兒童青紫型與非青紫型先天性心臟病胸腺病理及免疫功能的對比觀察

郭晨　艾凌云　胡淑霞

[摘要]目的 探討兒童青紫型與非青紫型先天性心臟病患者的胸腺病理及免疫功能，為疾病診治提供依據。方法 選取2016年5月～2017年3月我院收治的30例青紫型先心病患兒（A組）與40例非青紫型先心病患兒（B組）作為研究對象。比較兩組患兒的CD3、CD4、CD8、CD19、NK細胞及殺傷T細胞水平，觀察比較兩組的手術切除胸腺常規病理組織形態變化。結果 B組患兒的淋巴細胞計數、CD3、CD4、CD8、CD19、NK細胞及殺傷T細胞計數均高于A組，差異有統計學意義（P<0.05）。兩組1～2歲患兒的淋巴細胞計數、CD3、CD4、CD8、CD19、NK細胞及殺傷T細胞計數均低于同組0～1歲患兒，差異有統計學意義（P<0.05）。兩組患兒病理檢查可見胸腺結構存在，皮髓境界清楚，皮質淋巴細胞豐富，髓質胸腺小體結構存在，間質無著變，B組1～2歲患兒可見少量星空現象和胸腺輕度萎縮，A組0～1歲患兒可見星空現象和胸腺輕度萎縮，A組1～2歲患兒可見較多星空現象和胸腺明顯萎縮。結論 青紫型先心病患兒較非青紫型先心病胸腺萎縮明顯而免疫功能降低，且先心病患兒胸腺萎縮和免疫功能低下隨年齡增長而加重。

[關鍵詞]兒童；青紫型；非青紫型；先天性心臟病；胸腺病理；免疫功能；對比

[中圖分類號] R725.4 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2017）11（b）-0067-04

[Abstract]Objective To investigate the pathology and immune function of thymus in children with cyanotic and non-cyanotic congenital heart disease，and to provide basis for the diagnosis and treatment of disease.Methods 30 patients with cyanotic congenital heart disease （group A） and 40 patients with non-cyanotic congenital heart disease （group B） treated in our hospital from May 2016 to March 2017 were selected as subjects.The CD3，CD4，CD8，CD19，NK cells and cytotoxic T cells counts in two groups were detected and compared.The hist opathological changes of thymus in two groups were observed and compared.Results The CD3，CD4，CD8，CD19，NK cells and cytotoxic T cells counts in group B were higher than those of group A，and the differences were significant （P<0.05）.The CD3，CD4，CD8，CD19，NK cells and cytotoxic T cells counts in children aged 1-2 years in both groups were lower than those of 0-1 years old children in the two groups，and the differences were significant （P<0.05）.Pathological examination resaults showed that both of the two groups had thymus structure exists，clear edge state，rich cortical lymphocytes，medullary thymus body structure exists，and no interstitial change，besides group B aged 1-2 years old children had small number of stars and thymus mild atrophy，group A aged 0-1 years old children had stars phenomenon and thymus mild atrophy，and group A aged 1-2 years old children had much stars and thymus atrophy.Conclusion Thymic atrophy in children with cyanotic congenital heart disease are severe than that of the children with non-cyanotic congenital heart disease，and immune function in children with cyanotic congenital heart disease are lower than those of the children with non-cyanotic congenital heart disease.And the thymic atrophy and immune function lowering of children with congenital heart disease are aggravated with age.

[Key words]Children；cyanosis；Non-cyanotic；Congenital heart disease；Thymus pathology；Immune functionendprint

先天性心臟病為心臟大血管畸形引發的血流動力學異常等現象，可分為青紫型和非青紫型，?？蓪е滤釅A失衡、營養不良、感染等并發癥而嚴重影響患兒健康[1-3]。而胸腺是對各種應激反應的敏感器官和免疫器官，已有研究表明先天性心臟病患兒胸腺退化早，且其手術治療需切除胸腺[4-6]。因此，先天性心臟病手術可能影響患兒免疫功能和健康狀況，而對先天性心臟病患兒胸腺和免疫功能變化進行觀察，可能有助于對其進行正確診治。因此，本研究選取我院收治的30例青紫型先心病患兒與40例非青紫型先心病患兒作為研究對象，分析比較了青紫型和非青紫型先天性心臟病患兒的胸腺病理變化以及免疫功能變化，旨在為青紫型和非青紫型先天性心臟病的診治提供依據，具體報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2016年5月～2017年3月我院收治的30例青紫型先心病患兒（A組）與40例非青紫型先心病患兒（B組）作為研究對象。納入標準：A組均經心臟超聲確診為法洛四聯癥，病情穩定無急性缺氧，口唇明顯發紺；B組經心臟超聲確診為房間隔缺損、室間隔缺損、二尖瓣狹窄、主動脈狹窄等，且無明顯口唇發紺。排除標準：兩組均排除合并其他復雜心臟急性、合并電解質紊亂、急性感染、肝腎功能異常、心衰等患兒。本研究經我院醫學倫理委員會審核及同意，患者家屬均知曉本研究情況并簽署知情同意書。兩組患兒的性別、年齡、出生體質量等一般資料比較，差異無統計學意義（P>0.05）（表1），具有可比性。

