雄激素對高尿酸血癥大鼠骨代謝的影響

魏云霄 何 龍 張夢嬌 凌 麗

(河北大學附屬醫院，河北 保定 071000)

研究證實高尿酸血癥(HUA)與骨質疏松存在相關性〔1～3 〕，高尿酸(UA)狀態能引起骨質改變，破壞機體骨質。雄激素在骨代謝中有著非常重要的影響，但其對HUA機體的骨質及骨代謝的作用研究尚少，本研究探討雄激素對HUA大鼠骨代謝的作用。

1 材料與方法

1.1實驗材料 主要試劑：氧嗪酸鉀：山東中科泰斗有限公司產品，純度>98%；腺嘌呤：上海甄準生物有限公司產品，純度>95%；臨用前用0.5%羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)溶解。實驗動物：4個月齡雄性健康清潔級Wistar大鼠40只，體重280～320 g，由維通利華有限公司提供，適應性飼養7 d后，按隨機數字表平均分為假手術組、HUA組、去勢HUA組、去勢組，各10只。飼養管理條件：SPF動物實驗室，室溫(20±2)℃，相對濕度60%～70%，每周稱量監測大鼠體重變化，并記錄，依據體重給予各組相應藥物。

1.2動物模型的制作 ①去勢大鼠模型制作：去勢組給予切除睪丸及附睪手術處理，假手術組給予切除睪丸附近的脂肪組織。②HUA模型大鼠制作〔4,5〕：上午10點給予HUA組大鼠氧嗪酸鉀1.0 g/kg,1次/d持續灌胃，去勢HUA組給予氧嗪酸鉀1.0 g/kg灌胃+氧嗪酸鉀100 mg/kg皮下注射，其余組給予等體積蒸餾水灌胃處理。③HUA模型大鼠的調整〔5〕：待HUA、去勢HUA組大鼠UA水平下降后，改變造模方法，HUA組大鼠氧嗪酸鉀1.5 g/kg,1次/d持續灌胃+乙胺丁醇200 mg/kg皮下注射，去勢HUA組給予氧嗪酸鉀1.5 g/kg灌胃+氧嗪酸鉀100 mg/kg皮下注射+乙胺丁醇200 mg/kg皮下注射，共持續12 w。根據大鼠體質量相應調整藥物劑量，不同組別的大鼠給藥時間和給藥途徑相同。

1.3血清UA、骨代謝指標的測定 大鼠取血前禁食12 h，腹腔注射3%戊巴比妥鈉1.5 ml/kg，麻醉后內眥靜脈取血2 ml。分別在第0、4、6、8、12 w取內眥靜脈血測UA、鈣(Ca)、磷(P)、堿性磷酸酶(ALP)指標。

1.4統計學分析 應用SPSS19.0軟件行方差分析。

2 結 果

2.1各組一般情況變化 HUA組大鼠體重呈先上升后下降趨勢，精神萎靡，毛色干枯發黃，活動減少。假手術組反應機敏，活動正常，體毛有光澤，體重增加。各組大鼠在實驗過程中均自由飲水、攝食。造模后第8周，去勢HUA組有1只大鼠死亡；第12周HUA組有2只大鼠死亡，去勢HUA組有1只大鼠死亡；實驗期間總共4只大鼠死亡，存活36只，可能原因與大鼠長期高尿酸狀態有關。

2.2各組UA、骨代謝指標水平比較 造模前，各組UA、Ca、P、ALP指標均差異無統計學意義(P>0.05)。造模后第4周，HUA組及去勢HUA組血UA水平顯著高于假手術組及去勢組(P<0.05)，此時HUA造模成功；各組Ca、P、ALP水平均差異無統計學意義(P>0.05)。造模后第6周，HUA組及去勢HUA組UA水平均顯著高于假手術組及去勢組(P<0.05)，但有下降趨勢。準備改進造模方法。HUA及去勢HUA組Ca顯著低于假手術組及去勢組(均P<0.05)，說明高UA此時引起骨代謝變化。第8周改進造模方法后，HUA組、HUA去勢組UA水平與假手術組及去勢組差異性再次顯著(P<0.05)，HUA模型再次造模成功；HUA組、去勢HUA組及去勢組Ca水平顯著低于假手術組(P<0.05)；各組P、ALP差異無統計學意義(P>0.05)。造模后第12周，HUA組及去勢HUA組UA水平顯著高于假手術組，去勢組UA水平顯著低于假手術組；HUA組、去勢HUA組及去勢組Ca水平顯著低于假手術組；去勢HUA組P水平顯著低于其他3組；去勢HUA組ALP水平顯著低于假手術組及HUA組；去勢組ALP水平顯著低于假手術組(均P<0.05)。見表1～5。

表1 第0周各組UA及骨代謝指標比較

表2 第4周各組UA及骨代謝指標比較

與假手術組比較：1)P<0.05；與去勢組比較：2)P<0.05，表3、表4同

表3 第6周各組UA及骨代謝指標比較

表4 第8周各組UA及骨代謝指標比較

表5 第12周各組UA及骨代謝指標比較

與假手術組比較：1)P<0.05；與去勢組比較：2)P<0.05；與去勢HUA組比較：3)P<0.05

3 討 論

骨質疏松是以骨量減少、骨代謝異常為特征的代謝性骨病。發病機制除遺傳、生活方式、環境因素外，還有其他重要因素的參與。雄激素在骨骼生長、代謝，骨量維持及抗骨量丟失方面起重要作用。同時，血UA水平亦受雄激素影響，雄激素有抑制UA排泄和增加UA生成的作用。而且高UA本身也可以引起骨質改變，機制可能與UA結晶引起腎功能改變和高UA機體的富蛋白飲食，引起Ca吸收減少有關。本研究顯示，第4周時HUA和雄激素均未使各組的骨代謝發生變化。第6周時，HUA組大鼠體內UA水平有下降趨勢，可能與體內酶類變化與代償性排泄增多有關。UA狀態已經引起了大鼠體內Ca水平的變化，證實高UA可以引起骨代謝變化〔6～9〕。有觀點認為〔1〕骨質疏松的發生與骨髓間充質干細胞分化紊亂有關，即骨質疏松患者的骨髓間充質干細胞過度分化為脂肪細胞，同時伴隨成骨分化能力減弱、骨量丟失是引起骨質疏松的一個重要原因。研究表明〔10〕，男性HUA患病率明顯高于絕經前女性，即雄激素相比雌激素，更能升高UA水平。其機制可能是雄激素中睪酮使UA重吸收，使UA在男性體內水平更易升高。本實驗結果表明在HUA大鼠中，雄激素依舊有可能使骨代謝下降。但因本實驗為動物實驗，大鼠與人的體內環境及調節機制可能不同，需進一步深入研究。

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