核轉錄因子GATA6在子宮內膜癌中的表達及與預后的關系

高 燕 劉月文 曹芳芹

1.陜西省渭南市疾病預防控制中心(714000)；2.陜西省渭南市婦幼保健院

子宮內膜癌是女性常見生殖系統惡性腫瘤，晚期及復發患者療效和預后較差[1-2]。因此探討與宮內膜癌病因及預后相關指標非常重要。GATA6是一種轉錄調節因子，進化保守，調控心臟和血管系統特異分化和形成，是重要的早期發育調節基因，異常表達于肺癌、卵巢癌，以及胰腺、胃腸等消化道腫瘤[3-4]，與多種腫瘤的發生、發展關系密切[5-6]。但國內較少有GATA6在子宮內膜癌中研究文獻。本研究檢驗不同子宮內膜組織中GATA6的表達特點，分析其與子宮內膜癌病理參數以及預后的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2011年5月-2015年5月本院婦產科行經腹廣泛或次廣泛性全子宮切除術﹢盆腔淋巴結清掃術切除的子宮內膜癌組織標本82例(子宮內膜癌組)，所有患者均經術后病理證實為子宮內膜癌，并排除術前接受放化療及激素治療患者，年齡(50.6±9.9)歲(28～62 歲)；病理分型為子宮內膜腺癌21例、鱗腺癌36例、透明細胞癌15例、漿液性癌10例；TNM分期Ⅰ期31例、Ⅱ期28例、Ⅲ-Ⅳ期23例；高分化癌31 例、中分化癌29 例、低分化癌22例;肌層浸潤深度<1/2 32 例，≥1/2，47 例；淋巴結轉移51例，無淋巴結轉移31例。選擇同期本院手術切除的子宮非典型內膜增生組織標本60例(非典型子宮內膜增生組)，年齡(49.8±8.5)歲(31～62 歲)；婦科門診行子宮診刮的健康女性子宮內膜組織標本50例(正常對照組)，年齡(48.1±7.9)歲(34～67歲)。3組年齡比較無差異(P>0.05)。

1.2 方法

①試劑和儀器：GATA6單抗購自santa Cruts公司， DAB顯色劑購自北京中杉公司，兔抗人單克隆抗體購自福州邁新生物技術開發有限公司，BX41熒光顯微鏡為日本Olympas公司。②免疫組化檢測方法(IHC)：石蠟切片標本行IHC染色，常規切片、脫蠟入純水。組織片放入EDTA PH8.0修復液在高壓鍋內高壓2.5min。PBS液洗片后加入一抗37℃ 60min。PBS液洗滌3次，加入二抗37℃40min；洗滌后加DAB顯色， 蘇木精襯染，脫水、透明、封片，于BX41高倍鏡下審片。③判定：GATA6表達于細胞核中，以細胞核染色呈棕褐色為陽性，無染色為陰性；細胞膜弱染色為﹢，>10%輕度至中度完整染色為﹢﹢；>30%完整強染色為﹢﹢﹢，陰性及﹢為低表達， ﹢﹢、﹢﹢﹢為高表達。

1.3 統計學分析

2 結果

2.1 GATA6在不同子宮內膜組織中的表達

GATA6在3組不同子宮內膜組織中的陽性表達率存在差異(P<0.05)，見表1、圖1。

2.2 GATA6與子宮內膜癌臨床病理參數關系

GATA6表達與子宮內膜癌病理分型無關(P>0.05)，與TNM分期、分化程度、肌層浸潤深度、淋巴結轉移有關(P<0.05)。見表2。

2.3 GATA6表達與患者預后關系

82例子宮內膜癌組患者均隨訪至2018年5月，GATA6低表達患者3年生存率92.3%，中位生存40個月；GATA6高表達患者3年生存率54.7%，中位生存20個月。兩組生存率對比存在差異(P<0.05)，見圖2。

表1 GATA6在不同組子宮內膜組織中的表達比較[例(%)]

圖1 GATA6在子宮內膜癌組織表達(A陽性表達，B陰性表達)(×400)

表2 GATA6與子宮內膜癌臨床病理參數的關系 [例(%)]

圖2 不同GATA6表達患者生存率對比

3 討論

GATA6是GATA轉錄調節因子的家族成員之一，定位于18q11.1-q11.2，表達于各種來源于中胚層和內胚層的組織，其保守的鋅指結構高度親和核苷酸序列(T/A)GATA(A/G)，發揮調節胃腸、心臟和性腺等多個器官正常發育[7-10]。近年研究更多指向GATA6與腫瘤發生、發展的關系， GATA6 與腎上腺皮質腫瘤的發生有關[11]，在卵巢癌組織中有異常表達，且與卵巢腫瘤的分化有關[12]。GATA-6磷酸化是維持致癌通路Ras/Raf/MEK/ERK中Nox1持續上調的主要原因，因此在腫瘤發生和發展中有重要作用[13]。GATA-6 蛋白與組蛋白去乙酰化酶相互作用，抑制15-脂氧合酶-1表達，抑制過氧化物酶增殖體活性，進而抑制腫瘤細胞凋亡[14]。同時GATA-6可增強腫瘤細胞的侵襲性[15]。GATA6在腫瘤的發生、發展過程中發揮重要作用，有望成為惡性腫瘤診治、判斷預后及檢測復發的有效標記物。

國內開展GATA6的研究較晚，相關報道較少。現有研究顯示，GATA6在咽喉癌、肝癌、膀胱癌等腫瘤組織中表達明顯上調，且與腫瘤的臨床病理參數和預后存在一定關系。岳文慧[6]等研究顯示，GATA6在喉咽癌組織中陽性表達率為73.33%，而癌旁組織陽性表達率僅10.00%，說明GATA6促進咽喉癌細胞增殖，抑制腫瘤細胞凋亡，參與喉咽癌的發生發展；并且GATA6陽性表達在不同咽喉癌臨床分期和病理分級、淋巴結轉移中均有不同的表達，低分化咽喉癌高于高分化咽喉癌，淋巴結轉移咽喉癌患者高于局部咽喉癌患者，提示GATA6參與腫瘤細胞分化、遷移和侵襲。目前國內尚未見子宮內膜癌GATA6的研究報道。

本研究顯示， GATA6在子宮內膜癌組織、非典型子宮內膜增生組織、正常子宮內膜組織的陽性表達率逐漸降低，提示GATA6可能參與子宮內膜癌的發生和進展。進一步分析GATA6與子宮內膜癌臨床病理參數的關系顯示，GATA6表達與子宮內膜癌病理分型無關，與TNM分期、分化程度、肌層浸潤深度、淋巴結轉移有關，提示GATA6可能參與了子宮內膜癌的局部浸潤和遠處轉移，是子宮內膜癌發生侵襲性生物學行為的標志物。對于GATA6的表達與子宮內膜癌病理類型無關，分析認為可能與GATA6在子宮內膜癌不同病理類型中的作用機制相同有關，或與本研究中例數較少有關。本研究顯示，GATA6高度表達的患者預后較差，提示GATA6的高度陽性表達預示患者預后不良，臨床應采取更積極的治療。

綜上，GATA6在子宮內膜癌組織中表達明顯上調，且隨著子宮內膜癌的浸潤和遠處轉移，表達進行性增高，GATA6的高度表達預示患者預后不良。