麻杏竺膽顆粒提取工藝的研究

程曉雪

（天水中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，甘肅 天水 741020）

麻杏竺膽顆粒是天水市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院的臨床經(jīng)驗方，由蜜麻黃、杏仁、膽南星、天竺黃、黃芩、生石膏、郁金等多味中藥材組成。此方具有清熱化痰、理氣止咳的功效，適用于對存在咳嗽氣喘、咯痰黃稠、氣急嘔惡、煩躁不寧等證候的患者進行治療。在本次研究中，筆者采用L9(34)正交實驗法（以干浸膏得率和黃芩苷的提取率為考察指標）對麻杏竺膽顆粒的提取工藝進行篩選，并根據(jù)篩選的結(jié)果確定該中成藥的最佳提取工藝。

1　儀器與試劑

本次研究中所用的實驗儀器與試劑主要包括：Agilent 1260高效液相色譜儀（由Agilent科技有限公司生產(chǎn)）；FA2004電子天平（由上海民橋精密儀器有限公司生產(chǎn)）；DV215CD電子天平（由奧豪斯公司生產(chǎn)）；SK8200H型超聲波清洗儀（由上海科導超聲儀器有限公司生產(chǎn)）；MH-1000型調(diào)溫電熱套（由北京科偉永興儀器有限公司生產(chǎn)）；黃芩苷對照品（由中國食品藥品檢定研究院提供，批號：1100715-201318）；甲醇為色譜純(由美國Fisher公司生產(chǎn)),水為重蒸去離子水,其余試劑均為分析純。

2　方法與結(jié)果

2.1　提取正交試驗設(shè)計[1-3]

以提取時間、加水量和提取次數(shù)作為考察因素，每個因素選取三個水平進行正交試驗。詳見表1。

表1　提取工藝正交試驗因素水平表

2.2　供試品的處理

按照處方比例稱取各味藥共9份，按表2安排試驗。對上述9份中藥進行加水煎煮，并對藥液進行濾過處理，然后將藥液濃縮至約200ml。將藥液轉(zhuǎn)移至250ml的容量瓶中，加水定容至刻度（作為供試品溶液）。

2.3　干浸膏得率的測定

精密量取供試品溶液100ml，將其置于已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上濃縮至干，并于105℃下干燥3 h。將蒸發(fā)皿放置于常溫干燥器中30min后，迅速取出并精密稱定其重量，計算出膏率[4]。結(jié)果見表2。

2.4　黃芩苷含量的測定

參照《中國藥典》（2015年版）[5]中關(guān)于黃芩苷含量的測定方法對供試品溶液和對照品溶液中黃芩苷的含量進行測定。

2.4.1色譜條件 色譜柱：Agilent C18（規(guī)格：4.6 mm×250 mm，5μm）；流動相：甲醇-0.4%磷酸溶液（42.5：57.5）；檢測波長：276 nm；檢測流速：1.0ml/min；柱溫：25℃。

2.4.2供試品溶液的制備 取正交實驗所選1～9號濾液各5ml，置于50ml的容量瓶中，加入適量的濃度為50%的乙醇溶液后超聲處理30min，放冷后再加濃度為50%的乙醇溶液至刻度。搖勻，靜置，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

2.4.3對照品溶液的制備 精密稱取黃芩苷對照品5.86 mg，置于100ml的容量瓶中，加濃度為50%的乙醇溶液至刻度，制成每1ml含58.6μg黃芩苷對照品的溶液（作為對照品溶液）。

2.4.4測定方法 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20 μl，注入液相色譜儀中。

2.5　測定及分析結(jié)果

從干浸膏得率的結(jié)果來看，各因素影響大小的順序為C＞B＞A。其中，因素A為K1＞K2＞K3，因素B為K2＞K3＞K1，因素C為K2＞K3＞K1，直觀分析最佳提取工藝為A1B2C2；從黃芩苷含量的結(jié)果來看，各因素影響大小的順序為C＞B＞A，其中，因素A為K2＞K3＞K1，因素B為K3＞K1＞K2，因素C為K2＞K3＞K1，直觀分析最佳提取工藝為A2B3C2。由于方差分析結(jié)果中各因素對干浸膏得率和黃芩苷含量均無顯著影響，且干藥材存在吸水的情況[6]。從經(jīng)濟學和可操作性等方面考慮，初步擬定最佳提取工藝為藥材不浸泡，加水提取2次，第一次加8倍水，提取2 h，第二次加6倍水，提取1.5 h。詳細的測定及分析結(jié)果見表 2～4。

表2　L9(34)正交試驗設(shè)計及數(shù)據(jù)分析表

表3　干浸膏得率方差分析結(jié)果

表4　黃芩苷含量方差分析結(jié)果

2.6　最佳提取工藝的驗證

以處方比例稱取相應(yīng)的藥材，按擬定工藝條件取3份進行驗證試驗。試驗結(jié)果表明，3批試驗結(jié)果均接近正交試驗結(jié)果中的最大值，表明工藝條件穩(wěn)定可靠，并具有良好的重現(xiàn)性。詳細結(jié)果見表5。

表5　提取工藝驗證試驗

3　討論

麻杏竺膽顆粒是天水市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院的臨床經(jīng)驗方。本次研究采用L9(34)正交實驗法（以干浸膏得率和黃芩苷的提取率為考察指標）對麻杏竺膽顆粒提取工藝中的加水量、煎煮時間和煎煮次數(shù)進行優(yōu)化，并確定最佳的提取工藝。研究結(jié)果顯示，加水提取2次，第一次加8倍水，提取2 h，第二次加6倍水，提取1.5 h為麻杏竺膽顆粒的最佳提取工藝。經(jīng)驗證試驗證實，優(yōu)選出的麻杏竺膽顆粒提取工藝的穩(wěn)定性、重現(xiàn)性均較好。

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