同工酶和SSR分子標記技術在親緣關系鑒定中的應用

石祥鵬

摘要：作物種質資源親緣關系的確定可以為種質資源的有效利用和優良品種的選育提供理論依據，本文綜述了同工酶和SSR分子標記技術在親緣關系鑒定中的應用，并對上述兩種技術在育種中的應用進行了展望。

關鍵詞：親緣關系;同工酶;SSR標記

0 前言

微衛星（microsatellite）又稱簡單序列重復（simplesequence repeats，SSR），是指在真核生物整個基因組中存在序列較短且重復出現的核苷酸序列。SSR的多態性主要由于兩端序列的重復序列數目或重復程度不同導致的，且是相對保守的單拷貝序列，因此可根據側翼序列設計引物。

遺傳應用上，同工酶原理在于其功能相同但結構不同，由于結構中氨基酸序列或組成有差異致使同工酶在電泳時遷移率存在差異。分離方法主要有電泳法、層析法、酶學法和免疫學法等，其中以電泳法應用最為廣泛。同工酶在不同的生理狀態、發育時期、不同品種中的活性、數目都變化較大，其電泳圖譜在一定條件下較為穩定，具有種屬專一性。

文中筆者就SSR分子標記和同工酶在種質資源的遺傳多樣性正確評價和合理利用進行概述。

1 SSR分子標記

SSR分子標記具有較高的多態性、共顯性，在基因組上分布均勻、隨機，對DNA樣本質量要求不高，遺傳信息量大等特征，因而在遺傳多樣性分析方面得到廣泛應用。

艾先濤等利用SSR標記對新疆自育陸地棉品種進行遺傳多樣性分析，得出品種間具有相對較高的遺傳相似性，總體上遺傳多樣性不豐富，表明新疆自育陸地棉品種間親緣關系較近。陸敏佳等利用SSR引物對41個藜麥種質的多態性及其親緣關系進行了分析，結果表明，共檢測出139個等位基因條帶，平均為8.7;16對引物的多態信息含量（PIC）變幅為0.208～0.432，平均為0.366，表明來源于不同地區的遺傳距離較遠，遺傳基礎較廣泛。

2 同工酶

同工酶分析技術是通過電泳和組織化學方法進行特異性染色而把酶蛋白分子分離，并將其位置和活性直接在染色區帶以酶譜的形式標記出來。DNA上結構基因的遺傳信息決定了同工酶多肽鏈結構中的氨基酸排列順序，借助于酶譜分析的方法識別控制譜帶表達的基因，從而從本質上揭示材料間的遺傳差異性。

劉承源等利用同工酶對月季種質資源的親緣關系及雜種真實性進行分析，在相對遷移率為0.264-0.858的位點處共獲得7條酶帶，其中共有酶帶3條，特征酶帶4條，表明月季種質間遺傳多樣性豐富的同時，又存在一致性。李永祥等對3種性別野牛草幼葉和幼穗的3種同工酶（過氧化物酶、超氧化物歧化酶、多酚氧化酶）進行酶譜分析，結果表明葉片的過氧化酶、多酚氧化酶可以用來對野牛草進行早期性別鑒定。

3 展望

同工酶和SSR分子標記技術在育種中主要用于種質資源間遺傳多樣性分析、聚類劃分群體等方面，經過長時間的摸索、探究，已經形成較為成熟的技術體系;單核苷酸多態性（SNP）技術的出現表明未來檢測手段應朝著更加精確、細致的方向發展。

參考文獻

[1]宋志文，曹軍，楊光.東北地區野豌豆屬植物過氧化物酶同工酶研究[J].植物研究，2001，（01）：131-135.

[2]Chevreau E，Leuliette S，Gallet M.Inheritance and linkage ofisozyme loci in pear（Pyrus communis L.）[J].Theor Appl Gen-et，1997，94：498～506.

[3]朱四元，陳金湘，劉愛玉，等.利用SSR標記對不同類型抗蟲棉品種的遺傳多樣性分析[J].湖南農業大學學報（自然科學版），2006，（05）：469-472.

[4]艾先濤，梁亞軍，沙紅，等.新疆自育陸地棉品種SSR遺傳多樣性分析[J].作物學報，2014，40（02）：369-379.

[5]陸敏佳，蔣玉蓉，陸國權，等.利用SSR標記分析藜麥品種的遺傳多樣性[J].核農學報，2015，29（02）：260-269.

[6]陳立強，師尚禮，馬春暉.野生及栽培苜蓿種質資源遺傳多樣性的同工酶分析[J].草業科學，2014，31（06）：1070-1079.

[7]劉承源，王輝，邱文昌，等.基于過氧化物同工酶分析月季種質資源的親緣關系及雜種真實性[J].廣西植物，2016，36（01）：114-120+100.

[8]李永祥，王顯國，叢麗麗，等.不同性別野牛草同工酶酶譜分析[J].草地學報，2012，20（03）：530-535.