中醫三期治則對骨折愈合影響的機制研究

劉思景 鄭臣校 李緒松 鄭雨中 黃志全 譚仁斌

臨床骨折是外科常見病和多發病, 尤其是近年隨著高層建筑不斷增加、各類交通工具廣泛普及、大型機械的廣泛應用, 使得骨折的發生率呈現逐年上升的趨勢［1］。我國中醫歷史悠久且在治療骨折上更是獨具特色, 并且獲得了廣泛的認可和青睞［2］, 為此本院開展了中醫三期治則對骨折愈合影響的作用機制的觀察, 現報告如下。

1　材料與方法

1.1試驗動物 選取健康雄性新西蘭家兔150只, 飼養7 d后采用隨機數字法分為治療組(60只)和對照組(90只), 其中一期治療組30只, 二期治療組20只, 三期治療組10只,陽性對照組30只, 陰性對照組30只, 空白對照組30只。

1.2方法

1.2.1建立骨折模型 除空白對照組家兔外, 所有家兔均采用特制骨鋸建立骨折模型, 不做任何固定, 切口采用生理鹽水進行沖洗, 逐層縫合后分籠常規飼養, 術后同時給予青霉素40萬IU肌內注射治療, 1次/d。

1.2.2干預方法 采用本院自制中成藥行三期治療, 具體中成藥構成為田七口服液、傷科九味健骨片、培元壯骨片,依據家兔橈骨中下段骨折愈合的組織學變化將骨折愈合分為三期, 即 ：術后第1～7天血腫機化演進期為一期(早期), 術后第8～28天骨痂形成期為二期(中期), 術后第 29～56天改造塑形期三期(后期)。其中一期治療組家兔均給予田七口服液灌胃治療, 第8天停藥；二期治療組家兔一期給予田七口服液灌胃治療, 二期給予傷科九味健骨片治療, 術后第29天停藥；三期治療組家兔一期給予田七口服液灌胃治療,二期給予傷科九味健骨片治療, 三期給予培元壯骨片治療；陽性對照組骨折愈合不進行分期均給予接骨七厘水溶液治療56 d；陰性對照組、空白對照組均給予蒸餾水灌胃56 d。治療組家兔每日給藥中成藥劑量為對人等效劑量的2倍, 分早晚2次灌胃。

1.2.3標本處理 所有家兔分三批采用栓塞法進行處死,其中第一批次：術后8 d治療組、對照組各組各10只；第二批次：術后29 d二期治療組、一期治療組、對照組各組各10只；第三批次：術后57 d各處死10只。

1.3觀察指標及判斷標準 觀察指標：①對各組家兔雙側橈骨進行DR拍攝, 仔細閱片分別依據斷端邊緣、骨痂量、骨痂邊緣對骨折愈合情況進行評價記分；②取左側橈骨標本采用免疫組化、原位雜交法觀察各組骨折愈合不同時間點骨 痂 FGF-2、BMP-2、Osx、FGF-2mRNA、BMP-2mRNA、OsxmRNA的表達, 采用纖維圖像采集系統對免疫組化、原位雜交片骨折折斷斷附近組織及骨髓組織進行高倍觀察, 采用ImageProphis5.0圖像分析系統測定陽性表達細胞平均光密度值(MOD)。

判斷標準：分別在試驗第1天、術后8 d、29 d和57 d對所有研究組進行上述骨痂FGF-2、BMP-2、Osx、FGF-2mRNA、BMP-2mRNA、OsxmRNA的表達數據進行采集, 其中每組以試驗第1天數據為基準值, 隨后各時間點各組與其基準值進行統計學比較, 以差異有統計學意義(P＜0.05)為見效, 以差異無統計學意義(P＞0.05)為無效, 比較分析各時間段每組見效情況。

1.4統計學方法 應用SPSS19.0統計學軟件對本次研究數據進行統計分析。對骨折愈中每種組織MOD值采用一般線性模型重復測量法進行組間差異比較, 采用LSD法對各時間點組間差異進行比較, 計量資料以均數±標準差表示,采用t檢驗。P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2　結果

