行了血液儲存前白細胞的濾除，血小板的輸注也以單采血小板為主，我們對反復輸注去除白細胞血液成分和單采血小板后患者血小板抗體的產生情況及血小板輸注療效進行了探討，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2014年3月～2015年8月間在本院住院的195名需要輸注血小板的曾有輸血史無妊娠史且無感染、發熱、脾腫大等影響血小板輸注的非免疫性因素的患者列為研究對象。

1.2 分組 200名研究對象分為A、B兩組，A組120名，為曾輸注過去除白細胞懸浮紅細胞和/或去白細胞單采血小板血液成分，每袋血液的輸注為1次輸血；B組75名，每個治療量去白細胞單采血小板的輸注為1次輸血。

1.3 主要儀器和試劑式 美國BioTek ELx800通用酶標儀（美國）；Sysmex XE2100全自動五分類血球分析儀（日本）。主要試劑：美國GTI血小板抗體檢測試劑盒GTI-PAK2LE（批號：3002220）。

1.4 標本采集與檢測 所有研究對象均于輸注血小板前采集血樣，用EDTA-2K抗凝真空采血管采集5 mL血樣，A組檢測血小板HLA-Ⅰ抗體；B組檢測HPA抗體。按試劑盒說明書進行操作。

1.5 輸注保存期在3 d內的去白細胞單采血小板1個治療量，1 h后采集血樣進行血小板計數，并計算CCI值和PPR值。

1.6 結果判讀 OD值≤0.35為陰性，若1 h的CCI＜7.5或PPR＜30%判斷為血小板無效輸注。

1.7 統計學方法 采用SPSS19.0統計軟件包進行統計分析，計量資料采用“x±s”表示，組間比較采用t檢驗；計數資料用例數（n）表示，計數資料組間率（%）的比較采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血小板抗體檢測結果 A、B兩組結果顯示血小板抗體的產生與反復輸血密切相關，隨著反復輸血次的增加，抗體陽性率也隨之增高。見表1、表2。

表1 A組HLA-Ⅰ抗體陽性率與反復輸血次數相關性Table 1 Correlation between positive rate of HLA-I antibody and repeated transfusion times in groupA

表2 B組HPA抗體陽性率與反復輸血次數相關性Table 2 Correlation between HPAantibody positive rate and repeated transfusion times in group B

2.2 血小板輸注無效與HLA-Ⅰ抗體和HPA抗體的關系HLA-Ⅰ抗體陽性組和HPA抗體陽性組的1h CCI值和PPR值均顯著低于陰性組，組間比較差異均具有統計學意義（P＜0.05）。見表3、表4。23例HLA-Ⅰ抗體陽性組中致血小板輸注無效15例，血小板輸注無效率為60.9%，6例HPA抗體陽性組致血小板輸注無效6例，因陽性例數太少，沒有進行統計學分析。166例陰性組致血小板輸注無效2例，血小板輸注無效率為1.5%。見表5。

表3 HLA-Ⅰ抗體陽性組與陰性組血小板輸注后1 hCCI、PPR值的比較（n=23）Table 3 Comparison of 1hCCI and PPR values after platelet transfusion in HLA-I antibody positive group and negative group(n=23)

表4 HPA抗體陽性組與陰性組血小板輸注后1 hCCI、PPR值的比較（n=6）Table 4 Comparison of 1hCCI and PPR values after platelet transfusion in HPAantibody positive group and negative group(n=6)

表5 HLA-Ⅰ抗體和HPA抗體對血小板輸注療效的影響比較（n=195）Table 5 Effects of HLA-I antibody and HPAantibody on platelet transfusion efficacy(n=195)

3 討論

隨著輸血醫學的發展，為減少輸血不良反應的發生，各種去除白細胞血液成分及單采血小板已廣泛應用于臨床。國標要求：去除白細胞后，每400 mL全血白細胞數≤5.0×106個，我們分析了應用去除白細胞血液成分和/或去除白細胞單采血小板成分后血小板抗體產生情況及血小板輸注的療效評價。

本次研究中，我們對在院收治的需要進行單采血小板輸注治療且無影響血小板輸注的非免疫性因素的195名患者進行了觀察分析，結果提示反復多次血液成分的輸注，極易產生血小板抗體，減少不必要的血液成分的輸注可減少輸入性抗原的接觸和刺激，從而降低抗體產生的概率。研究還發現，120名患者中HLA-Ⅰ抗體的陽性患者23名，陽性率19.1%，要遠遠低于以往文獻報道的長期輸血患者中45%～70%產生了HLA-Ⅰ抗體[3]，從2009年起，本院患者所用血液均為去除白細胞血液成分，說明去除白細胞血液成分的應用極大程度地降低了HLA同種異體免疫的發生。

迄今為止，已有多篇文獻[4-12]報道了不同國家、不同地區、不同人群的HPA基因檢測頻率存在差異。不同人種及人群中HPA抗原的分布頻率和獲得HPA免疫機會呈正相關性，產生抗體的機會也會增高[13-14]。75名患者中抗HPA抗體陽性率僅8%，低于HLA-Ⅰ類抗體的19.1%，可能因為，我們的研究對象和單采血小板絕大多數來自于同一地區，而同一區域或同一種族之間存在著高頻率的HPA等位基因，在受血者與供血者不相合的可能性相對較小，故產生的概率也相應較小[15]。因此，表現出HPA抗體的低陽性率。研究還顯示，血小板抗體陽性是導致血小板輸注無效的主要原因。

