陳蕾
基因芯片法在肺結(jié)核診斷中的臨床應(yīng)用價(jià)值
陳蕾
目的探討基因芯片技術(shù)在肺結(jié)核診斷中的應(yīng)用價(jià)值。方法采集641例肺結(jié)核患者的痰及纖支鏡沖洗液標(biāo)本,同時(shí)進(jìn)行抗酸染色法、MGIT液體培養(yǎng)法+微孔板比例法藥物敏感性試驗(yàn)((簡稱“藥敏試驗(yàn)”)及基因芯片法檢測,分析不同方法檢測結(jié)核分枝桿菌(Mtb)及其異煙肼、利福平耐藥性的敏感度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值和kappa值。不同方法之間Mtb及耐異煙肼、耐利福平、耐多藥陽性檢出率的比較采用χ2檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果基因芯片法敏感度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值和kappa值均較高。基因芯片法Mtb陽性檢出率54.91%高于涂片法27.61%,與液體培養(yǎng)法60.06%比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。基因芯片法和藥敏試驗(yàn)檢測Mtb耐異煙肼、耐利福平、耐多藥陽性檢出率,兩者比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論基因芯片法在檢測Mtb及其耐藥性方面與傳統(tǒng)液體培養(yǎng)法和藥敏試驗(yàn)相比,有較高的敏感度和特異度,檢測時(shí)間短,一致性高,值得臨床應(yīng)用推廣。
基因芯片技術(shù);肺;結(jié)核分枝桿菌;診斷
一、標(biāo)本來源
采集2015年11月至2016年11月住院肺結(jié)核患者痰及纖支鏡沖洗液標(biāo)本,排除檢測失敗、污染等因素,實(shí)際納入標(biāo)本共計(jì)641例,其中有痰者取痰液536例,無痰者行纖維支氣管鏡檢查取纖支鏡沖洗液105例。對標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行抗酸染色鏡檢、液體MGIT培養(yǎng)+藥敏試驗(yàn)和基因芯片檢測。
二、研究方法
1. 涂片檢查:采用萋-尼氏染色法,并遵照《痰涂片鏡檢標(biāo)準(zhǔn)化操作及質(zhì)量保證手冊》[3]的要求進(jìn)行操作。
2. 液體培養(yǎng)檢查:采用BACTEC MGIT960培養(yǎng)基,按照《分枝桿菌分離培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序及質(zhì)量保證手冊》[4]的要求進(jìn)行培養(yǎng),所有涂片標(biāo)本均進(jìn)行培養(yǎng)檢查。
3.藥敏試驗(yàn):經(jīng)BACTEC MGIT960快速培養(yǎng)后分離的陽性菌株,采用微孔板比例法,按照《結(jié)核分枝桿菌藥物敏感性試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作程序及質(zhì)量保證手冊》[5]的要求進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。
4.基因芯片法:利用儀器對患者標(biāo)本經(jīng)過標(biāo)本處理-核酸提取-PCR擴(kuò)增-雜交反應(yīng)-芯片掃描-自動(dòng)判讀,發(fā)現(xiàn)突變的耐藥基因。……