尾側型同源轉錄因子-2、P53及Ki-67在直腸癌組織中的表達及臨床意義

吳春平，劉艷彩，趙嶺嶺

（衡水市第四人民醫(yī)院病理科，河北 衡水 053000）

直腸癌是指從齒狀線至直乙結腸交界處之間的惡性腫瘤。根據(jù)我院病理科的調查統(tǒng)計，近十年來直腸癌的發(fā)病率呈逐年上升的趨勢且患者的發(fā)病年齡趨于年輕化。對此病患者進行手術治療難以徹底清除其病灶。因此，分析直腸癌的發(fā)生、發(fā)展及發(fā)生浸潤轉移的特點成為進行臨床研究的熱點。尾側型同源轉錄因子-2（CDX-2）、腫瘤抑制因子P53和核蛋白Ki-67均是具有較高敏感性的腸上皮特異標志物[1]。關于進行CDX-2、P53和Ki-67的聯(lián)合檢測在評估直腸癌患者病情進展及預后方面的臨床價值，目前臨床上的報道仍較少。本次研究主要探討CDX-2、P53及Ki-67在直腸癌組織中的表達及對直腸癌患者進行CDX-2、P53及Ki-67聯(lián)合檢測的臨床意義。

1 材料與方法

1.1 標本及來源

本研究中的標本為2014年12月至2017年6月衡水市第四人民醫(yī)院病理科采集的70例直腸癌組織標本（在對患者進行手術時采集）及20例正常直腸粘膜組織（在對其進行直腸鏡檢時采集）。在為患者采集這些標本前，其均未進行過相關的治療。在70例直腸癌組織標本中，組織學分型為中-高分化型的標本有43例，為低分化型的標本有27例；其中相應腫瘤的最長徑＜5 cm的標本有21例，相應腫瘤的最長徑≥5 cm的標本有49 例；其中相應腫瘤發(fā)生淋巴結轉移的標本有44例，未發(fā)生淋巴結轉移的標本有26例；其中相應腫瘤的浸潤深度＜1/2肌層的標本有22例，≥1/2肌層的標本有48例；其中相應腫瘤臨床分期為Ⅰ+Ⅱ期的標本有22例，為Ⅲ+Ⅳ期的標本有48例。

1.2 試劑及方法

本研究中所用的兔抗人CDX-2、P53及Ki-67單抗、羊封閉血清、ElivisionTM 試劑盒、DAB等材料均購自北京中杉金橋生物有限公司。將所有的組織標本用10%的福爾馬林進行固定，然后分別制成4張切片，對其中1張組織切片進行蘇木-伊紅染色，將其余3張組織切片制成防脫載玻片。采用ElivisionTM plus二步法對組織標本進行免疫組化染色，在進行陰性對照時加入一抗（PBS）。分別檢測CDX-2、P53及Ki-67在本組直腸癌組織標本和正常直腸組織標本中表達的情況。由2名病理醫(yī)生在對本次研究不知情的前提下對檢測結果進行計數(shù)，隨機選取5個高倍視野（400x）計算每100個細胞中CDX-2、P53及Ki-67表達呈陽性的細胞數(shù)，取其平均值作為檢測數(shù)值，CDX-2、P53、Ki-67表達呈陽性的細胞數(shù)若≤30%可判定其表達呈陰性，若＞30%可判定其表達呈陽性。

1.3 統(tǒng)計學分析

采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對本研究中的數(shù)據(jù)進行分析，計量資料用（±s）表示，采用t檢驗，計數(shù)資料用%表示，采用X2檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 CDX-2、P53及Ki-67在本組直腸癌組織及正常直腸粘膜組織中表達的情況

CDX-2、P53及Ki-67在正常直腸粘膜組織中表達的陽性率分別為80%(16/20)、0、0，在直腸癌組織中表達的陽性率分別為 32.85%(23/70)、77.1%（54/70）、65.7%（46/70）（詳見圖1、圖2、圖3）。與在正常直腸粘膜組織中表達的陽性率相比，CDX-2在直腸癌組織中表達的陽性率較低，P53及Ki-67在直腸癌組織中表達的陽性率較高，差異有統(tǒng)計學意義（X2=15.25、38.57、26.88，P＜0.01）。

圖1經(jīng)免疫組化檢測CDX-2表達（SPχ200）

圖2經(jīng)免疫組化檢測P53表達（SPχ200）

圖3經(jīng)免疫組化檢測Ki-67表達（SPχ200）

2.2 CDX-2、P53及Ki-67在本組直腸癌組織中的表達與直腸癌臨床病理特征的關系

CDX-2、P53及Ki-67在本組直腸癌組織中表達的陽性率與直腸癌患者腫瘤的大小無相關性（P＞0.05），與直腸癌患者的腫瘤組織是否發(fā)生淋巴結轉移、TNM分期及浸潤的深度均有相關性（P＜0.05）。P53在本組直腸癌組織中表達的陽性率與直腸癌患者腫瘤分化程度的高低無相關性（P＞0.05）。CDX-2及Ki-67在本組直腸癌組織中表達的陽性率與直腸癌患者腫瘤分化程度的高低有相關性（P＜0.05）。詳見表2。

表1 CDX-2、P53及Ki-67在直腸癌組織及正常直腸粘膜組織中表達的情況（n=90)

表2 CDX-2、P53及Ki-67在直腸癌組織中的表達與直腸癌臨床病理特征的關系

3 討論

直腸癌患者在進行手術治療時其腫瘤病灶難以被徹底切除，其病情在術后易復發(fā)，腫瘤組織侵襲重要器官是其主要的死亡原因[2]。CDX-2是胚胎發(fā)育的重要調節(jié)因子，在腸道上皮中呈高表達，在其他器官中均無表達[3]。研究發(fā)現(xiàn)，腸道上皮中缺失CDX-2會導致消化道畸形發(fā)育，出現(xiàn)多發(fā)息肉病變及鱗狀上皮化生，進而可誘導細胞惡變和腫瘤的發(fā)生[4]。p53基因的缺失與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有關。一般認為，p53的過表達與腫瘤的轉移、復發(fā)及預后不良有關[5]。本次研究的結果顯示，CDX-2在直腸癌標本中的表達率（32.85%）低于其在正常直腸粘膜中的表達率（80%），P53和Ki-67在直腸癌標本中的表達率（77.1%）高于其在正常直腸粘膜中的表達率（65.7%）?？梢姡珻DX-2的減少可促進正常細胞轉化成腫瘤細胞[6]，CDX-2可能是抑癌基因。這一結論與以往的報道相符合[7]。

Ki-67在直腸癌組織中表達的高低與直腸癌的分化程度、TNM分期、浸潤深度、有無淋巴結轉移及患者的預后均密切相關[8]。研究發(fā)現(xiàn)，直腸癌與正常腸黏膜中Ki-67的表達具有明顯的差異。直腸癌的分化越差，其組織中Ki-67的強表達率就越高，其增殖活性也越高。進行Ki-67檢測可以客觀地反映直腸癌的分化程度。人體內P53和Ki-67與CDX-2的表達均呈負相關。人體內CDX-2的表達缺少可促進正常細胞向腫瘤細胞轉化，在腫瘤發(fā)生后P53的表達可增多，促進腫瘤細胞的惡性增殖，使處于增殖期的腫瘤細胞明顯增多。

本次研究的結果證實，CDX-2、P53及Ki-67的表達在直腸癌的侵襲、轉移中均可起到重要的作用。進行CDX-2、P53及Ki-67的聯(lián)合檢測可為直腸癌的篩查、診斷、療效分析及制定個性化的治療方案提供重要的臨床依據(jù)。

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