濱海縣0～3歲兒童血細胞分析指標生物參考區間的建立

于正清，徐劍勇，孟進，李禮

在進行醫療診斷、確定治療方案或其他生理學評估時，通常需要將某個個體（通常為患者）的實驗室檢測結果與參考區間進行比較。生物參考區間是解釋檢驗結果分析檢驗信息的一個基本尺度和依據[1]。實驗室給臨床提供檢驗項目可靠地生物參考區間，才能使臨床對患者或健康體檢者的診斷治療有明確的指引[2]。然而，在我們日常使用的參考值并沒有明確的定義，更沒有通過一致性程序進行驗證。近些年來，國內外亦有較多的學者[3-5]嘗試建立了適合于所在實驗室的生物參考區間，然而國內很多文獻在建立參考區間時忽略了檢測項目的一些影響因素或人群選擇上存在缺陷，使建立的參考區間的可靠性大打折扣[6]。因此，我們有必要通過更加系統性的過程來制定參考區間，在此過程中需要考慮到對實驗室測試結果影響的各種因素[7]，最重要的是建立的參考區間適合于本實驗室。

1 資料與方法

1.1 受試對象 收集2016年1-12月份至濱海縣人民醫院行正常體檢的0至3歲的兒童，共584例；分為0～1歲組：441例；＞1歲且≤3歲組：143例。調查對象無任何影響檢測結果的生理指標；未服用藥物或進行飲食治療；發育、精神正常，無血液系統、變態反應性、消化系統、泌尿系統、寄生蟲感染等疾病；3個月內無輸血和手術史；1個月內未患任何疾患。

1.2 實驗儀器 采用Sysmex XS-800i全自動血液分析儀（日本Sysmex公司），嚴格按照SOP文件操作，使用與儀器配套的質控品（批號1：31130802；批號 2：31120803）。

1.3 樣本獲取 按標本操作程序采集全血標本，選用手指采血，采用WHO推薦采血部位以左手中指或無名指尖內側為宜；采血時輕輕按摩采血部位，使中指或無名指尖自然充血，消毒局部皮膚后，操作者用左手拇指和食指適度捏緊采血部位，右手持觸壓式一次性采血器自指尖內側迅速刺入，以稍加擠壓血液能流出為宜，采血至事先配好的EDTA-K2抗凝小試管中。

1.4 統計學處理 采用Excel 2003軟件錄入數據，SPSS 19.0軟件進行統計分析。參考值分組判斷采用Z檢驗，參考值范圍確立為均值±1.96標準差（x±1.96s），均數比較采用 t檢驗，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各年齡組及男女之間分組結果 結果顯示，0～1歲及1～3歲兩個年齡段男女均無明顯差異，無統計學意義無需分組；而0～1歲及1～3歲之間WBC、RBC無分組需要，但Hb、PLT則需要分組。見表1。

2.2 正態檢驗結果，符合正態分布的數據95%置信度的參考區間以平均數+2s（x±2s）計算，非正態分布則按百分位數法（5%，95%）計算，見表2；由表2中的偏度和峰度計算可看出0～3歲兒童的白細胞不服從正態分布。

表1 各年齡組及男女之間Z檢驗分組判斷

2.3 參考區間比較 本次調查的0～3歲兒童血常規各項參數的參考區間與 《全國臨床檢驗操作規程（第4版）》的成人參考區間比較，皆有一定差異，見表3。

3 討論

血常規檢測在醫院中是使用最廣泛的檢測指標之一，而手指末梢血因有取血量少、疼痛少、創傷小、易操作，更易為嬰幼兒患者及家屬所接受。由于自動化的血液分析儀有各自檢測原理和檢測系統，末梢血和靜脈血的采血部位的不同，都會造成參考區間之間存在一定的差異[8，9]。因此，國際臨床化學與檢驗醫學聯合會(IFCC)建議每個有條件臨床實驗室應根據不同檢測系統建立各自人群特征的參考區間[10，11]。

本調查采用了584例0～3歲的嬰幼兒作為健康參考個體，經過統計學分析各年齡段的血細胞指標在性別方面沒有統計學差異無需分組，WBC與RBC在年齡組組間亦無分組必要，在實際臨床使用中一般也不建議過多地分組，避免給臨床診斷帶來不必要的干擾。合并后的WBC與RBC參考區間分別為（5.7～13.0）×109/L 和(3.98～5.12)×1012/L，其中0～1歲嬰幼兒的Hb與PLT的參考區間分別為 (100～130)g/L、(199～479)×109/L；1～3 歲嬰幼兒的 Hb與 PLT的參考區間為 (107～138)g/L、(198～413)×109/L。與表3中2012年衛生部發布的成人參考區間比較發現：兒童的WBC與PLT的參考區間上下限均略高于成年人，造成的主要原因是：骨髓是產生紅細胞、粒細胞和巨核細胞的主要場所。而紅骨髓是參與造血的骨髓，有著活躍的造血功能。不同年齡的人群紅骨髓的分布是不同的。5歲以下的兒童全身的骨髓腔內均為紅骨髓，5～7歲后骨髓中心開始出現脂肪細胞。隨著年齡的增長，紅骨髓由遠心端向近心端逐漸開始脂肪化[12]，因此，在兒童階段的血細胞數量要高于成人階段；但是兒童的RBC和Hb比成人略低，這是由于生理原因造成，3個月的嬰兒至15歲以前的兒童因生長發育迅速而致造血原料相對不足，紅細胞與血紅蛋白可較正常人低10%～20%[13]。

表2 各年齡段兒童血細胞指標的正態性檢驗

表3 參考區間比較

各指標的參考區間與上海地區報道[14]的較為一致，除PLT有一定的差異，但與《全國全國臨床檢驗操作規程（第4版）》[15]所規定的嬰幼兒參考區間有明顯差異，特別是血小板（100～300×109/L)的差異更為明顯偏高，引起偏高的原因與手指采血途徑有關，擠壓手指容易造成組織液混入和細胞碎片的產生，易對血細胞分析儀技術產生假性偏高[16]，由于目前小兒血常規檢測仍以末梢血為主，若采納該參考區間需要在標本種類中注明末梢血，同時需要與臨床醫生溝通并達成一致。

在此次調查中只包含了0～3歲的嬰幼兒，年齡段分組不是太充足，缺少3～12歲年齡段的兒童標本，下一步將繼續研究。鑒于此次調查的明顯差異，有必要在不同實驗條件下建立適合本地區不同性別、不同年齡階段健康嬰幼兒血細胞各參數參考值范圍，以供臨床參考，準確診斷疾病。