谷物中黃曲霉毒素檢測方法的研究進展

◎ 韓 偉，向紅莉

（遵義市糧油質量監測中心，貴州 遵義 563000）

近年來，關于人和動物遭受黃曲霉毒素毒害的研究報道越來越多，大部分報道稱谷物遭受黃曲霉毒素的污染，被人與動物體食用后，會引起人體肝臟代謝紊亂；且黃曲霉毒素在生物體內極難被代謝掉。因此，谷物中黃曲霉毒素含量的檢測十分重要。目前，應用于谷物中黃曲霉毒素含量檢測的方法很多，隨著現代科技的發展，人們開始注重方法的靈動性，開始聯合化學、儀器分析法和生物鑒定法三大類主要檢測方法，建立了多種方法交叉聯用檢測技術，本文介紹幾種研究比較頻繁的谷物中黃曲霉毒素含量聯合檢測方法。

1 HPLC-柱后衍生法

張惠賢等[1]提出一種新型黃曲霉毒素檢測方法，該法用乙腈提取樣品，采用專用固相萃取柱凈化提取物，然后利用光化學增加樣品熒光強度，并用HPLC檢測黃曲霉毒素含量。該方法在前處理方面進行了優化，選用乙腈作為提取溶劑而不是甲醇，成功除去水溶性雜質；采用配比合理的雙有機溶劑進行固相萃取，提高凈化富集效果；采用合適的色譜柱，優化了分離效果；增裝光衍生反應器，引入羥基，解決了黃曲霉毒素遇水熒光猝滅的問題。經改進后，該方法綜合了化學分析法與儀器分析法優缺點，充分利用黃曲霉毒素的理化性質，提高了檢測靈敏度，操作簡便，檢測結果準確度高。

王志強等[2]也用此方法同時測定食品中幾種黃曲霉毒素，不同的是柱后衍生采用的是溶液衍生，而不是光化學衍生。該法運用0.05%碘溶液柱后衍生，檢測成本相比要低得多，檢測條件要求也較低，靈敏度卻很高。

李珺沬等[3]在也用該方法對糧食作物中黃曲霉毒素的含量進行了檢測，而他們采用了新型吸附萃取技術，制備了石墨烯攪拌棒，并優化了相關萃取條件，之后用0.5 g·L-1碘溶液作為柱后衍生溶液，能精準地檢測出谷物樣品中極痕量的黃曲霉毒素。

尚欣春等[4]發現了一種新型固相萃取涂層材料，他們擬采用親水親脂材料作為固相載體，用離子液體作為涂層，該方法能快速萃取提取物，節省檢測時間，萃取徹底，重現性高。

HPLC-柱后衍生法在日前運用廣泛，相關報道層出不窮，在前處理改進方面，梁寶愛等[5]提到集成凈化平臺，該前處理手段自動化程度高，在節省人力成本的同時能快速準確的凈化樣品提取物。袁芹等[6]自助改裝固相萃取裝備，采用改性碳納米管來分散吸附劑，效果良好。

2 QuEChERS-液質聯用法

劉韜等[7]把谷物作為樣品，建立了液質聯用法來同時測定多種真菌毒素的含量，優化了前處理，加入配比合理的氯化鈉和硫酸鎂，同時加入特殊化學品PSA和C18吸附雜質，提高回收率。優化了色譜條件與質譜條件，提升了樣品的分離效果，能快速準確地檢測出谷物中黃曲霉含量。

江恩源等[8]報道了液質聯用檢測玉米中黃曲霉毒素含量，該法采用4∶6甲醇水溶液提取黃曲霉毒素，優化凈化條件，用混合柱模式除去提取液中雜質，在流動相中加入少量甲酸，提高洗脫效率，優化儀器設備條件，并對該法進行回收率、穩定性、精確度方面的驗證，以此來確保方法的可行性。

3 化學分析-生物鑒定聯合法

王文珺等[9]用谷物來驗證熒光定量檢測法的準確性，他們采用熒光檢測卡與檢測儀器相結合的方法來測量谷物中黃曲霉毒素的含量，并對該方法檢出限、回收率、穩定性等方面作了測試，結果良好，所有數據都在可控范圍內。

程慧等[10]提出了一種快速免疫比色檢測法，該法以特異探針催化顯色為基礎結合紫外分光光度計檢測，優化了反應條件，可快速低檢測成本。

洪霞等[11]也報道了一種快速檢測方法，該法采用的是上轉換免疫層析法，利用黃曲霉毒素生物檢定特異性抗體與納米材料結合，在短時間內快速檢測出黃曲霉毒素含量。該方法也能作為一種快速檢測黃曲霉毒素含量，用于現場監控黃曲霉毒素的含量。

4 結語

高效液相色譜-柱后衍生法、化學-生物鑒定聯合法應用較為廣泛，可以通過改進前處理與柱后衍生方法來提高高效液相色譜-柱后衍生法的檢測效率。化學-生物檢定聯合法應用普遍，特別適用于快速監控谷物中黃曲霉毒素含量的檢測。相比之下，液質聯用法由于儀器昂貴，對操作者素質要求比較高，相關應用報道比較少。