1.2方法

1.2.1治療方法 所有患兒均根據具體病情擇期手術治療，由相關手術經驗>3年的醫師進行手術操作，并積極對合并疾病進行治療。

1.2.2檢測方法 兩組均在入選時取股靜脈血3 ml，采用流式細胞儀檢測指標。比較兩組CD3、CD4、CD8、CD19、NK細胞及殺傷T細胞水平，分別向血液標本中加入相應細胞單克隆抗體（北京同立海源生物科技有限公司提供）和1.5 ml紅細胞裂解液（北京索萊寶科技有限公司提供），在艾本德離心機4℃環境中以5000 r/min轉速和3 cm半徑離心5 min，加入1 ml磷酸鹽緩沖液后上CytoNova 流式細胞儀（北京博奧晶典生物技術有限公司）進行檢測，具體檢測操作嚴格按照試劑盒和儀器說明書引導進行。對手術切除胸腺進行HE染色觀察比較兩組手術切除胸腺常規病理組織形態變化，將手術獲得的胸腺組織常規制成石蠟切片，切片以二甲苯和松節油透明脫蠟10 min，100%乙醇溶液脫苯2次，2 min/次，其后以95%、90%、80%、70%梯度酒精水化各1 min，蘇木精染色10 min，1%鹽酸乙醇分化15 s，0.5%伊紅液染色2 min，70%、80%、90%、95%梯度酒精脫水各1 min，99%乙醇溶液脫水2次，5 min/次，二甲苯透明2次，2 min/次，中性樹膠封片后在光學顯微鏡下隨機選取6個視野（200×）進行觀察。

1.3觀察指標

比較兩組患兒的CD3、CD4、CD8、CD19、NK細胞及殺傷T細胞水平，并觀察比較兩組手術切除胸腺常規病理組織形態變化。

1.4統計學方法

采用SPSS 19.0統計學軟件進行數據分析，計量資料用均數±標準差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗；計數資料采用率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1兩組患兒免疫功能指標的比較

B組患兒的淋巴細胞計數、CD3、CD4、CD8、CD19、NK細胞及殺傷T細胞計數均高于A組，差異有統計學意義（P<0.05）。兩組1～2歲患兒的淋巴細胞計數、CD3、CD4、CD8、CD19、NK細胞及殺傷T細胞計數均低于同組0～1歲患兒，差異有統計學意義（P<0.05）（表2）。

2.2兩組患兒病理檢查結果的比較

兩組患兒病理檢查可見胸腺結構存在，皮髓境界清楚，皮質淋巴細胞豐富，髓質胸腺小體結構存在，間質無著變。A組0～1歲患兒可見星空現象和胸腺輕度萎縮（圖1），1～2歲患兒可見較多星空現象和胸腺明顯萎縮（圖2）。B組0～1歲患兒胸腺結構正常（圖3），1～2歲患兒可見少量星空現象和胸腺輕度萎縮（圖4）。

3討論

近年來隨著檢查技術的不斷發展，各類先天性畸形疾病的診出率不斷增加。先天性心臟病是新生兒常見先天性心臟急性疾病，其臨床發病率較高，可分為青紫型和非青紫型兩種，其中青紫型先天性心臟病病情復雜危重，需盡早進行手術干預以改善病情和預后[7-10]。因此，對青紫型和肺青紫型先天性心臟病進行及時有效地診斷以及治療十分重要，而其臨床診治常以臨床病理和實驗室檢查為參考。臨床先天性心臟病切除術常需對其胸腺組織進行切除，而胸腺組織為免疫器官，采取切除治療可能對患兒免疫功能等造成影響[11-12]。且已有研究表明，先天性心臟病患兒可出現胸腺發育異常和早期退化[13-15]。因此，對先天性心臟病患兒進行胸腺組織以及免疫功能變化的觀察，可能有助于了解其具體病情，指導臨床治療以期改善療效和預后，然而目前此方向研究甚少，尚需進一步研究證實。

