防城港金花茶果肉及果核活性成分GC-MS分析

程金生 ，李 龍 ，鐘 鳴

（1.韶關學院英東食品科學與工程學院，廣東韶關512005；2.嘉應學院生命科學學院，廣東梅州512015）

防城港金花茶果肉及果核活性成分GC-MS分析

程金生1，李 龍1，鐘 鳴2

（1.韶關學院英東食品科學與工程學院，廣東韶關512005；2.嘉應學院生命科學學院，廣東梅州512015）

防城港金花茶為國內分布較廣的一類金花茶，國內現有研究較少涉及金花茶果肉或果核有效成分分析.本文采用氣相色譜-質譜聯用技術（GC-MS）分別對防城港金花茶果肉及果核活性成分進行檢測分析.在優化條件下，防城港金花茶果肉中共檢出22種活性成分，其中代表性活性物質有羥乙醛、羥基丙酮、糠醛、5-羥甲基糠醛、十五烷酸和肌醇等；而防城港金花茶去表皮果核中共檢出23種活性成分，其中代表性活性物質包括：十五烷酸、亞油酸甲酯、油酸甲酯、順式-十八碳烯酸、反式角鯊烯和維生素E等，這些活性成分包含一些重要營養性成分.

防城港金花茶；果肉；果核；活性成分；分析

金花茶(Camellia nitidissima Chi)（原變種）在《中國植物志》中被系統地定位為山茶科、山茶族、山茶屬［1］,也是我國八種一級重點珍稀保護植物之一，也是《瀕危野生植物種國際貿易公約》附錄Ⅱ中的植物，與銀杉、桫欏、珙桐等“植物活化石”齊名.金花茶富含豐富的氨基酸、維生素、多糖類營養成分及齊墩果酸、α-香樹素、β-谷甾醇等藥用活性成分，且必需氨基酸占比優于聯合國糧農組織及世界衛生組織相關標準，營養價值高，具有較好的食品研究價值［2］.2010年中華人民共和國衛生部批準金花茶等5種資源為新資源食品（2010年衛生部第9號公告），深入開展金花茶營養性及藥用活性成分研究對于開發新型金花茶功能保健食品、延長金花茶產業鏈及提交產品附加值具有重要意義［3-4］.

防城港金花茶是金花茶分布較廣的品種之一，主要分布于廣西防城港市及周邊地區，尤其是海拔50～700 m酸性土山谷雜木林中，該品種目前已在廣東、廣西各地區廣泛引種［5-6］.近年來，人們對金花茶進行了廣泛的研究［7-11］.

除防城港金花茶外，目前國內外分布較廣或已人工引種的金花茶包括顯脈金花茶及隴瑞金花茶等12個產品.除此之外，據不完全統計，目前國內外另有珍稀瀕危金花茶品種約有42種，包括：東興金花茶、小果金花茶（變種）、中東金茶花、毛瓣金花茶、凹脈金花茶、薄瓣金花茶、小瓣金花茶、四季金花茶（毛籽金花茶）、直脈多脈金花茶、多瓣金花茶、檸檬（黃）金花茶、薄葉金花茶、夏石金花茶、長柱金花茶、龍州金花茶、武鳴金花茶、平果金花茶、頂生金花茶、小花金花茶、弄崗金花茶、細葉金花茶、扶綏金花茶、天峨金花茶、多瓣淡黃金花茶、淡黃金花茶、簇蕊金花茶、直脈多瓣金花茶、博白金花茶、五室金花茶、大金花茶、四川金花茶、貴州金花茶、云南金花茶、離蕊金花茶、越南東京金花茶、越南抱莖（金花）茶、庫克芳金花茶、厚葉金花茶、塔姆島金花茶、胡龍金花茶等（圖1）.

圖1 國內外部分代表性珍稀瀕危金花茶（Camellia bugiamapensis Orel,Curry,Luu&Q.D.圖片來源于文獻9，其它拍攝于南寧金花茶公園）

防城港金花茶果實蒴果扁三角球形，長3.5cm，寬 4.5 cm，3爿裂開，果壁厚4～7 mm，中軸3～4角形，先端3～4裂；果柄長1 cm，有宿存苞片及萼片；種子6～8粒，長約2cm，花期11～12月［6］（見圖2）.

本文采用氣相色譜-質譜聯用技術（GC-MS）對各防城港金花茶果肉及果核活性進行分析.在優化條件下，檢測防城港金花茶果肉及果核等各部位主要活性成分.

