牛病毒性腹瀉/黏膜病診斷技術

（云南省彌渡縣彌城鎮農業綜合服務中心彌城畜牧獸醫工作站，云南彌渡 675600）

1 前言

牛病毒性腹瀉/黏膜病簡稱為牛病毒腹瀉或者是牛黏膜病，也就是BVD或者是BMD，患病后，其本質就是一種傳染病，在患病之后，最為典型的特征就是發熱、潰瘍以及白細胞數量迅速減少，如果是懷孕母牛的話，流產率大大增加，而且胎兒的畸形率也大大提升。關于這種疾病的病原，主要就是牛腹瀉病毒，也就是BVDV，系黃病毒科。根據病原體在細胞培養物上特性的差異，可以分為兩種類型，分別是致細胞病變型和非致細胞病變型。這兩種生物型的血清型是相同的，但是與宿主細胞發生的作用卻是不同的。

大量的研究表明，對于這種病毒，雖然結合流行病學的相關資料以及臨床的癥狀等可以進行初步的診斷，但是在實際的臨床診斷中，與口蹄疫以及水泡性口炎和藍舌病等是比較難以區別開來的。從目前的報道情況來看，雖然在國內外都有了很多病毒的檢測方法，但是從推廣和應用的實際效果來看，還是抗體診斷方法和抗原診斷方法的效果是比較理想的。

2 關于牛病毒性腹瀉/黏膜病診斷技術的研究與分析

2.1 牛病毒性腹瀉/黏膜病概述

這種疾病的主要傳染源就是患病的畜禽，無論是分泌物，還是排泄物，抑或是血液，脾臟等，都含有病毒，傳播的方式既可以是直接的，也可以是間接的，患病之后，通常會有不規則的病斑出現，部位多事在消化道、淋巴組織，以及口腔和咽部等。這種疾病的潛伏期通常是在一個周到十天，可以分為急性型的和慢性型的。

2.2 抗體的診斷方法

提及抗體的診斷方法，主要有以下幾種方法：

第一種方法就是血清中和試驗

血清中和試驗是進行致病病毒流行病學調查的有效手段之一，最為顯著的特征就是可以多次進行血清滴度的檢測，使用起來也是便捷靈活的。但是有一點需要注意的是，制作病毒的感染過程是非常復雜的，如果僅僅是依靠血清中和抗體的檢測方式作為診斷的依據是非常難以達成的。

第二種方法就是瓊脂擴散實驗

這種實驗就是對于已經選定的發炎了或者是糜爛、潰瘍的黏膜在不經過任何處理的情況下，就可以直接和陽性的血清進行實驗。從相關資料的統計情況來看，大約有半數以上的患病牛出現陽性的反應。但是這種實驗是群特異性的，對于毒株是不能進行鑒別的。

從實驗的結果來看，在對CP株進行檢測的時候，探針的檢出率是非常高的，但是在對NCP株進行檢測的時候，探針的檢測率就是比較低的，這樣的話，就需要再研究出一種探針，這種探針是適用于NCP序列的。

總體來說，核酸探針技術的操作是比較簡單的，而且特異性表現也是非常理想的，便于進行長期保存，另外也是回收利用，尤其是在制作成了試劑盒之后，更加便于進行臨床使用的應用和推廣，快捷、高效、安全。

第三種方法就是反轉錄-多聚酶鏈式反應，也就是PCR，可以說其本質就是一種分子生物學技術，應用也是非常廣泛的，其主要的原理就是依托于病毒的基因組序列，可以進行特異性引物的合成，可以是一對，也可以是幾對，這種方法不僅僅特異性強，而且也比較敏感，檢測效果是非常理想的，尤其是通過這種檢測進食，可以實現和類似病，主要是豬瘟病毒和邊界病病毒的區別。

這種檢測技術的顯著特征就在于方便快捷，既可以進行單個樣品的檢測，也可以進行整體的檢測，無論是牛乳，還是血清，抑或是血塊等都可以作為檢測本病的樣品，檢測的過程也非常簡單，基本上兩天到三天就能夠出結果。還有一點就是隨著技術的發展，一步法的技術已經趨于成熟，檢驗的步驟得以簡化，而且時間縮短了，成本大大降低，在臨床上的應有效果是非常理想的。

事實上，檢測的方法并不僅僅局限于這幾種，只是從整體情況上來看，無論是國內，還是在國外，在病毒的檢測方法方面，都是更加傾向于病原檢測的，這樣的話就能夠在患病的初期就能夠對病牛進行檢測，即使牛群中有PI牛，沒有中和抗體存在德華，依托病毒抗原技術和核酸檢測技術也能夠實現對這種疾病的檢測，有效降低漏檢的現象，從而為盡快實現牛群的凈化奠定堅實、有力的基礎。另外，如果是抗原檢測的話，還有一個特點就是可以有效避免病毒成員之間的血清學交叉反應，從而保證檢測的特異性和準確性。

3 結語

從上文的論述中，我們對于牛病毒性腹瀉/黏膜病診斷技術有了更加深入、細致的了解和認識，可以說目前的診斷方法是多樣化的，但是每一種診斷方法都既有優勢，又有不足，因此在選擇和使用的時候，可以根據實際情況，選擇一種或者幾種聯合使用。當然，隨著畜牧養殖業發展進程的不斷加快，尤其是隨著生物技術和相關學科的發展，對于這種疾病的研究也在不斷深入，也會出現更多的檢測方法，從而為從根本上控制和消除這種疾病提供更加有效的診斷手段。

[1] 陳茂盛，寇改霞.陜西省牛病毒性腹瀉/黏膜病血清學調查[J].畜牧獸醫雜志，1994，（2）：23-24.

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