胃腺癌組織中神經纖毛蛋白1、2的表達及意義

史 璇 張 鑫 朱金朋 邸 巍 田 蕾

(錦州醫科大學附屬第一醫院消化內科三病區，遼寧 錦州 121000)

胃腺癌是由胃黏膜上皮來源的惡性腫瘤，病變形成中可以表現為上皮細胞異型增生，進而形成腫瘤〔1〕。神經纖毛蛋白(NRP)1和2是非酪氨酸依賴性激酶，是Ⅲ型Semaphorin分子與血管內皮生長因子家族分子共享的跨膜信號傳導受體，在腫瘤的形成和進展中有重要作用，尤其是腫瘤血管形成過程中的作用更明顯〔2,3〕。本實驗檢測胃腺癌中NRP1和NRP2的表達，分析其臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 2014年1月至2016年10月錦州醫科大學附屬第一醫院經病理學確診為胃腺癌，并行手術治療的患者共94例為觀察組，留取臨床資料及術后蠟塊組織，年齡46～87歲，平均62.6歲，其中男54例，女40例。均符合WHO中的診斷標準。排除標準：①多原發癌患者；②術前行放、化療；③有胃手術史。上述患者距腫瘤邊緣>3 cm的非腫瘤性胃黏膜組織21例為對照組，年齡47～79歲，平均60.4歲，其中男11例，女10例。兩組年齡、性別無明顯差異。

1.2NRP1和NRP2檢測 均基于術后石蠟包埋的組織，切取4 μm切片置于膠片上，采用免疫組化SP法檢測，嚴格按實驗的說明書操作，二氨基聯苯胺(DAB)顯色，減少誤差，做好質控工作。

1.3NRP1和NRP2結果的判定 NRP1和NRP2陽性表達部位是細胞質和細胞膜，以呈現棕黃色-褐色為陽性反應細胞，采用陽性細胞百分率和細胞染色強度之和進行評定。著色強度評分：0分，無顯色；1分，棕黃色；2分，棕褐色。陽性細胞百分比：每張切片選擇5個熱點區(400倍視野)計數陽性率，取其平均值；0分，<10%；1分，10%～50%；2分，>50%。上述兩項相加即為最終評分結果，以0～2分定為陰性，以>2分定為陽性。以陽性率進行評定。

1.4統計學方法 應用SAS6.12統計軟件進行χ2檢驗及線性相關分析。

2 結 果

2.1兩組NRP1和NRP2陽性率比較 兩組NRP1和NRP2陽性率差異顯著(P<0.01)。見表1。

表1 兩組NRP1和NRP2陽性率的比較〔n(%)〕

2.2觀察組不同臨床特征中NRP1和NRP2陽性率的比較 NRP1和NRP2表達的陽性率與腫瘤脈管累犯和淋巴結轉移密切相關，NRP1表達的陽性率與腫瘤的浸潤深度密切相關。二者均與性別、年齡及分化程度無相關性。見表2。

表2 觀察組不同臨床特征中NRP1和NRP2陽性率的比較〔n(%)〕

2.3觀察組中NRP1和NRP2表達的相關性 NRP1和NRP2表達呈正相關(r=0.49，P=0.036)。

3 討 論

胃癌病變的形成與癌基因密切相關，主要表現為其高表達時的促癌生長的作用。多種癌基因在作用過程中與血管生成有一定相關性〔4〕。NRP1和NRP2在腫瘤中的表達升高，具有癌基因樣的作用，二者在結構上有47%的同源性，在胚胎神經系統及許多成人組織中的表達盡管有重疊，但是在配體、調節特性上均有明顯不同〔5,6〕。NRP1的胞外區有3個不同的結構域，分別稱為a1/a2、FV/FV Ⅲ(b1/b2)和MAM(c)，其跨膜區及短的胞質區歸入d結構域。a1/a2、FV/FV Ⅲ(b1/b2)是NRP1與配體結合的位點，MAM(c)對NRP傳導及配體的信號很重要〔7〕。NRP2由17個外顯子和16個內含子組成，其序列高度保守，由胞外區、跨膜區及短的胞內區組成，其胞內區很短，一般不作為獨立的受體傳遞信號〔8〕。NRP2有與配體Semaphorin結合的位點〔9〕。NRP1和NRP2均為多功能受體，作為 Semaphorin和血管內皮生長因子(VEGF)的協同受體，有著較為廣泛的生物學功能，尤其是在神經系統發育、血管形成、淋巴管生成、上皮間質轉化和腫瘤進展中起著至關重要的調節作用〔10,11〕。

本研究結果提示NRP1和NRP2二者表達升高可以促進胃癌的形成，二者在胃癌生成過程中具有癌基因樣的作用。NRP1和NRP2二者參與腫瘤的脈管侵犯和腫瘤的轉移過程。NRP1高表達預示著腫瘤對周圍組織的侵襲能力明顯增強。NRP1和NRP2二者具有協同作用。胃腺癌發生后主要形態學表現是細胞異型增生并引發的肌層浸潤性生長，這也是NRP1和NRP2高表達促進腫瘤生長的重要蛋白異常因素。NRP1和NRP2主要分布在細胞質中，存在著基因轉錄、轉錄后水平翻譯、翻譯后修復等多種調節過程。不同的調節失控能使NRP1和NRP2的動態平衡發生改變〔12〕。NRP1和NRP2可以促進細胞的增殖和生長，使腫瘤細胞繁殖能力明顯增高，使血管生成明顯，腫瘤旺熾性增生，腫瘤體積增大，腫瘤細胞生長及侵襲能力明顯增強〔13,14〕。NRP1和NRP2能與VEGF結合在脈管的出芽生長上起著重要作用。有研究通過應用NRP1和NRP2的特異性抗體阻斷VEGF與NRP2的結合，顯示其可以抑制淋巴管的出芽生殖〔15,16〕，而且在對VEGF的應答中，是通過增強 VEGF受體3的作用進而調節淋巴管生成因子的，進而對淋巴管出芽生殖信號進行轉導〔17〕。NRP1和NRP2調節腫瘤生長的作用及調節腫瘤脈管生成的作用可能更趨于復雜，需要更多的基礎研究明確。

綜上，胃腺癌術后組織中NRP1和NRP2表達增高對腫瘤性病變的形成和進展有一定作用。二者具有正向協同作用。

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