銀黃蘭消脂顆粒的制備與質量標準研究

翟文勇+王瑩

[摘要] 目的 制備銀黃蘭消脂顆粒，并建立其質量控制方法。方法 在2015年3月—2017年3月期間，根據處方制備銀黃蘭消脂顆粒，采用薄層色譜法 對處方中的銀杏葉提取物 進行定性鑒別，采用高效液相色譜法測定總黃酮苷的含量。結果 槲皮素進樣量在4.5～13.5 μg/mL之間與積分值呈線性關系，回歸方程y=34 358x+28 411，相關系數=0.999 9；山柰素進樣量在6～9 μg/mL之間與積分值呈線性關系，回歸方程y=28 512x+69 750，相關系數=0.999 6；異鼠李素進樣量在2.5～7.5 μg/mL，之間與積分值呈線性關系，回歸方程y=34 673x+23 823，相關系數=0.999 8。根據含量測定結果，銀黃蘭消脂顆粒中總黃酮苷每袋含量符合標準規定。結論 該制劑處方合理，質量控制方法準確、可靠、重現性好。

[關鍵詞] 銀黃蘭消脂顆粒；總黃酮苷；薄層色譜法；高效液相色譜法

[中圖分類號] R4 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2017）11（a）-0174-03

[Abstract] Objective To prepare the yinhuanglan xiaozhi granules and establish its quality control method. Methods The yinhuanglan xiaozhi granules were prepared according to the prescriptions from March 2015 to March 2017， and the ginkgo biloba extract in prescription was for qualitative identification by the thin-layer chromatography， and the content of total flavonoid glycoside was measured by the high performance liquid chromatography. Results The sample size of quercetin was 4.5～13.5 μg/mL， showing a liner correlation with the integral value， and the regression equation y=34 358x+28 411， correlation coefficient 0.999 9； the sample size of kaempferide was 6～9 μg/mL， showing a liner correlation with the integral value， and the regression equation y=28 512x+6 9750， and the correlation coefficient 0.999 6， and the sample size of isorhamnetin was 2.5～7.5 μg/mL， showing a liner correlation with the integral value， and the regression equation y=34 673x+23 823 and the correlation coefficient 0.999 8， and the content of total flavones in yinhuanglan xiaozhi granules in each bag met the standards. Conclusion The prescription of this preparation is rational， and the quality control method is accurate and reliable with good repeatability.

[Key words] Yinhuanglan xiaozhi granules； Total flavones； Thin-layer chromatography； High-performance liquid chromatography

藥理研究表明，銀杏黃酮具有降低膽固醇抗氧化擴張冠狀動脈和腦血管的作用，可用于防治腦血栓形成和動脈粥樣硬化冠心病心絞痛心肌梗死等心腦血管病[1-2]。現對該院在2015年3月—2017年3月期間根據處方制備1種銀黃蘭消脂顆粒進行研究，現報道如下。

1 儀器與試藥

LC-15C型高效液相色譜儀；BS224S型電子天平；BX8200H型超聲儀。薄層層析用聚酰胺薄膜；薄層層析硅膠板。正丁醇；乙醇；其他試劑均為分析純。槲皮素（批號為100081-201509，供含量測定用以99.9%計），山柰素（批號為110861-201310，供含量測定用以93.2%計），異鼠李素（批號110860-201410，供含量測定用以98.6%計），均由中國食品藥品檢定所提供。

2 處方組成與制備工藝

①處方銀杏葉提取物、姜黃、山楂、葛根、黃精、女貞子、丹參、澤瀉、決明子、枸杞子、三七等。

②制備方法以上16味，三七粉碎成細粉；黃芪及決明子粉碎成細粉，過（6號）篩，與三七粉配研，混勻；姜黃用乙醇加熱回流2次，第1次3 h，第2次2 h，濾過，合并濾液，回收乙醇；取生蒲黃置布袋內，同其他11味加水溫浸1 h，煎煮3次，第1次3 h，第2次2 h，第3次1 h，合并濾液，濾過；濾液濃縮至相對密度約為1.17（80℃），放冷，加入乙醇，使乙醇含量達65%～70%，冷藏48 h，取上清液濾過，回收乙醇，減壓濃縮至相對密度約為1.35 ～1.40（50℃）的稠膏，加入姜黃的醇提物及三七、黃芪、決明子的細粉，制成顆粒，干燥即得[3-4]。endprint

