亞甲基四氫葉酸還原酶（MTHFR）和胱硫醚β合成酶（β-CBS）基因多態性與GDM關系

管會苓 于天龍

妊娠期糖尿病（gestational diabete mellitus，GDM）對產婦妊娠，分娩，遠期預后及胎兒會造成不同程度的影響。有研究表明妊娠期糖尿病發生妊高癥，早產，羊水過多等并發癥明顯高于正常孕婦，且圍生期胎兒畸形，新生兒窒息，巨大兒，新生兒低血糖等的發生明顯高于正常孕婦[1]。且妊娠血糖水平不同，妊娠結局也不同[2]。然而，妊娠期糖尿病的發病機制尚未完全明確，目前一致認為妊娠期糖尿病患者存在胰島β細胞功能缺陷和胰島素抵抗[3]。此外，產婦年齡，孕期體質量指數，血清血脂水平等因素也與妊娠糖尿病的發生有關[4]。近年來，有學者研究發現妊娠期糖尿病GDM患者血清同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）水平高于正常妊娠孕婦[5]，因此，本文擬研究Hcy代謝關鍵酶MTHFR和β-CBS基因多態性與妊娠期糖尿病易感性的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年1月—2017年1月來我院就診的孕24～28周孕婦作為研究對象，按照《2014年美國糖尿病學會（ADA）診斷標準》一步法將孕婦分為GDM組和非GDM組。其中，GDM組27例，平均年齡（33±5）歲，非GDM組33例，平均年齡（29±3）歲。

1.2 血清Hcy檢測

采集空腹靜脈血5 ml于BD真空生化管中，分離血清，在日立7600生化分析儀上進行血糖和血清同型半胱氨酸水平檢測。

1.3 血清DNA提取

采集空腹靜脈血于EDTA抗凝管中，用于DNA樣本抽提。DNA提取產物進行多重PCR反應，產物純化，連接反應，連接產物測序。

1.4 統計學分析

用SPSS 17.0 統計軟件進行數據處理，基因型頻率和等位基因頻率的比較用χ2檢驗。孕婦基本資料及血清 Hcy 濃度采用兩個獨立樣本的t檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 GDM組與非GDM組血糖及血清Hcy水平結果

GDM組年齡，血糖和血清Hcy水平均高于非GDM組，P=0.003；0.000；0.037，差異有統計學意義，見表1。

2.2 β-CBS基因C572T，T833C；MTHFR基因C667T基因型及等位基因頻率結果

β-CBS基因C572T，T833C檢測到一種基因型，分別為C572T（C/C），T833C（T/T）；MTHFR基因C667T檢測到三種基因型，分別為C/C，C/T，T/T，GDM組和非GDM組比較差異具有統計學意義（χ2=6.426，P=0.04）；見表2。

3 討論

近年來，妊娠期糖尿病的發生逐漸升高，嚴重影響母兒健康。《國際婦產科聯盟關于妊娠期糖尿病的建議》摘譯（三）：妊娠合并糖尿病的產后管理、孕前保健及研究方向，文中提倡醫務人員務必重視孕前保健工作，其中包括：孕期高血糖的預測和早期檢查方法。

表1 血清Hcy結果

表2 基因型及等位基因頻率結果

目前診斷妊娠期糖尿病的方法是通過檢測孕婦24～28周的血糖，糖耐量實驗及胰島素實驗[6]。Hcy主要是通過多種機制引發疾病和加速疾病的進展。大量研究表明，妊娠期糖尿病患者血清Hcy水平增高，是影響妊娠期糖尿病妊娠結局的獨立危險因素[7]。本研究擬分析妊娠期糖尿病與血清Hcy水平及MTHFR基因，β-CBS基因多態性的關系，探討妊娠期糖尿病與Hcy相關的分子生物學機制。

Hcy的代謝途徑主要有[8]：（1）再甲基化途徑：生成蛋氨酸，亞甲基四氫葉酸還原酶（MTHFR）是該途徑的關鍵酶。（2）轉硫化途徑：生成胱硫醚和水，胱硫醚β合成酶（β-CBS）是該途徑的關鍵酶。近年來，影響Hcy代謝的酶引起廣大學者的重視。MTHFR和β-CBS是Hcy代謝途徑中的兩個關鍵酶。MTHFR基因突變是目前國內外研究的熱點，MTHFR基因C677T是常見突變位點。這兩個位點的變異使MTHFR的穩定性和活性下降，從而影響Hcy的再甲基化，引起體內Hcy的聚集，引起高Hcy血癥。有研究表明，MTHFR C677T基因多態性與胎兒低體重，早產等發生有關。 β-CBS基因突變的研究相對較少，β-CBS基因T833C，C572T是常見的突變位點。這兩個位點突變可引起β-CBS結合位點的構象變化，影響β-CBS的活性，從而使Hcy升高。本研究結果顯示妊娠期糖尿病組與非妊娠期糖尿病組比較，妊娠期糖尿病組血清Hcy水平明顯高于非妊娠期糖尿病組，MTHFR基因C677T位點基因型差異具有統計學意義（P＜0.05），C/T基因型妊娠期糖尿病組為44%，非妊娠期糖尿病組為15%，表明MTHFR基因C677T可能是妊娠期糖尿病發生的易感因素之一，但尚需大量實驗數據證明。

[1] 楊慧霞. 妊娠合并糖尿病對孕婦和圍產兒的影響[J]. 國外醫學內分泌學分冊，2004，4（24）：2-10.

[2] 王成書，魏玉梅， 楊慧霞. 妊娠期糖尿病孕婦不同血糖指標異常與妊娠結局的關系[J]. 中華婦產科雜志，2013，48（12）：899-902.

[3] 王爽，楊慧霞. 妊娠期糖尿病發病的危險因素分析[J]. 中華婦產科雜志，2014，49（5）：321-324.

[4] 李茉，楊芳，甘雨，等. 妊娠不同時期增重對妊娠期糖尿病發病的影響[J]. 中國婦幼健康研究，2017，28（7）：823-825.

[5] 陳雪，康省. 妊娠糖尿病孕婦血清同型半胱氨酸與葉酸及血脂的相關性探討[J]. 基層醫學論壇，2017，21（1）：14-15.

[6] Hod M，Kapur Anil，Sacks DA，等.《國際婦產科聯盟關于妊娠期糖尿病的建議》摘譯（三）：妊娠合并糖尿病的產后管理、孕前保健及研究方向[J]. 中華圍產醫學雜志，2016， 19（6）：417.

[7] 黃翠波. 妊娠期糖尿病患者同型半胱氨酸與相關生化指標的關系[J]. 國際檢驗醫學雜志，2013，34（15）：2051-5052.

[8] 呂海宏，湯旭磊. 同型半胱氨酸體內代謝及調節的研究進展[J].當代醫學，2015，21（12）：9，13-14.