圖2 防城港金花茶果實（a-b），果肉層（c，中央位置為切開的一粒果核）及果核(d)

1 試劑與方法

1.1 試劑與儀器

金花茶果實（圖2）購于廣西中港高科有限公司，無水甲醇等試劑均為分析純，購于廣州試劑有限公司.實驗用水為蒸餾水.GC-MS采用Agilent 6890-5973型氣相色譜聯用儀，超聲波萃取采用上海之信JP-100S型超聲波清洗機.

1.2 金花茶果實活性成分萃取

小心將金花茶果實果肉與果核分離.金花茶果肉置于粉碎機中粉碎，分別加入3倍體積的甲醇，于超聲波功率為80 W的超聲波儀中處理2 h，過濾得到其甲醇提取液，將提取液置于旋轉蒸發儀中濃縮，得到粘稠狀金花茶果肉活性成分萃取物，隨后將該萃取物在40°C下真空干燥12 h得最終果肉萃取物.同樣采用此方法，將金花茶果核置于粉碎機中粉碎，分別加入3倍體積的甲醇，于超聲波功率為80 W的超聲波儀中處理2 h，過濾得到其甲醇提取液，將提取液置于旋轉蒸發儀中濃縮，得到粘稠狀金花茶果核活性物質萃取物，隨后將該萃取物在40°C下真空干燥12 h得最終果核萃取物［15］.

1.3 氣相色譜-質譜檢測條件

氣相色譜條件：色譜柱為HP-5MS石英毛細管色譜柱（30 m×0.25 mm×0.25μm）;升溫程序：初始溫度70℃，保持2 min,以13℃/min升溫至230℃，保持3 min,再以8℃/min升溫至280℃，保持12 min；載氣為氦氣;進樣量 1μl，分流比為 50:1［16］.

質譜條件：電離方式為電子轟擊離子源（EI）；電離能量70 eV；進樣口溫度250℃；離子源溫度250℃；掃描質量范圍為：35～500 amu；柱流量1.0 ml/min.質譜標準庫：Nist譜圖庫.

2 結果與討論

2.1 金花茶果肉活性成分分析

目前國內尚無金花茶果肉活性成分的相關研究.少數相關研究僅針對不同金花茶果實、果核形態、質量進行對比分析［17］.本文針對金花茶果肉活性成分相關研究對未來金花茶果肉深加工具有參考意義.本研究在優化條件下，防城港金花茶果肉中共檢出22種活性成分（圖3）.如表1所示，其中可與Nist譜庫匹配識別的活性物質包括：羥乙醛，羥基丙酮，糠醛，2、3-二氫-3、5二羥基-6-甲基-4(H)-吡喃-4-酮，鄰苯二酚，5-羥甲基糠醛，1、4-苯二酚，鄰苯二甲酸二乙酯，十五烷酸，肌醇等.其中含量較高的物質有：5-羥甲基糠醛（6.93%）、羥基丙酮（5.78%）、羥乙醛（5.07%）、肌醇（4.54%）等（見表1）.值得注意的是，防城港金花茶果肉中含有大量的醛、酮或酚類物質（羥乙醛，羥基丙酮，糠醛，2、3-二氫-3、5二羥基-6-甲基-4(H)-吡喃-4-酮，鄰苯二酚，5-羥甲基糠醛，1、4-苯二酚等），有一定毒性，不可直接食用.

但有一點比較特殊的是，防城港金花茶果肉中含有一定的肌醇（也稱環己六醇），其檢出含量為4.54%.而肌醇是鳥類、哺乳類動物的必需營養源，是重要生命物質之一［18］.缺乏肌肉肌醇，小鼠可引起脫毛、大鼠可引起眼周圍異常等癥狀.肌醇屬于維生素B族中的一種，和膽堿一樣，在供給腦細胞營養上扮演重要的角色.有代謝脂肪、降低膽固醇、促進健康毛發的生長等作用［19］.研究表明肌醇是人類細胞生長和存活所必需的營養物質，可促進表皮細胞幾種組成成分的成熟，在胎兒和早期新生兒的生長中發揮重要的作用［20］.進一步研究顯示，肌醇補充劑可顯著降低有臨床意義的短期不良新生兒結局［21］.

基于肌醇重要營養學及藥理學價值，未來可將不可食用、較容易被忽視和廢棄的防城港金花茶果肉作為肌醇提取分離的資源之一，由此可穩定獲得質優價廉的肌醇產品，為食品及制藥工業貢獻力量.