本研究對先天性心臟病患兒進行了胸腺病理檢查和免疫功能指標的流式細胞術檢測，并進行了青紫型和非青紫型先天性心臟病患兒之間上述指標的比較。本研究結果提示，青紫型和非青紫型先天性心臟病患兒的胸腺病理檢查均可見胸腺結構存在，皮髓境界清楚，皮質淋巴細胞豐富，髓質胸腺小體結構存在以及間質無著變，且非青紫型0～1歲患兒胸腺結構無明顯異常，非青紫型1～2歲患兒已可見少量星空現象和胸腺輕度萎縮，青紫型0～1歲患兒即可見星空現象和胸腺輕度萎縮，青紫型1～2歲患兒則可見較多星空現象和胸腺明顯萎縮，先天性心臟病患兒胸腺萎縮低下隨年齡增長而加重，且青紫型患兒胸腺萎縮狀況更嚴重。相對于青紫型先天性心臟病患兒，青紫型先天性心臟病患兒的CD3、CD4、CD8、CD19、NK細胞及殺傷T細胞水平均降低，且兩組1～2歲患兒的淋巴細胞計數、CD3、CD4、CD8、CD19、NK細胞及殺傷T細胞計數等均低于其0～1歲患兒，差異有統計學意義（P<0.05），先天性心臟病患兒免疫功能低下，隨年齡增長而加重，且青紫型患兒免疫功能低下狀況更嚴重。因此，臨床應盡早對先天性心臟病患兒進行診治，而新出生嬰兒需密切關注其變化，出現可疑青紫型者及時進行實驗室、超聲等檢查確診并及時干預以期改善療效和預后，而采取措施改善先天性心臟病患兒的免疫功能可能有助于其療效以及預后的改善。endprint

綜上所述，先心病患兒胸腺萎縮和免疫功能低下嚴重，隨年齡增長而加重，且青紫型病情較非青紫型病情嚴重，需及時有效治療。然而本研究樣本量偏小，術后缺乏長期療效和預后觀察，青紫型和非青紫型先天性心臟病胸腺和免疫功能差異需進一步研究探討證實。

[參考文獻]

[1]Munoz-López M，Hoskote A，Chadwick MJ，et al.Hippocampal damage and memory impairment in congenital cyanotic heart disease[J].Hippocampus，2017，27（4）：417-424.

[2]姜靜，卞勇，侯慧艷，等.先天性心臟病患兒術前腦組織氧合的觀察[J].上海交通大學學報（醫學版），2017，37（4）：506-509.

[3]林葦嘉，侯文進，吳偉東，等.術后強化式呼吸道護理在胸腔鏡體外循環下先天性心臟病患者中的應用[J].廣東醫學，2015，36（21）：3415-3417.

[4]Sabzi F，Eizadi B，Javid N，et al.Congenital thymic cyst in the retro cava position：a case report[J].Iran Red Crescent Med J，2015，17（9）：e15984.

[5]吳翠玲.體內誘導iPS細胞向胸腺上皮細胞分化的研究[D].廣州：南方醫科大學，2016.

[6]劉尚國，李漢臣，趙寶生，等.胸腺部分切除對心臟手術患兒圍手術期免疫功能的影響[J].鄭州大學學報（醫學版），2010，45（5）：833-835.

[7]Nair A，Rajesh GN，Sajeev CG.Functional tricuspid stenosis：a rare presentation of suspected rhabdomyoma as congenital cyanotic heart disease[J].Cardiol Young，2017，27（4）：808-811.

[8]李青，張沖，許鐵，等.圍術期肺部感染先天性心臟病小兒CD64的表達及臨床意義[J].江蘇醫藥，2017，43（1）：29-32.

[9]楊望，溫恩懿，胡斌，等.嬰幼兒先天性心臟病合并認知及運動功能障礙的臨床研究[J].第三軍醫大學學報，2015， 37（2）：164-166.

[10]趙小潔，耿玉蘭，陳正立，等.青紫型先心病患兒血清hs-CRP和BNP水平的臨床分析[J].河北醫藥，2014，36（12）：1790-1792.

[11]余詠潮，徐志云，徐激斌，等.先天性心臟病合并肺動脈瓣感染性心內膜炎的外科治療[J].中國胸心血管外科臨床雜志，2013，20（1）：103-104.

[12]陳曉.部分胸腺切除對嬰幼兒心臟直視手術恢復的影響[J].中國實用醫刊，2011，39（19）：82-83.

[13]謝瑤，郭建群，華瑛，等.DiGeorge綜合征繼發自身免疫現象長期隨診1例及文獻復習[J].北京大學學報（醫學版），2016，48（6）：1086-1089.

[14]Kanakis MA，Danias PG，Chatzis AC.Thymic cyst popping up in a patient with congenital heart disease[J].World J Pediatr Congenit Heart Surg，2016，7（3）：372-374.

[15]白曉明.兒童胸腺體積與病因分析及XIAP分子診斷方法建立[D].重慶：重慶醫科大學，2011.

（收稿日期：2017-08-30 本文編輯：孟慶卿）endprint