3 質量標準

3.1 性狀

該品為棕色至棕褐色顆粒，味甜，微苦。

3.2 鑒別（銀杏葉提取物）

供試品色譜中，在與對照品提取物色譜相應位置上，日光下顯相同顏色的斑點，紫外光下顯相同顏色熒光斑點[5]。示意圖見圖1。

3.3 含量測定

3.3.1 色譜條件的考察 以甲醇-0.4%磷酸溶液（50：50）為流動相；檢測波長為360 nm。理論板數按槲皮素峰計算應不低于2 500[6-7]。

對照溶液的制備：分別取槲皮素對照品、山柰素對照品、異鼠李素對照品適量，精密稱定，加甲醇分別制成每1 mL各含槲皮素30 μg、山柰素30 μg、異鼠李素20 μg的混合溶液。

供試品溶液的制備：取本品顆粒1袋，精密加入甲醇20 mL，超聲處理（功率250 W，頻率33 kHz）20 min，放冷，搖勻，濾過，精密量取續濾液10 mL，置100 mL錐形瓶中，加甲醇10 mL、25%鹽酸溶液5 mL，搖勻，置水浴中加熱回流30 min，迅速冷卻至室溫，轉移至50 mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液即得。

3.3.2 方法學考察 ①空白試驗。達峰時間：槲皮素峰位在12 min左右；山柰素峰位于21.4 min左右；異鼠李素峰位于24.5 min左右。

②線性關系考察。槲皮素回歸方程y=34 358x+ 28 411，相關系數R2=0.999 9，表明槲皮素進樣量在4.5～13.5 μg/mL之間與積分值呈線性關系；山柰素回歸方程y=28 512x+69 750，相關系數R2=0.999 6，表明山柰素進樣量在6～9 μg/mL之間與積分值呈線性關系；異鼠李素回歸方程y=34 673x+23 823，相關系數R2=0.999 8，表明異鼠李素進樣量在2.5～7.5 μg/mL之間與積分值呈線性關系。

③系統精密度考察。結果見表1。

④重復性試驗。結果見表2。

⑤穩定性試驗。槲皮素峰：214 324、215 089、216 203、 218 322、217 325、216 734、217 091，RSD%為0.58%；山柰素峰：224 291、227 822、221 309、223 487、225 746、223 074、227 428，RSD%為0.98%；異鼠李素峰：156 005、158 742、157 087、154 074、154 469、156 077、156 348，RSD%為0.93%。表明供試品溶液在24 h內穩定。

⑥加樣回收試驗，結果見表3。

結果表明試驗方法的回收率高，符合含量測定要求。

⑦樣品含量測定。結果見圖2、表4。

4 結論

該處方中是以銀杏葉提取物的有效成分提取物能明顯降低血清中甘油三脂（TC）、總膽固醇（TG）及低密度脂蛋白（ LDL-C）的含量，通過調節脂蛋白-膽固醇代謝，改善血管內皮功能從而改善機體的脂質代謝，可以作為銀黃蘭消脂顆粒的質控指標。

該組研究結表明，槲皮素進樣量在4.5～13.5 μg/mL之間與積分值呈線性關系，山柰素進樣量在6～9 μg/mL之間與積分值呈線性關系，異鼠李素進樣量在2.5～7.5 μg/mL之間與積分值呈線性關系。槲皮素、山柰素、異鼠李素的精密度也較高，槲皮素、山柰素、異鼠李素在藥物中具有一定的穩定性。該組研究結果與覃智強[8]文獻中結果向一致，其研究中選取988例患者作為研究對象，研究中治療有效率為95%。其研究中得到槲皮素、山柰素、異鼠李素具有一定的穩定性。證實：銀黃蘭消脂顆粒穩定性較高。

綜上所述，銀黃蘭消脂顆粒中總黃酮苷含量較高，每袋含量符合標準規定。該制劑處方合理，質量控制方法準確、可靠、重現性好。

[參考文獻]

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（收稿日期：2017-08-05）endprint