唑侖類安眠鎮靜藥物常用檢驗方法的分析研究

王玲 崔莉

摘要：目的：對 G C - M S / M S 法分析血液中唑侖類安眠鎮靜藥物的方法進行研究。方法：用固相萃取法提取血液中的唑侖類安眠鎮靜藥物，再用質譜對樣品含量進行定性檢測，對唑侖類安眠鎮靜藥物給予 G C -M S / M S 法分析 。結果：血液中唑侖類安眠鎮靜藥物檢出濃度在0.05ug / m L -0.1 0 ug / m L范圍內時 ，工作曲線線性關系良好。 回 收 率 區 間 為 8 0.5 % -90.1 % 。結論 ： G C- M S / M S 法分析尿液中唑侖類安眠鎮靜藥物具有簡單高效的優點，可用于安眠鎮靜類藥物誤服中毒或刑事案件中毒者的血液樣本分析。

關鍵詞：固相萃??； 唑侖類；尿液；安眠鎮靜；色譜分析

目前，麻醉搶劫、麻醉強奸等刑事案件屬一種新型多發性案件，在這類案件中，常用的麻醉藥物為唑侖類安眠鎮靜藥物，特別是三唑侖 （ Triazolam）、 阿譜唑侖 （ Alprazolam）和艾司唑侖 （ Estazolam）等 。 對受害人血液 、尿液中麻醉藥物或其代謝物進行檢測，是用來判斷他們是否服用或注射這類安眠鎮靜藥物的直接依據，也是為查清案情及獲取犯罪證據等的迫切需要 。因此，唑侖類安眠鎮靜類藥物檢驗是十分重要的，文獻報道的檢驗安眠鎮靜類藥物方法主要為調節酸堿性后用有機溶劑或固相萃取方法提取，以氣相色譜、氣質聯用、液相色譜和液質聯用法[1-6] 進行分析，操作過程繁瑣。本次研究采用氣相色譜質譜聯用 （ G C-M S/ M S）的方法對唑侖類安眠鎮靜藥物進行定性、定量檢測，結果表明此方法具備操作簡捷、高效靈敏的優點。

1材料與方法

1.1主要儀器與試劑

PE Clarus SQ8氣相色譜-質譜聯用儀：美國珀金埃爾默（PerkinElmer）公司產品；Turbomass 6.0 軟件；12管固相萃取裝置：GC Science 公司；氮吹儀：美國PIERCE 公司；精密移液器：大龍醫療設備（上海）有限公司；固相萃取柱：① Waters 公司 Oasis HLBcartridge（3 cc/60 mg）；② varian 公司 Bond ElutC 18 （3 cc/200 mg ）；③ varian 公司 Bond Elut C 2 （3cc/200 mg ）；超聲波清洗儀等。

實驗用安定、三唑侖、阿譜唑侖、艾司唑侖標準品為公安部物證鑒定中心提供， 其它試劑均為分析純；pH 6.0 磷酸鹽緩沖液；空白血樣來源于不含上述混合樣的健康人血。

1.2檢驗方法

100μg/mL的標準儲備液：安定、三唑侖、阿譜唑侖、艾司唑侖 、SKF 525A 各 100 mg 加入到 100 mL 容量瓶中，用乙醇定容至刻度， 配制成濃度為 1 mg/mL 的混合溶液， 再移取 10 mL 混合溶液至100 mL容量瓶中精確定容， 配制好的標準樣品濃度為 100μg/mL。

血液樣本處理：取血樣2mL于離心管中，加100μg/ mL標準溶液250 μL和pH 6.0磷酸鹽緩沖液混勻，超聲振蕩5 min， 10 000 r/min 離心 10 min，取上清液于試管中。

固相萃取柱活化：用5mL甲醇以1mL/min 的流速淋洗活化柱子，然后將上清液以0.5 mL/min的流速通過柱子，再將5mL蒸餾水以1 mL/min的流速過柱洗雜，通氮氣干燥5min，最后用氯仿以0.5mL/min 的流速洗脫藥物，收集洗脫液于試管中，氮吹儀濃縮至干，加250μL乙醇溶解，供 GC/MS 檢驗。

氣相色譜條件：色譜柱30 m x 0.2 5m m x 0.2 5μm，彈性石英毛細柱 以He為載氣，柱體溫度80℃，持續2 min，升溫速率為20℃/ min升溫至280℃后保持18min，進樣口溫度280℃，進樣量為 1μL，不分流。

質譜條件：離子阱溫度190℃，倍增器電壓1700V，掃描質量區間 40- 450 m /z，掃描模式為全掃描采集模式，掃描時3.2 m in -30 min，熔劑延時間3min，E I電子轟擊源70 eV。

2結果

2.1色譜分離

對提取溶劑進行考察表明，藥物和內標均顯示出良好的提取效果，各 待測物質在色譜條件下分離完全，且檢測不受空白血液干擾影響。

2.2定性分析

采用全離子掃描檢測模式。檢測分析物和內標的定量離子，根據色譜峰面積用內標工作曲線法進行定性分析。檢出濃度限在0.05ug / m L -0.10 ug / m L范圍內。本次研究采用p H 值為6的磷酸鹽緩釋液，平行操作3次，可知回收率區間為 80.5 % -90.1 %。

3討論

本次研究結果表明，使G C- M S / M S 法對血液中唑侖類安眠鎮靜藥物進行定性、定量測定，在pH值為6的體系中，唑侖類安眠鎮靜藥物回收率區間為80.5 % -90.1 %。此外，離子阱串聯質譜的應用 在對唑侖類安眠鎮靜藥物進行定性 定量測定的同時還可避免干擾物的影響，縮小檢驗誤差。所以，G C - M S/ M S 法分析血液中唑侖類安眠鎮靜藥物具有簡單高效的優點，可用于唑侖類安眠鎮靜藥物誤服中毒或刑事案件中毒者的血液樣本分析。

參考文獻

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作者簡介：王玲（1984.9-），女，滿族，吉林伊通，吉林省四平市公安局查支隊，工程師，全日制本科，研究方向：毒物毒品檢驗.

崔莉（1989.05-），女 ，滿族，遼寧省撫順市，吉林省四平市公安局刑事偵查支隊，職稱：無 ，研究生，研究方向：毒物毒品檢驗.