滁菊中有效成分的檢測方法研究概述

吳越

摘 要：滁州貢菊為滁州地方特產之一，具有重要的藥用價值，建立其有效成分的檢測方法尤為重要。該文概述了檢測滁菊中揮發油、黃酮類化合物、微量元素、氨基酸、糖類5種物質的常見檢測方法，分別為：氣相色譜檢測器、紫外分光光度法、原子吸收檢測法、分子熒光檢測法及電分析化學檢測法。

關鍵詞：滁菊；有效成分；檢測方法

中圖分類號 O657.72 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731（2017）19-0016-2

1 引言

菊科，為雙子葉植物綱、菊亞綱的第一大科，為草本植物。葉常互生，無托葉。頭狀花序單生或再排成各種花序，外形由一至多層苞片組成的總苞。花有兩性，單性或中性，還有極少的雌雄異株。花萼退化以后，常變為毛狀、刺毛狀或鱗片狀，稱之為冠毛。菊科有大量的藥用、觀賞和經濟植物。

滁州貢菊（以下簡稱滁菊）是安徽省滁州的傳統特產，又名“甘菊”、“白菊”等，為多年生草本菊科植物，為中國“四大名菊”之一。其性微寒，味辛、苦、甘，歸肝肺經，具有疏風清熱、解毒、平肝明目之功。現代藥理檢測分析表明，滁菊中含有黃酮、揮發油、氨基酸和微量元素等有效成分，其中含有揮發油的主要成分二烯酮、龍腦、樟腦、按葉油素等明顯高于其他菊花；總黃酮含量比其他菊花高32%～61%；在含有的17種氨基酸中富含人體必需的8種氨基酸；另外還含有10種天然態的微量元素，尤其是硒的含量比其他菊花高8～40倍，其活性作用強于單純的無機鹽而更易被人體吸收。其使用方法可作茶沖泡飲用，可作中藥材入藥，亦可作菜直接使用，是藥、茶、食三用的純天然綠色食品保健品[1]。

對滁菊中有效成分的檢測，建立其標準方法是一項有著深遠意義的研究課題，對推廣地方產業，發展地方特色有著重要的作用。本文就滁州特產——滁菊中揮發油、黃酮、微量元素、氨基酸、糖類的物質的檢測分別進行了概述，建立其檢測方法，并對現有的文獻中檢測數據進行了歸納和總結，以期為今后的“模板化”檢測滁菊中有效成分提供理論依據。

2 有效成分的檢測方法

2.1 揮發油 揮發油類又稱精油，是一類具有揮發性可隨水蒸汽蒸餾出來的油狀液體，大部分具有香氣，如薄荷油、丁香油等。為多種類型化合物的混合物，其中有脂肪族化合物、芳香族化合物，但更多為萜類衍生物，其中脂肪族化合物：有烴、醇、醛、酮、酯等，廣泛存在于植物特別是水果中，如正丙醇、辛醛、醋酸乙酯、甲酸、辛酸乙酯等。萜類化合物的基本結構大多為異戊二烯，具有（C5H8）n的通式。C10H16稱為單萜類，C15H24稱為倍半萜類，C20H32稱為二萜類，由6個或8個異戊二烯組成的化合物分別叫三萜類和四萜類，由更多異戊二烯組成的化合物叫多萜類。揮發油中的萜類主要為單萜與倍半萜，多萜類在揮發油中并不存在，而為某些樹脂、色素、橡膠等的成分。揮發油中的萜類化合物可以含氧或不含氧。對于大多數揮發油來說不含氧的烴類成分雖占大量，但多數無佳適香氣因而不是重要成分。含氧衍生物有醇、醛、酮、醚、酸、酚、酯等，含量雖較少但大多具有優異芳香氣，是揮發油中的重要成分。

按《中國藥典》中揮發油測定，將滁菊粉碎使能通過2～3號篩，分別用水浸泡，采取水蒸氣蒸餾法提取揮發用，采用GC-MS聯用儀進行檢測，經色譜峰面積歸一化法，得出各組分的含量。周國梁等采用正交實驗法，以揮發油得率為實驗指標，將粉碎度、加水量、浸泡時間、蒸餾時間為考察因素進行正交實驗設計，確定了提取滁菊中揮發油的最佳實驗條件為：菊花粉碎度80100目，14倍加水量，浸泡10h，提取13h。王亞君等對安徽產菊花揮發性化學成分檢測中，其中檢測滁菊中共檢測出182個色譜峰，鑒定了50個化合物，鑒定率為73.22%，其中β-芹子烯為17.85%、杜松腦為7.72%、馬兜鈴烯環氧化物8.90%、龍腦12.84%、樟腦5.90%[2]。

