GeneXpert檢測在結核病診斷中的應用

曹鷗婕

[摘要]目的評價GenXpert檢測在結核病診斷中的應用價值。方法方便選取2014年2月-2017年3月云南省曲靖市第一人民醫院感染科接收308例對象進行檢查，以培養法作為診斷“金標準”。結果GeneXpert診斷敏感性、特異性、陰性預測值、符合率高于PPD皮試、T-SPOT.TB，差異有統計學意義（P<0.05）。GeneXpert對結核病的診斷敏感性96.20%、特異度99.33%、陽性預測值99.35%、陰性預測值96.13%、符合率97.73%。相較于比例法，GeneXpert對利福平耐藥的敏感性、特異度、陽性預測值、陰性預測值、符合率分別為66.67%、92.47%、42.11%、97.12%、90.51%。結論Gen-eXpert檢測診斷結核病效果較好，可作為初始診斷的標準技術。

[關鍵詞]結核病；GenXpert檢測；診斷

[中圖分類號]R521 [文獻標識碼]A [文章編號]1674-0742（2017）10（a）-0028-03

我國結核病年死亡率13萬例，是其他傳染性疾病死亡的2倍還要多。約80%結核病為肺結核，篩查、診斷困難是導致結核病進展、耐藥的重要原因之一，以骨關節結核病為例，涂片法敏感性不足15%，傳統的PCR法污染風險較高，同時這些檢查的操作復雜，難度大。培養為基礎的鑒定以及藥敏試驗需要超過2個月，結核菌素試驗存在不良反應，禁忌證多。GeneXpert檢測是一種全自動病原體快速檢測系統，可當日獲得試驗結果，進行耐藥性分析，指導臨床治療。該次研究試以2014年2月-2017年3月該院收治的308例懷疑為結核病的對象進行結核病作為對象，評價GenXpert檢測在結核病診斷中的應用價值，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

方便選取該院308例懷疑為結核病的對象進行結核病診斷，其中男250例、女158例，年齡10-79歲，平均（45.6±11.8）歲。最終診斷為結核病患者158例，其中肺結核148例、肺外結核10例。納入標準：①懷疑為結核病，有發熱、咳痰等重典型癥狀，或出現發熱、關節痛等關節結核病典型癥狀；②采用GeneXpert等結核病診斷技術；③臨床資料完整。結核病診斷標準：①肺結核，2份痰液進行圖片鏡檢，或1份痰做Xpert MTB/RIF檢測，當患者有耐藥結核風險，或合并HIV感染，或病情嚴重，需要采用XpeIt MTB/RIF初始診斷，對于涂陰疑似肺結核者，采用Xpert MTB/RIF檢測或培養診斷，基于血標本的血清學或γ-干擾素釋放試驗無法診斷活動性結合者；②肺外結核，所有患者懷疑肺外結核，采用相應的樣本，進行微生物、組織學價差，采用XpertMTB/RIF檢測作為初始診斷。

1.2方法

所有患者進行PPD皮試、結核感染T細胞免疫斑點法（T-SPOT.TB）、Xpert MTB/RIF診斷，肺結核患者痰液進行圖片鏡檢，同時采集痰液、或組織樣本，進行培養。（1）PPD皮試：PPD5u在前臂掌側皮內注射，注射后72h后檢查皮膚反應，游標卡尺測量皮膚硬結，若硬結直徑<5mm則為陰性，否則為陽性，若出現潰瘍、破裂也視為陽性。（2）結核感染T細胞檢測，肝素鋰抗凝真空采血管采集待測對象的左臂外周靜脈血5mL，酶聯免疫斑點實驗（ELISA），以酶聯斑點讀取分析儀測算斑點數，依次作為診斷標準。判斷標準：①若陰性對照孔點數<6，抗原A孔或B孔斑點數一陰性對照孔斑點數≥6，則為陽性，否則為陰性；②若陰性對照孔點數>6，抗原A孔或B孔斑點數≥2×陰性對照孔斑點數，則為陽性，否則為陰性。（3）GeneXpert檢測：懷疑非肺結核者，取痰液標檢測，肺外結核取組織液進行監測，采用堿處理一中和離心沉淀法處理，提取DNA轉移到新管，進行PCR擴增、雜交，進行結果判斷，采用試劑盒附帶的評估表，根據顯影的膜條貼，結合對照帶、擴增對照，測定陽性情況，判斷耐藥情況。

1.3觀察指標

PPD皮試、T-SPOT.TB、GeneXpert診斷的敏感性、特異性、陽性預測值、陰性預測值、符合率對比。XpertMTB/RIF診斷利福平耐藥性結果（以比例法作為金標準）。

1.4統計方法

采用SPSS 20.0統計學軟件進行計算，敏感性、特異性、陽性預測值、陰性預測值、符合率采用x²檢驗比較，以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1診斷結果

PPD皮試.T-SPOT.TB.GeneXpert檢測結果如下表1。

GeneXpert診斷敏感性、特異性、陰性預測值、符合率高于PPD皮試、T-SPOT.TB，差異有統計學意義（P<0.05）。見表2。

2.2利福平耐藥分析

相較于比例法，GeneXpert對利福平耐藥的敏感性、特異度、陽性預測值、陰性預測值、符合率分別為66.67%、92.47%、42.11%、97.12%、90.51%。

3討論

該次研究顯示，GeneXpert對結核病的診斷敏感性96.20%、特異度99.33%、陽性預測值99.35%、陰性預測值96.13%、符合率97.73%，達到較高水平。其他學者調查顯示，GeneXpert對結核病診斷敏感性、特異性均在95%以上，特異度在99%以上，故被世界衛生組織推薦作為結核病的首選快速診斷技術。當然需注意的是，對于肺外結核，GeneXpert需要獲得組織樣本，限制了其在肺外結核病診斷中的應用。GeneXpert不僅可用于定性診斷，還可進行藥敏性分析，指導治療，研究中相較于比例法，GeneXpert對利福平耐藥的敏感性、特異度、陽性預測值、陰性預測值、符合率分別為66.67%、92.47%、42.11%、97.12%、90.51%，特異性、陰性預測值達到較高水平，即若診斷為利福平敏感，則出現耐藥的風險較低。不同學者調查研究的GeneXpert對利福平耐藥的敏感性存在較大的差異，在40%～70%不等，這可能與流行病學特征差異有關。

GeneXpert檢測計數，具有以下優勢：①工作流程簡單，直接監測痰液以及痰沉淀；②操作簡單，僅需要1個步驟準備工作；③整個流程僅需要110min，可進行快速檢測；④無需生物安全柜，安全性好，污染率低；⑤對結核分枝桿菌特異性敏感性與培養相近，本組對象敏感性、特異性均在99%以上；⑥還可同時進行利福平耐藥；⑦培訓所需的時間短，即使是非結核試驗室的專業人員，也能夠快速掌握。GeneXpert因具有以上優勢，相較于其他血清學診斷計數，具有高特異性、陰性預測值。需注意的是，對于痰涂片為陰的標本，GeneXpert的敏感性為60%～80%rn，但仍高于其他監測方法，對于肺外結核淋巴結組織、腦脊液等其他組織樣本，敏感性也在8%～92%之間，該次研究出現的6例假陰性，均為肺外結核，肺外結核敏感性為40%。

GeneXpert檢測診斷結核病效果較好，可作為初始診斷的標準技術，特異性、陰性預測值較高。

（收稿日期：2017-07-09）