HPLC法測定西帕依固齦液不同制備方法中沒食子酸的含量

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喀什地區食品藥品檢驗所，新疆 喀什 844000

HPLC法測定西帕依固齦液不同制備方法中沒食子酸的含量

阿依努爾·阿木提司馬義江·阿布都熱西提

喀什地區食品藥品檢驗所，新疆 喀什 844000

目的研究不同制備方法對西帕依固齦液中沒食子酸含量的影響，為其制備工藝提供理論支持。方法采用高效液相色譜法測定兩種方法制備的西帕依固齦液中沒食子酸的含量。結果標準規定的方法制備的西帕依固齦液中的沒食子酸的的含量為0.03183mg/mL，改進后的方法制備的西帕依固齦液中的沒食子酸的含量為0.04505 mg/mL。結論新制備方法明顯優于原制備方法。

西帕依固齦液；制備方法；沒食子酸

西帕依固齦液是維吾爾族傳統醫藥，具有清潔口腔、利咽除臭等功效，其有效成分沒食子酸具有清潔口腔、利咽除臭、固澀、燥溫、止血等攻效[1]，用于防治口腔粘膜病、咽喉腫痛等疾病[2]，國家部頒標準維吾爾藥分冊已收載[3]。改進的西帕依固齦液制備方法，同原西帕依固齦液相比，減少了沒食子的用量，經改進的方法制備的試樣，與市售的2批沒西帕依固齦液比對進行了“沒食子酸”的含量測定，證明了改進是成功的。現報告如下。

1 儀器與材料

1.1 儀器 Waters Alliance E-2695高效液相色譜(Waters 2695 分離單元， 2998 光電二極管陣列檢測器)；島津UV-2450紫外可見分光光度計； BP211D型分析天平(德國Sartorius公司)；E100H超聲波清洗機(德國艾爾瑪)。

1.2 材料 沒食子酸對照品(批號：110831-201605，中國食品藥品檢定研究院)；西帕依固齦液(樣品1和樣品3的批號為161206、161012，新疆奇康哈博維藥有限公司；樣品2為按照改進的制備方法制備的試樣)。甲醇(色譜純，美國TEDIA試劑公司)；磷酸(分析純，天津市永大化學試劑開發中心)，水為重蒸餾水；其它試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 處方及制備方法

2.1.1 處方 沒食子 20g，甜蜜素2g，薄荷香精1mL，苯甲酸鈉0.5g

2.1.2 制備方法 取沒食子20g，粉碎成粗粉，加水浸泡1h后，煎煮3次，每次0.5h，合并煎液，濾過，濾液中依次加入甜蜜素2g、薄荷香精1mL及苯甲酸鈉0.5g，攪拌使溶解，加水調整至1000mL，分裝，即得。

2.1.3 改進的處方 沒食子15g，加0.15%的碳酸氫鈉溶液200mL，甜蜜素2g，薄荷香精1mL，苯甲酸鈉0.5g。

2.1.4 改進的制備方法 取沒食子15g粉粹成粗粉 ，加0.15%的碳酸氫鈉溶液200mL浸泡并超聲處理20min后，煎煮3次,每次0.5h，合并煎液，濾過，濾液中依次加入甜蜜素2g、薄荷香精1mL及苯甲酸鈉0.5g，攪拌使溶解，加水調整至1000mL。

2.2 沒食子酸含量的比較

2.2.1 色譜條件[5-6]色譜柱： Waters Sunfire C18(250mm×4.6mm, 5μm)；流動相：甲醇-0.025%磷酸溶液(4∶96)；流速：1mL/min；檢測波長：270 nm；柱溫：25℃；進樣量：10μL；分析方法：外標法[4]。

2.2.2 對照品溶液的配制 精密稱取沒食子酸對照品，加流動相溶解制成0.1060mg/mL的溶液，作為對照品溶液儲備液。精密量取對照品溶液儲備液5mL置50mL量瓶中加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

2.2.3 供試品溶液的配制 精密吸取樣品1、樣品2及樣品3(各兩份)1mL置100mL容量瓶中，加流動相稀釋至刻度搖勻即得。微孔濾膜濾過，備用。

2.2.4 系統適應性試驗 分別按照2.2.2、2.2.3項下方法制備對照品溶液及供試品溶液，按2.2.1項下色譜條件，各進樣10μL，同時采集270nm光譜數據，結果顯示，供試品溶液相應色譜峰的光譜與對照品沒食子酸一致。沒食子酸對照品保留時間為16.2min，理論塔板數大于5000。

2.2.5 線性關系考察 精密量取對照品溶液(0.1060mg/mL)1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL，置10mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，分別取10μL，按“2.2.1”色譜條件下操作，以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，得線性方程為：A=2.3×104C+2.3×103，r=0.9996，表明沒食子酸10.6～106.0μg. mL-1范圍內線性關系良好。

