重組CFB-siRNA在脈絡(luò)膜新生血管中抑制作用的實驗研究

李 凡，尚慶麗，郝玉華，馬景學(xué)，葉存喜，王 鑫

(河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院眼科，河北 石家莊 050000)

·論著·

重組CFB-siRNA在脈絡(luò)膜新生血管中抑制作用的實驗研究

李 凡，尚慶麗*，郝玉華，馬景學(xué)，葉存喜，王 鑫

(河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院眼科，河北 石家莊 050000)

目的補體旁路途徑在脈絡(luò)膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，補體因子B(complement factor B,CFB)作為補體旁路途徑的重要因子可成為阻斷補體活化的靶點。本研究探討重組CFB-siRNA在實驗性CNV中的抑制作用與機制。方法取Brown Norway大鼠45只隨機分為空白對照組、實驗對照組、實驗組各15只(30只眼)。空白對照組不給予任何干預(yù)措施，實驗對照組與實驗組均激光光凝建立大鼠CNV模型。實驗對照組在CFB表達(dá)高峰前日尾靜脈注射生理鹽水0.5 μL，實驗組同一時間尾靜脈注射CFB-SiRNA(0.5 μL/75 μg)，均隔日注射1次，共注射3次。各組分別于光凝后3、7、14、21、28 d進(jìn)行熒光素眼底血管造影(fluorescein fundusangiography,FFA)，根據(jù)熒光素滲漏程度對各光凝斑評分并檢測CNV的生長情況；采用免疫組織化學(xué)法檢測各組視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜組織中CFB、血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、堿性成纖維細(xì)胞因子(basic fibroblast growth factor,BFGF)的表達(dá)情況，并測定其灰度值。結(jié)果FFA顯示：實驗組與實驗對照組比較，在光凝后7、14、21、28 d CNV發(fā)生率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。免疫組織化學(xué)檢測結(jié)果顯示：空白對照組正常大鼠CFB、VEGF和BFGF在視網(wǎng)膜和脈絡(luò)膜中的表達(dá)非常弱。CFB表達(dá)情況：光凝后3 d實驗組與實驗對照組CFB表達(dá)達(dá)最高峰，隨后表達(dá)減少，光凝后7 d仍有少量表達(dá)，光凝后14～28 d表達(dá)趨于穩(wěn)定。實驗對照組VEGF、BFGF在光凝后7～14 d表達(dá)明顯增多，光凝后21 d達(dá)高峰；實驗組VEGF、BFGF在光凝后14、21、28 d表達(dá)減少。3組CFB、VEGF和BFGF灰度值在組間、時點間、組間·時點間交互作用差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論尾靜脈注射CFB-siRNA可抑制實驗性CNV的發(fā)展，通過抑制CFB，阻斷補體旁路途徑，減少CNV形成過程中VEGF、BFGF的表達(dá)。

脈絡(luò)膜新生血管化；補體因子B；血管內(nèi)皮生長因子

10.3969/j.issn.1007-3205.2017.11.015

脈絡(luò)膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)受多種因素調(diào)控[1-6]。關(guān)于CNV的確切發(fā)病機制至今尚未明確，也缺少理想有效的治療手段。近期研究發(fā)現(xiàn)補體旁路途徑的激活在實驗性CNV的發(fā)展中起關(guān)鍵作用[7]，旁路途徑中補體因子B(complement factor B, CFB)可以作為一個重要的靶點來阻斷補體活化的旁路途徑。……