2.2 金花茶果核活性成分分析

如前所述，除果核形態學等相關研究外，目前國內尚無金花茶果核活性成分的相關研究.本工作在條件優化情況下，共在防城港金花茶去表皮果核中檢出23種活性成分（圖4），其中可與Nist譜庫匹配識別的部分活性物質包括：十五烷酸，硬脂酸烯丙酯，亞油酸甲酯，油酸甲酯，順式-十八碳烯酸，硬脂酸，棕櫚酸乙烯酯，油酰氯，反式角鯊烯，維生素E等活性成分.其中含量較高的物質如：順式-十八碳烯酸（6.54%）、硬脂酸（3.59%）、十五烷酸（3.26%）等（見表2）.相比金花茶果肉，金花茶果核中營養成分豐富，含有豐富的順式-十八碳烯酸，亞油酸甲酯，油酸甲酯，反式角鯊烯，天然維生素E等等.其中順式-十八碳烯酸為重要的不飽和脂肪酸，反式角鯊烯則具有提高體內超氧化物歧化酶(SOD)活性、增強機體免疫能力、改善性功能、抗衰老、抗疲勞、抗腫瘤等多種生理功能.除可用于食品工業外，也廣泛應用于化妝品工業.脂溶性的天然維生素E水解產物為生育酚，是最主要的抗氧化劑之一，也可用于肌萎縮、肌營養不良、肝炎、肝硬化、冠心病的輔助治療.

圖3 防城港金花茶果肉GC-MS分析總離子圖

表1 采用GC-MS技術檢出的金花茶果肉部分活性成分

顯而易見，金花茶果核具有較為豐富的營養類活性成分，食品加工價值高，未來可開展相關深加工研究或產業化應用.

表2 采用GC-MS技術檢出的金花茶果核部分活性成分

3 結論

針對國內外研究較少的金花茶果肉及果核，采用氣相色譜-質譜聯用技術對防城港金花茶果肉及果核活性進行了分析.在優化條件下，防城港金花茶果肉中共檢出22種活性成分，其可匹配識別的活性物質包括：羥乙醛，羥基丙酮，糠醛，5-羥甲基糠醛，十五烷酸，肌醇等，其中營養及藥用價值較高的活性物質包括

肌醇等.防城港金花茶去表皮果核中共檢出23種活性成分，其中可匹配識別的活性物質包括十五烷酸，亞油酸甲酯，油酸甲酯，順式-十八碳烯酸，反式角鯊烯，維生素E等，營養類活性成分較為豐富，食品加工價值高.本文相關數據可望為金花茶果肉及果核綜合利用提供一定參考.

但研究過程中，由于單一GC-MS檢測技術的局限性，仍有相當比例的金花茶果肉或果核活性成分無法與Nist標準譜庫匹配并給出確切的物質信息，未來將聯合串聯質譜，核磁共振碳、氫譜，紅外光譜、元素分析等更多檢測手段，確定其它金花茶果肉或果核中暫無法鑒別的其它活性成分信息.

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GC-MS Analysis for the Ingredients of the Flesh and Seeds of Camellia Nitidissima Chi

CHENG Jin-sheng1，LI Long1，ZHONG Ming2
（1.School of Ying-Dong Food Sciences and Engineering,Shaoguan University,Shaoguan 512005;2.School of Medicine,Jiaying University,Meizhou 514031,Guangdong,China）

As a common variety,Camellia nitidissima Chi is distributed widely in Fangcheng Port and neighboring regions.But until now,few reports focus on its fruit flesh and seeds analysis.This paper analyzes the active components of fruit flesh and seeds of Camellia nitidissima Chi by modified GC-MS technology.Investigations reveals that the fruit flesh contained about 22 kinds of active components,including glycollic aldehyde,hydroxyacetone，furaldehyde,5-hydroxymethyl-furfural，pentadecanoic acid，inositol etc.Meanwhile,the fruit seeds of Camellia nitidissima Chi contained about 23 kinds of active components,including pentadecanoic acid，methyl linoleate，cis-octadecenoic acid,squalene and vitamin E etc.,some of which were important nutritional components.These findings were helpful for potential utility of Camellia nitidissima Chi fruit flesh and seeds application.

Camellia nitidissima Chi；fruit flesh；seeds；active components；analysis

R917

A

1007-5348（2017）09-0001-05

2017-06-20

廣東省自然科學基金（2016A030307013）；廣東省醫學科學基金（A2015518）；2017韶關市科技計劃項目（2017CX/001）.

程金生（1976-），男，江西鄱陽人，韶關學院英東食品科學與工程學院副教授，博士；研究方向：食品及藥物分析、農產品綜合開發等.

（責任編輯：閆文龍）