苯酚凝膠造模與混合細菌懸液慢性盆腔炎造模方法的對比

侯金萌，高 慧*，張 晴，代春玲

（1.華北理工大學中醫學院，河北 唐山 063000；2.承德醫學院附屬醫院，河北 承德 067000）

盆腔炎性疾病（pelvic infammatory disease，PID）是由女性上生殖道炎癥引起的一組疾病，包括子宮內膜炎、輸卵管炎、輸卵管卵巢膿腫和盆腔腹膜炎等[1]。慢性盆腔炎的發生伴隨著炎癥因子的改變及機體免疫功能的下降[2]。盆腔炎多因治療不及時，若處于同樣的高危因素可反復發作，導致慢性盆腔痛、不孕、宮外孕等后遺癥，其給生活、工作帶來嚴重影響。因而對于慢性盆腔炎模型的研究越來越重要，可以對疾病發展研究提供基礎。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

選用SD雌性大鼠,體重為200g～250g,鼠齡12周,購自河北醫科大學實驗動物中心（許可證號：SCXK冀-2013-1003）。

1.2 實驗基地

河北中醫學院實驗室。

1.3 主要試劑

25%苯酚凝膠（液化苯酚5ml,西黃芪膠lg,甘油4ml,加蒸餾水至20ml,配成25%的苯酚凝膠）。

大腸桿菌（菌株號32210）、金黃色葡萄球菌（菌株號26102）、乙型溶血性鏈球菌（菌株號44110）以2∶1∶1的比例溶于無菌生理鹽水，配成濃度為3×109個/ml的混合細菌懸液。

1.4 動物分組

取大鼠40只，隨機分為4組(空白組，混合細菌懸液組，苯酚凝膠組、假手術組)，每組10只。

1.5 動物模型制備

1.5.1 混合細菌接種

實驗方法：將混合細菌懸液組大鼠，稱重。用2%戊巴比妥鈉按50mg/kg的劑量腹腔注射麻醉大鼠，待大鼠被麻醉后，在無菌條件下取大鼠下腹正中切口長約1cm，固定左側子宮，注入混合細菌懸液0.4mL。注射完畢，夾閉針孔防止溶液流出，墊高大鼠臀部偏向于左側，使菌液在子宮內不會流出，之后逐層縫合切口，碘酊消毒術區皮膚，將大鼠傷口敷料覆蓋包扎皮膚；

1.5.2 苯酚凝膠接種

實驗方法：將苯酚凝膠組大鼠，稱重，用2%戊巴比妥鈉按50mg/kg的劑量腹腔注射麻醉大鼠，待大鼠被麻醉后，在無菌條件下取大鼠下腹正中切口長約1cm，固定左側子宮，注入混合細菌懸液0.06mL。注射完畢，夾閉針孔防止溶液流出，墊高大鼠臀部偏向于左側，使菌液在子宮內不會流出，之后逐層縫合切口，碘酊消毒術區皮膚，將大鼠傷口敷料覆蓋包扎皮膚。

1.5.3 假手術組

實驗方法：將假手術組大鼠，稱重，用2%戊巴比妥鈉按50mg/kg的劑量腹腔注射麻醉大鼠，待大鼠被麻醉后，在無菌條件下取大鼠下腹正中切口長約1cm，隨后分層關腹，消毒術區。

2 取材與處理

在造模20天期間，每周稱體重，觀察大鼠是否出現弓背、蜷縮、脫毛、行動緩慢、體質量下降等現象；造模結束后，取子宮組織放置于10%中性福爾馬林中固定，切片，常規HE染色，光鏡下觀察子宮病理組織形態。

3 結 果

3.1 形態學改變

模型組：正常飲食水、毛發光澤。

假手術組：手術恢復期時食欲較差，后期飲食水同模型組，毛發可。

苯酚凝膠組：飲食水較少，出現弓背、蜷縮、脫毛、行動緩慢、體質量下降等情況。

混合細菌懸液組：飲食水較少，出現弓背、蜷縮、脫毛、行動緩慢、體質量下降等情況。

3.2 肉眼觀察

模型組：子宮形態、大小正常。基本無充血水腫。

假手術組：子宮形態、大小同正常組，無水腫，有部分充血。

苯酚凝膠組：子宮脹大，與周圍結締組織粘連，充血水腫，宮腔有少許積液，盆腔充血，部分形成包塊。

混合細菌懸液組：子宮形態明顯腫大，充血腫脹，宮腔粘連、宮腔內見積液，與周圍組織粘連。

3.3 病理學結果

正常組：子宮腔壁結構、細胞形態正常，無明顯充血水腫，未見炎性細胞浸潤。

假手術組：子宮腔壁結構、細胞形態基本正常，無明顯損傷變性，偶見中性等少量炎細胞浸潤。

苯酚凝膠劑量組：子宮壁增厚，細胞形態被破壞，正常結構紊亂，代之大量纖維結締組織增生及慢性炎細胞浸潤。

混合細菌懸液劑量組：子宮壁增厚明顯，腔壁結構紊亂，內膜明顯充血水腫，管腔增粗，全層見大量炎性細胞浸潤。

5 小 結

在本次實驗中，采用20天造模，不同劑量的造模方式。炎癥是慢性盆腔炎的最主要的表現[3]，因而在實驗造模方式中，更加注重模型結果的致炎途徑，病理學結果。苯酚凝膠造模方式與人類盆腔炎的致病原因有區別，但其費用低、造模成功率更高。混合細菌懸液的造模方式與人類盆腔炎致炎途徑類似，感染率高。在以往的實驗研究中，根據CPID的感染方式、傳播途徑、病變特點及大鼠子宮在其盆腔生殖器官中所占比重高的特點，混合細菌懸液造模方式更接近于人類慢性盆腔炎的致病途徑類似，感染率高。然而目前，在中醫治療慢性盆腔炎更有特色，中醫藥的免疫調節機制卻可以取得較好療效[4]，以辨證論治為主，多法并用。因而在未來的慢性盆腔炎造模方法更應嘗試創新，建立慢性盆腔炎中醫證型的模型，加強祖國醫學在治療慢性盆腔炎的特色與專長。