①術后8 d, 一期治療組與陽性對照組見效情況比較差異無統計學意義(P＞0.05)；一期治療組與陽性對照組見效情況明顯優于陰性對照組和空白對照組(P＜0.05)；陰性對照組和空白對照組見效情況比較差異無統計學意義(P＞0.05)。②術后29 d, 二期治療組見效情況明顯優于一期治療組、陽性對照組, 差異具有統計學意義(P＜0.05)；一期治療組、陽性對照組見效情況比較差異無統計學意義(P＞0.05)；一期治療組見效情況優于陰性對照組, 差異具有統計學意義(P＜0.05)；陽性對照組和陰性對照組見效情況比較差異無統計學意義(P＞0.05)。③術后57 d, 三期治療組見效情況優于二期治療組,二期治療組見效情況明顯優于一期治療組、陽性對照組, 差異具有統計學意義(P＜0.05)；一期治療組見效情況明顯優于陰性對照組、空白對照組, 差異具有統計學意義(P＜0.05)；一期治療組見效情況與陽性對照組比較差異無統計學意義(P＞0.05), 陽性對照組和陰性對照組見效情況比較差異無統計學意義 (P＞0.05)。見表 1。

表1　各組術后不同時間段見效情況比較(只)

3　討論

中醫治病的獨到之處在于能夠辨證論治, 而中醫治療骨折更是憑借分期辨證施治獲得了認可并得以流傳千年。宋代王懷隱等所著《太平圣惠方》認為骨折患者需要“補筋骨、益精血、通血脈”；明朝薛已的《正體類要》中便強調了骨折的整體療法, 并提出“肢體損于外, 則氣血傷于內, 營衛有所不貫, 臟腑由之不和”的觀點。由此可見中醫對于骨折的治療主要集中于“痂去、新生、骨合”的動態過程中, 并開創性的將骨折的治療分為早期、中期、后期［3］：其中針對骨折早期的氣滯血瘀, 給予活血化瘀止痛；針對中期骨折患者的瘀去但未清、腫退但未消的特點, 給予接骨續筋和生新止痛之法；而骨折患者后期則由于久病而元氣大傷, 骨雖和但未堅, 因此治療思路在于固本培元, 以強筋壯骨, 并逐步使骨骼和周邊組織開始恢復［4-7］。因此本研究對家兔一期給予田七口服液灌胃治療, 二期給予傷科九味健骨片治療, 三期給予培元壯骨片治療。

現代醫學也發現局部骨生長因子對骨折修復起著關鍵的調節作, 決定著骨折修復的速度與質量。其中作為廣譜有絲分裂原的FGF-2, 是廣泛存在于機體組織的一種多聚肽, 能促進來源于中胚層和神經外胚層細胞的分裂增殖, 具有趨化和遷移作用, 同時也能夠對毛細血管內皮細胞的分裂增殖起到顯著促進作用［8-10］。

綜上所述, 中藥對骨折端各類骨癡組織FGF-2、BMP-2、Osx具有明顯的促進作用, 利用中醫三期治則對骨折愈合不同階段的各種組織均有不同的應用效果, 并且較其他形式的中醫治療方法具有較為明顯的促進作用, 因此臨床上對于骨折患者采取中醫三期治則值得積極推廣、應用。

［1］ 陳道振.中醫骨折三期治療對肱骨近端骨折術后的療效觀察.中國實用醫刊, 2015, 42(1)：89-90.

［2］ 馮小慶.肱骨近端骨折術后中醫骨折三期治療的應用與臨床療效初評 .中國校醫 , 2017, 31(6)：464.

［3］ 楊文才.中醫骨折三期治療對肱骨近端骨折術后的影響分析.臨床醫藥文獻電子雜志, 2016, 3(51)：10124.

［4］吳海斌, 張昊天.中醫骨折分期治療對骨折愈合bFGF、TGF-β、VEGF、BMP-2基因表達影響的實驗研究.哈爾濱醫藥, 2016,36(3)：290-291.

［5］溫建民, 高國慶, 楊大偉.骨折三期治療對骨生長因子BMP-2 mRNA表達影響的實驗研究.中國社區醫師(醫學專業半月刊),2009, 11(8)：3-4.

［6］畢鍇, 溫建民, 孫永生, 等.中醫骨折三期治療對家兔骨折愈合中VEGF與BMP-2表達影響的實驗研究.中國中醫基礎醫學雜志 , 2012(12)：1344-1347.

［7］ 高國慶.骨折三期治則對家兔骨折愈合過程中FGF-2mRNA,TGF-β1mRNA表達調控的研究.中國中醫科學院 中國中醫研究院, 2009.

［8］徐穎鵬, 溫建民, 董建文, 等.中醫骨折三期治療對家兔骨折骨膜組織中VEGF及VEGF mRNA表達的影響.中國骨傷,2010, 23(2)：120-124.

［9］畢鍇, 溫建民, 孫永生, 等.中醫骨折分期治療對家兔骨折愈合過程中TGF-β與bFGF表達影響的實驗研究.中國矯形外科雜志 , 2013, 21(4)：381-386.

［10］ 宋濤.中醫骨折三期治療對肱骨近端骨折術后的臨床療效觀察.湖北中醫藥大學, 2013.