2.2 黃酮類化合物 黃酮類化合物（flavonoids）是一類存在于自然界的、具有2-苯基色原酮（flavone）結構的化合物（圖1）。它們分子中有一個酮式羰基，第一位上的氧原子具堿性，能與強酸成鹽，其羥基衍生物多具黃色，故又稱黃堿素或黃酮。黃酮類化合物在植物體中通常與糖結合成苷類，小部分以游離態（苷元）的形式存在。絕大多數植物體內都含有黃酮類化合物，它在植物的生長、發育、開花、結果以及抗菌防病等方面起著重要的作用。主要代表物有黃岑素、槲皮素、黃岑苷等。

王松等研究了滁菊中黃銅的提取工藝，發現當用80%的乙醇，固液比為1∶100（g/mL），萃取溫度為70℃時，獲得的總黃酮產率最高為75.46mg/g。袁敏等通過實驗得出最佳提取工藝條件為70%乙醇為洗脫劑，樣品上樣濃度為29.75g/mL，料液比為1∶20。衛強等研究了6種大孔樹脂吸附富集滁菊中總黃酮的工藝條件和參數。劉麗君等以蘆丁為標準品，檢測波長為506nm，采用紫外-可見分光光度法測定總黃酮的含量，顯示總黃酮在0～100g/mL與吸收值呈良好的線性關系。舒俊生采用質譜與液相色譜聯用法測定滁菊中含有槲皮素、芹黃素等23種黃酮類化合物。孫艷輝等根據黃酮類化合物與Al3+形成熒光絡合物的原理，以蘆丁為標樣，測定437nm處同步熒光強度[3]。

2.3 微量元素的測定 菊花中常見的含量較多的微量元素主要有Ca、Mg、Fe、Zn等，對于滁州貢菊中微量元素的檢測鮮有報道。多為菊花中微量元素的檢測。對于礦物質元素和重金屬元素含量的檢測一般采取原子吸收光譜法。鄧家勝等使用HNO3-HClO4體系消解樣品，火焰原子吸收光譜法測定產于安徽的3種藥用菊花中的微量元素，通過實驗測得滁菊中主要含有Ca、Fe、Zn、Mn、Mg等對身體有益的礦物質元素。呂瑞等采用粉碎機粉碎混合酸處理后，電熱板加熱微沸后加入雙氧水待測，利用火焰化原子吸收分光光度計測定了黃山貢菊和高原野菊中Fe、Mn、Zn、Cu含量的測定[4]。endprint

2.4 氨基酸的測定 氨基酸重要的作用是在機體中合成蛋白質，為生命提供能量，滿足其生長發育。菊花中含有豐富的氨基酸，其中包含了人體必需的8種氨基酸，研究發現菊花中門冬氨酸、谷氨酸、羥脯氨酸的含量較高，胱氨酸、組氨酸、蛋氨酸含量較低。目前測定氨基酸的方法主要有比色法、色譜法及分子熒光光譜法等。吳霖生等利用氨基酸與乙酰丙酮和甲醛反應可以生成能發出熒光的物質，建立了測定滁菊中氨基酸總含量的方法，并討論了其光譜條件，從波長、酸度、反應溫度、反應時間等參數確定了最佳條件。王慶蘭等采用日立835-50型氨基酸自動測定儀對市售的8種菊花中氨基酸含量進行測定，其中谷氨酸、羥脯氨酸較其他種類的菊花含量較高，苯丙氨酸、脯氨酸含量較低[5]。

2.5 糖類含量的測定 糖類是菊花的主要成分之一，研究發現糖類除了能夠為人體提供必要的能量之外，還具有降血糖、抗病毒、降血脂等作用，菊花中較為常見的糖為：葡萄糖、果糖、蔗糖及各類寡糖、多糖。如今而言，多采用毛細管區帶電泳-安培檢測法分離測定糖類，該方法不僅前處理簡單，并且靈敏度、試劑用量小等特點。朱金坤等構建了CZE-AD系統，對滁菊、杭黃菊、貢菊、亳菊4種菊花中的蔗糖、半乳糖、葡萄糖、果糖分別進行分離檢測，其中滁菊中蔗糖、半乳糖、葡萄糖、果糖相對于其他4種菊花中的含量都較低[6]。

參考文獻

[1]王龍，王德群，韓邦興，等.滁菊茶用與藥用的發展變化[J].安徽中醫學院報，2010，29（6）：75-77.

[2]郭巧生，王亞君，楊秀偉，等.杭菊花揮發性成分的表征分析[J].中國中藥雜志，2008，33（6）：624.

[3]劉利軍，于艷，時維靜，等.安徽省3種藥用菊花總黃酮含量比較[J].安徽科技學院學報，2012，26（4）：47-50.

[4]呂瑞，劉璐，何越.兩種菊花中微量元素含量的測定[J].微量元素與健康究，2013，30（3）：34-36.

[5]王慶蘭，林慧彬，張素芹.不同菊花氨基酸含量的比較研究[J].中國中醫藥科技，2005，12（4）：249.

[6]朱金坤，姚孝林，鄭勝彪.菊花中糖類組分的毛細管電泳-安培檢測研究[J].宜春學院學報，2012，34（4）：94-97.

（責編：張宏民）endprint