微生物學(xué)檢驗(yàn)材料采集、保存和運(yùn)送

賈北寧（遼寧省葫蘆島市南票區(qū)畜產(chǎn)品安全監(jiān)察所 125027）

1 采集

1.1 病料采集的注意事項(xiàng)

病料應(yīng)該新鮮，有代表性，有一定的數(shù)量。從雞的尸體上取材料時(shí)，夏天不應(yīng)遲于6～8h，冬季不應(yīng)遲于12～24h。

為了進(jìn)行病原體的分離，病料應(yīng)盡可能減少污染。因此，在尸體剖檢前，應(yīng)將尸體浸泡在適宜消毒劑溶液中，既作了皮膚和羽毛的消毒又減少在剖檢時(shí)羽毛和皮屑飛揚(yáng)對(duì)病料的污染。

要求在剖開(kāi)腹腔后，首先取微生物檢查材料，減少病料在空氣中暴露的時(shí)間，避免在進(jìn)行病理學(xué)檢查時(shí)污染病料。

采集病料要求無(wú)菌，所用的器械和容器必須事先滅菌，盡可能以無(wú)菌操作采集病料。

病料采集后，如不能立刻進(jìn)行檢驗(yàn)，應(yīng)立即存放在冰箱中。

進(jìn)行病原微生物檢驗(yàn)時(shí)，應(yīng)根據(jù)疾病的性質(zhì)不同而采集不同的病料。

1.2 病料的采集方法

1.2.1 組織和實(shí)質(zhì)臟器的采集方法

病料要用無(wú)菌操作的方法從新鮮的尸體采集，為避免污染，剖開(kāi)腹腔后，注意不要損壞腸道。如有細(xì)菌分離培養(yǎng)條件，首先以燒紅的鐵片燙烙臟器表面，用接種環(huán)（火焰滅菌）自燙烙的部位插入組織中緩緩轉(zhuǎn)動(dòng)接種環(huán)，取少量組織或液體，作涂片鏡檢或接種在培養(yǎng)基上。培養(yǎng)基可根據(jù)不同情況而進(jìn)行選擇。一般常用鮮血瓊脂平板、普通瓊脂平板、營(yíng)養(yǎng)肉湯或皰肉培養(yǎng)基，必要時(shí)，還用其他特殊培養(yǎng)基。

1.2.2 液體材料的采集方法

血液、膽汁、滲出液和濃汁等，可用滅菌吸管、毛細(xì)吸管或注射器經(jīng)燙烙部位插入，吸取內(nèi)部液體材料，然后將材料注入滅菌的試管中，塞好棉塞送檢。也可用接種環(huán)經(jīng)消毒的部位插入，提取病料直接接種在培養(yǎng)基上。

1.3 全血的采集方法

全血是指加抗凝劑的血液。用無(wú)菌操作，從雞的心臟采血，盛入試管中。根據(jù)欲采的血量，在試管中加入適量的抗凝劑（3.8～4%的枸櫞酸鈉0.1ml，可抗1ml血液。也可以在5ml血中加入20%枸櫞酸鈉2～3滴）。

1.4 血清的采集方法

用無(wú)菌操作從雞的心臟采血數(shù)毫升（一定不要加抗凝劑），放在滅菌的試管中，擺成斜面，待血液凝固，析出血清后，再將血清吸出，置于另一滅菌試管中。

1.5 腸道及腸內(nèi)容物采集方法

腸道只需要選擇病變最明顯的部分，將其中的內(nèi)容物取掉，用滅菌水輕輕沖洗，然后放入盛有滅菌的30%甘油鹽水緩沖保存液瓶中送檢。也可將腸管剪開(kāi)，除去內(nèi)容物，用燒紅的鐵片輕輕燙烙黏膜表面，將接種環(huán)插入黏膜層，取少量材料接種在培養(yǎng)基上。

燒烙腸道表面，用吸管扎穿腸壁，從腸腔內(nèi)吸取內(nèi)容物，放入試管中，或者將帶有糞便的腸管兩端結(jié)扎，從兩端剪斷送檢。

1.6 皮膚及羽毛的采集方法

皮膚病料要選擇病變最明顯的邊緣部分，采取少許放于滅菌容器中送檢。羽毛也要在病變明顯部分采集，用刀將羽毛及其根部皮屑刮取少許放入滅菌容器中送檢。

1.7 胚胎樣品

選取完整、無(wú)腐敗的胚胎送檢。

2 病料運(yùn)送

涂片要求涂薄而均勻，自然干燥后，為了防止玻片互相磨蹭，玻片之間墊以火柴棍把最上面的一張翻過(guò)來(lái)，使涂面向下，用小線扎好，最后用紙包好，送檢。

裝在試管和廣口瓶中的病料應(yīng)密封后裝在冰筒中運(yùn)送，防止試管和容器翻倒。

運(yùn)送整個(gè)雞的尸體，用浸透適宜消毒液的布包好，裝入塑料袋中。

送檢材料應(yīng)附說(shuō)明，包括以下內(nèi)容：送檢單位，畜主的姓名和畜禽場(chǎng)的地址，畜禽飼養(yǎng)的品種及其數(shù)量，被感染的畜禽種類(lèi)，首發(fā)和繼發(fā)病例的日期及造成的損失；出現(xiàn)臨床癥狀的畜禽數(shù)量、死亡畜禽數(shù)量及其年齡，臨床癥狀及其持續(xù)時(shí)間，死亡情況和時(shí)間，基本病理變化，免疫和用用藥情況等；送檢樣品清單和說(shuō)明，包括病料的種類(lèi)和數(shù)量、保存方法、要求做何種檢測(cè)，送檢者的姓名、地址、郵編和電話，送檢日期等。