泰山野生白蘇葉揮發(fā)油成分GC-MS分析與抑菌活性的研究

鐘 穎

（湖南省湘西自治州人民醫(yī)院藥劑科，湖南 湘西 416000）

泰山野生白蘇葉揮發(fā)油成分GC-MS分析與抑菌活性的研究

鐘 穎

（湖南省湘西自治州人民醫(yī)院藥劑科，湖南 湘西 416000）

目的 研究泰山野生白蘇葉揮發(fā)油成分和抑菌的活性。方法 提取白蘇葉揮發(fā)油進(jìn)行GC-MS分析，選取幾種常見(jiàn)的細(xì)菌和真菌，用平板打孔法測(cè)定揮發(fā)油的抑菌活性。結(jié)果 認(rèn)定40種化合物共占揮發(fā)油總量的98.46%，含量最多的5種化合物分別為2，6-二甲基-6-（4-甲基-3-戊烯基）-雙環(huán)[3.1.1]庚-2-烯、紫蘇酮、戊基苯酚、石竹烯、芳樟醇，分別占到了18.22%、18.15%、17.31%、14.78%、7.68%，白蘇葉揮發(fā)油對(duì)4中菌的活性都具有一定的抑制作用，其中對(duì)紅色毛癬菌的抑制效果最大。結(jié)論 白蘇葉揮發(fā)油對(duì)細(xì)菌和真菌都有抑制作用，對(duì)紅色毛癬菌的抑制效果顯著。

白蘇葉；揮發(fā)油；GC-MS分析；抑菌活性

白蘇是唇形科紫蘇屬一年生草本植物，對(duì)于風(fēng)寒感冒、咳嗽等病癥，能夠起到很好的效果[1-3]，由于白蘇受到季節(jié)影響較大，提取方法和環(huán)境的不同，都會(huì)影響白蘇的活性和成分。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 材料和儀器：本文選取204年9月份采自泰山的野生白蘇，經(jīng)過(guò)相關(guān)專(zhuān)家鑒定為白蘇，摘下白蘇的葉片陰干備用，同時(shí)選取大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌、紅色毛癬菌作為試驗(yàn)菌種。GC-MS儀器選擇日本島津公司的氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，色譜柱也選擇該公司的產(chǎn)品，具體的規(guī)格為30 mm×0.25 mm，0.5 μm，培養(yǎng)箱、工作臺(tái)、臺(tái)式冷凍恒溫振蕩器為實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的國(guó)產(chǎn)設(shè)備。

1.2 方法：首先將白蘇葉陰干搗碎，揮發(fā)油的提取根據(jù)《中國(guó)藥典》附錄XD揮發(fā)油測(cè)定法，白蘇葉的揮發(fā)油為亮黃色，密度略小于水，通常情況下?lián)]發(fā)油的得率在1.5%左右，提取到揮發(fā)油后，用無(wú)水硫酸鈉干燥，然后放到棕色的瓶子中，恒溫4 ℃保存。在氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析中，進(jìn)樣口的溫度為280 ℃，柱箱溫度保持40 ℃3 min，然后以每分鐘10 ℃的速度提高到120 ℃，再以每分鐘5 ℃的速度提高到230 ℃，載氣為氦氣，分流比為50∶1。質(zhì)譜的條件中檢測(cè)電壓為800 V，離子源為EI，溫度為200 ℃，質(zhì)量掃描范圍在30～400 amu。

抑菌活性的檢測(cè)首先制備菌懸濁液，真菌的濃度調(diào)整到2× 105～5×105 cfu/mL，細(xì)菌的濃度通常是真菌的10倍，然后用100 μL的懸濁液均勻涂抹在直徑為9 cm的瓊脂班上，在中間部位打一個(gè)直徑為3 mm的孔，加入5 μL的白蘇葉揮發(fā)油，設(shè)置對(duì)照板，中間加同樣容量的蒸餾水，放入到恒溫培養(yǎng)箱中，大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的溫度為37 ℃，時(shí)間為20 h，白色念珠菌的溫度為35 ℃，時(shí)間為36 h，紅色毛癬菌的溫度為28 ℃，時(shí)間為14 d。

2 結(jié) 果

通過(guò)GC-MS方法對(duì)白蘇葉揮發(fā)油的成分進(jìn)行分析，從樣品中共得到了52個(gè)峰，通過(guò)軟件數(shù)據(jù)庫(kù)的檢索，結(jié)合相關(guān)的文獻(xiàn)，認(rèn)定了40個(gè)峰的化合物，用面積歸一化法定量分析，具體的百分比含量見(jiàn)表1。

通過(guò)平板打孔法對(duì)白蘇葉揮發(fā)油的抑菌活性進(jìn)行測(cè)定，詳細(xì)的抑菌圈直徑見(jiàn)表2。

表2 白蘇葉揮發(fā)油對(duì)菌種的抑菌圈直徑對(duì)比

3 討 論

本文對(duì)泰山野生白蘇葉揮發(fā)油成分測(cè)定，共得到40種化合物，其中含量較多的2，6-二甲基-6-（4-甲基-3-戊烯基）-雙環(huán)[3.1.1]庚-2-烯、紫蘇酮等幾種化合物，與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道的一致，但是具體含量有一定的差異，導(dǎo)致這種結(jié)果的因素主要有遺傳因素、白蘇的生長(zhǎng)環(huán)境、采摘季節(jié)和提取方法等。在抑菌的活性方面，通過(guò)選取幾種常見(jiàn)的細(xì)菌和真菌，發(fā)現(xiàn)白蘇葉揮發(fā)油對(duì)選取的菌都有抑制作用，對(duì)于真菌的抑制作用更加明顯，分析可能與細(xì)胞壁的成分有關(guān)，詳細(xì)的抑制機(jī)制等，還需要深入的研究。

表1 白蘇葉揮發(fā)油的成分

[1] 邱琴,凌建亞,張莉,等.不同方法提取的白蘇葉揮發(fā)油的氣質(zhì)聯(lián)用成分分析[J].藥物分析雜志,2006,26(1):114-119.

[2] 吳玉蘭,丁安偉,馮有龍.荊芥及其相關(guān)藥材揮發(fā)油的成分研究[J].中草藥,2000,31(12):894-896.

[3] 蔣翔,曹恒,劉湘博,等.野生白蘇子中揮發(fā)油的研究[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2010,16(11):56-60.

R282.710.5

B

1671-8194（2017）18-0037-02