2.2.6 精密度實驗 精密量取對照品溶液(0.1060mg/mL)5mL置50mL量瓶中加流動相稀釋至刻度，搖勻，取10μL，重復進樣5次，以峰面積計算RSD(n=5) 為0.42%，表明本法有較高的精密度。

2.2.7 穩定性實驗 取樣品2，按“2.2.3”方法配制溶液，分別于0、1、2、4、6h進樣，進樣量為10μL，測定沒食子酸的峰面積為331287， 336952，339956,333458,341125；RSD為1.24%，表明供試品溶液穩定性良好。

2.2.8 重復性實驗 取樣品2，平行制備5份供試品溶液，按樣品測定法測定，并對所得數據進行處理，結果測得沒食子酸含量為0.04467 mg/mL，0.04546 mg/mL，0.04498 mg/mL，0.04443 mg/mL，0.04465 mg/mL，RSD為0.89%，表明重復性良好。

2.2.9 加樣回收率實驗 精密量取已知含量的樣品3(批號為161012，含量34.94μg/mL)6份各1mL，分別置100mL量瓶中，再精密加入沒食子酸對照品溶液2.0、5.0 、10.0 mL加流動相稀釋至刻度，進樣測定，計算回收率。結果見表1。

表1 加樣回收率實驗結果 (n=6)

2.2.10 樣品含量的測定 取3種樣品(樣品1，樣品2，樣品3)按“2.2.3”方法制備供試品溶液，按“2.2.1”色譜條件下測定，按外標法計算沒食子酸含量。結果見表2。

表2 3種樣品含量測定結果 (n=3，mg/mL)

3 討論

根據實驗結果，可見不同方法制備的樣品中沒食子酸的提取率有明顯的差別；即樣品1和樣品3采用同樣的方法的制備溶液，其含量無明顯差別，樣品2為通過改進后的方法來制備的，其中沒食子酸的含量明顯高于樣品1和樣品3。說明改進的制備方法對該制劑制備過程中有效成分的提取率有明顯的改善。

根據市售西帕依固齦液中測得的沒食子酸含量均值與改進的方法制備的試樣中的沒食子酸含量比值可以看出，改進的制備方法中，通過使用碳酸氫鈉溶液及提取工程中的超聲處理方法，提取過程中起到膨松作用可提高沒食子中沒食子酸的有效提取率，導致沒食子酸及沒食子酸甲酯含量顯著增高， 從而節省原料藥的投料，在制劑中還起到維持酸堿平衡。節省藥液制備時間，縮短制備周期，提高時間的有效利用。

[1]閆亮，吳佩玲.西帕依固齦液用于治療口腔疾病中的研究現狀[J].牙體牙髓牙周病學雜志，2009,19(8)：489-491.

[2]斯拉甫，努爾買買提·艾買提，阿布都熱依木·玉蘇甫，等.維藥西帕依固齦液的藥理作用研究[J].中國民族醫藥雜志, 1999(3):35-36.

[3]中華人民共和國衛生部藥典委員會.中華人民共和國衛生部藥品標準(維吾爾藥分冊)[S].烏魯木齊：新疆科技衛生出版社，1998:123.

[4]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(四部)[M].北京：中國醫藥科技出版社,2015.

[5]司馬義江·阿布都熱西提，阿依努爾·阿木提. 高效液相色譜法測定維吾爾藥制劑西帕依固齦液中沒食子酸含量[J].中國藥業，2012,21(21):27-28.

[6]歐亮苗，李柯翱，季志紅，等. 西帕依固齦液質量標準研究[J].世界中醫藥，2015(4):586-589.

DeterminationoftheContentofXipayiMouthRinseDifferentPreparationMethodofGallicAcidinHPLC

Ayinuer Amuti Simayijiang Abudourexiti

Kashi Region for Food and Drug Control，Kashi 844000,China

ObjectiveStudy on the effects of different preparation methods on the xipayi liquid content of gallic acid in the preparation process,to provide theoretical support.MethodsThe two methods was evaluated by high performance liquid chromatography (HPLC) method of the preparation of the content of gallic acid in xipayi mouth rinse.ResultsMethods of the preparation of the xipayi mouth rinse in accordance with the prescribed standards of gallic acid liquid solid gum is the content of 0.03183 mg/mL.The improved method of the preparation of the xipayi mouth rinse in accordance with the solid gum liquid of gallic acid content is 0.04505 mg/mL.Conclusionthe new preparation method is superior to the original preparation methods.

Xipayi Mouth Rinse; Preparation Method; Gallic Acid

R29

A

1007-8517(2017)19-0012-03

2017-08-20 編輯：鄧佳麗)

阿依努爾·阿木提 (1974-)，女，維吾爾族 ，大專，主管藥師，研究方向為中藥及民族藥檢驗。E-mail：simayi1102@126.com