上述結果表明要降低血小板無效輸注的發生必須減少血液輸注的次數，嚴格把握輸注指征，盡量減少不必要的血小板輸注。臨床上對于血小板輸注適應癥，通常是以血小板計數作為判斷指標，而血小板計數波動較大，一些血液病患者長期處于低血小板計數狀態，且血小板計數低于20×109/L時，許多常規的血球計數儀就不夠精確了，這對嚴格把握輸血適應癥帶來了極大的困擾，英國血小板輸注指南中推薦血小板計數同時輔以血栓彈力圖檢測等。醫療機構首先應嚴格把握輸血指針，必要時可輔以血栓彈力圖檢測來綜合判斷。其次，應盡量選擇去除白細胞血液成分的輸注。最后，醫療機構還應對血小板輸注患者實行常規血小板抗體篩檢，并盡可能地選擇配合性血小板輸注。如此，可有效減少血小板無效輸注的發生，避免寶貴血液資源的無謂浪費。

[1]SempleJW,ItalianoJEJr,FreedmanJ.Platelets and the immune continuum[J].Nat Rev Immunol,2011,11(4):264-274.

[2]李波.不同劑量丙種球蛋白聯合激素治療小兒特發性血小板減少性紫癜療效對比分析[J].當代醫學，2017，23（6）：109-111.

[3]Laundy GJ,Bradley BA,Rees BM,et al.Incidence and specificity of HLA antibodies in multitransfused patientswith acquired aplastic anemia[J].Transfusion,2004,44(6):814-825.

[4]Jones DC,Bunce M,Fuggle SV,et al.Human platelet alloantigens(HPAs):PCR-SSP genotyping of a UK population for 15HPA alleles[J]. Eur J Immunogenet,2003,30(6):415-419.

[5]PavkovicM,PetlichkovskiA,StrezovaA,etal.Gene frequencies of human platelet antigens in the Macedonianpopulation[J].Tissueantigens,2006,67(3):241-246.

[6]Nie YM,Zhou HJ,Fu YS,et al.The allele frequencies of HPA 1-16 determined by PCR-SSP in Chinese Cantonesedonors[J].TransfusMed,2010,20(6):376-382.

[7]劉建軍，李志強.上海地區漢族人群人類血小板抗原基因的多態性研究[J].臨床輸血與檢驗，2008，10（3）：209-214.

[8]李執如，王乃紅，楊群身，等.HPA抗原基因頻率和不配合率[J].中國輸血雜志，2006，19（3）：236-237.

[9]林岳興，朱玲玲，徐建忠.浙江漢族人群血小板抗原1-16多態性調查[J].中國輸血雜志，2007，20（6）：487-490.

[10]李雙，王赤林，謝毓斌，等.長沙地區固定血小板獻血者血小板抗原1-5、15系統基因多態性及分析[J].中國輸血雜志，2006，19（30）：198-200.

[11]申衛東，李麗蘭，廖燕，等.多重PCR-SSP技術應用于HPA-1～17bw基因分型研究和廣西壯族人群HPA多態性的分布[J].中國輸血雜志，2014，27（1）：8-13.

[12]廖燕，申衛東，李麗蘭，等.南寧地區人群血小板抗原HPA1-16bw基因分布頻率的研究[J].中國輸血雜志，2010，23（6）：424.

[13]Brouk H,Halle L,Bertrand G,et al.Human platelet antigen allele frequencies in different Algerian populations[J]. Tissue aAntigens, 2010,75(6):673-678.

[14]Rioux-Masse B,MeCullough J.The role of the pretrnsfusion platelet count in platelet trfractoriness[J].Transfusion,2011,51(10):2258-2259.

[15]張偉東，肖露露，葉欣，等.隨機血小板輸注無效患者的HLA抗體分析[J].廣東醫學，2004，25（7）：799-800.

Effect of platelet antibody and platelet transfusion after leukocyte component transfusion

Qiu Fang,Zhu Ying,Zou Li-ping
(The firstAffiliated Hospital of Gannan Medical University,Ganzhou,Jiangxi,341000,China)

Objective To explore the probability of HLA-Ι antibodies and HPA antibodies and its relationship with the curative effect of platelets transfusion induced by repeatedly transfusions of leuko-reduced blood components and apheresis platelets.Methods The patients who have repeated transfusion to leuko-reduced blood components and apheresis platelets are selected for the transfusion of apheresis platelets due to the low platelet count,collecting the blood sample,using ELISA method for HLA-Ι antibodies resistance and resistance to HPA antibodies detection.The patients were given a single platelet infusion collected in 3 days,blood samples were collected 1 hour after transfusion and blood cell analyzer was used to platelet count then.Results Transfusion of Leuko-reduced blood components less than 10,10-40 times,more than 40 times in patients with platelet antibodies positive rates were 0%,7.5%,20.0%,30.0%.Transfusion of Leuko-reduced apheresis platelets less than 3,3-8 times,more than 8 times in patients with platelet antibodies positive rates were 0%,8%,16%.The platelets transfusion efficiency in patients with HLA-Ι and HPA antibodies were 60.9%and 100.0%,significantly higher than that of negative group infusion invalid rate(1.5%).Conclusion Repeated blood transfusion can lead to the production of platelet antibodies,and is proportional to the number of repeated blood transfusion.HLA-I antibody and HPA antibody positive rates can increase the probability of ineffective transfusion of platelets.Therefore,platelet antibodies screening before blood transfusion can effectively protect the effect and safety of platelet transfusion.

HLA-Ι antibodies;Anti-HPAantibodies;Platelets transfusion refractoriness

10.3969/j.issn.1009-4393.2017.28.007