張學武 (山東省諸城市畜牧獸醫管理局 262200)
犬瘟熱病毒 (Canine Distemper Virus,CDV),屬于副黏病毒科麻疹病毒屬。多種動物 (如犬、狐貍、狼、獅子、老虎等)均可感染。目前研究還發現,人也可感染該病毒,所以,犬瘟熱是除狂犬病外可以傳播給人的第二種疫病。
國外對CDV的診斷大多采用分子生物學方法。Zurbriggen[1]等用地高辛標記N基因互補的特異性RNA探針,可以查證單個感染細胞中存在的目的核酸序列,而且敏感性高,特異性強。
國內對CDV診斷主要采用傳統的方法。例如病毒分離、病毒學方法和血清學方法。這些方法的敏感性和特異性都低于分子生物學方法,所以不能最終確診。現在國內也在逐步采用分子生物學的方法進行診斷。李金中等[2]目前已經在嘗試使用RT-PCR法進行檢測。
CDV分離培養可以最終確診是否患病。但因CDV對外界環境抵抗力弱,其脂質囊膜結構較脆,易被光和熱滅活,病毒分離成功率較低[3]。所以,病料采集時對采樣部位、采樣時間、樣品處理、病程、動物的抗體水平均有要求。
首先使用動物的肺或腹腔巨噬細胞、腎細胞、胚胎細胞等作為原代培養細胞。研究發現,CDV可以在6~11日齡的雞胚絨毛尿囊膜上發育[4]。經過3~10代的培育,接種2~7d即可看到雞胚絨毛尿囊膜出現水腫,形成灰白色增厚痘斑。目前發現,最有效的培育方法是使用幼犬或者雪貂肺臟巨噬細胞培養。其次進行傳代細胞培養。可以選擇貓胚胎細胞系、狗腎細胞系、非洲綠猴腎細胞系等進行培育。近年的研究發現,首選的細胞是非洲綠猴腎細胞系,其可以分離培養CDV。最后是進行動物回歸試驗。將分離出的CDV接種在犬、雪貂等上,可出現明顯的臨床癥狀。
防治犬瘟熱最好的方法是刺激抗體產生。科學家曾使用注射滅活疫苗的方式來控制,但實踐發現,滅活苗無法控制犬瘟熱的發生。隨后,科學家嘗試使用活疫苗的方式,結果發現,免疫效果較好。但活疫苗在使用過程中也有局限性,如在進行首免時,會受到母源抗體的影響,同時,疫苗也會導致免疫抑制和血小板減少等問題。國外現在開始使用CDV重組活苗和亞單位苗多肽苗。Pardo等[5]研究發現,使用CPV作為載體表達CDV的H和F糖蛋白發現,重組苗針對致病性CDV攻擊時安全、有效,證實和MLV不存在干擾時,免疫的SPF狗沒有發生全身和局部的不良反應,產生CDV中和抗體。
隨著人們收入的提高,人們對飲食要求發生變化,飲食結構開始更加完善。犬類飼養量在不斷擴大。犬瘟熱病毒的傳播不僅會給養殖場帶來較大的經濟損失,也會給人們的健康帶來威脅,所以,深入研究CDV的臨床診斷方式和防治方法具有重大意義。
[1] Zurbriggen A,Müller C,Vandevelde M.In situ hybridization ofvirulent canine distemper virus in brain tissue, using digoxigenin ~labeledprobes[J].American Journal of Veterinary Research,1993,54(9):1457-1461.
[2]王蘭萍,愈慧清,耿榮慶.犬瘟熱病毒的研究進展[J].當代畜牧,2001(6):32-33.
[3]李金中,夏咸柱,胡桂學,等.我國犬瘟熱病毒的生態學調查研究[J].畜牧獸醫學報,1999,30(4):375-379.
[4]殷震,劉景華.動物病毒學.第2版[M].北京:科學出版社,1997:736-767.
[5] Pardo M C,Bauman J E,Mackowiak M.Protection of dogs againstcanine distemper by vaccination with a canarypox virus recombinant expressingcanine distemper virus fusion and hemagglutinin glycoproteins.[J].American Journal of Veterinary Research,1997,58(8):833.