腦卒中后癲癇患者血清腦源性神經營養因子、S100B和神經元特異性烯醇化酶表達及相關性

張艷麗　楊曉華　臧兆萍　王海鵬　李志茹　李美娜　齊寶奎

(齊齊哈爾醫學院附屬第一醫院神經內科，黑龍江　齊齊哈爾　161041)

腦卒中包括缺血性腦卒中和出血性腦卒中，腦卒中后癲癇是指腦卒中發病后繼發出現的癲癇，目前研究顯示腦梗死后癲癇發病率隨年齡增加有明顯增長趨勢〔1，2〕。病變形成和進展過程中，血清中相關蛋白可以出現明顯變化，腦源性神經營養因子(BDNF)、S100B蛋白(S100B)和神經元特異性烯醇化酶(NSE)是與神經細胞生長、損傷和修復相關的蛋白，其表達量可以在一定條件下提示神經系統病變的損傷程度〔3～5〕。本實驗應用酶聯免疫吸附實驗檢測腦卒中后老年癲癇患者血清中BDNF、S100B和NSE表達特征，分析其臨床意義。

1　資料與方法

1.1臨床資料2016年1～12月齊齊哈爾醫學院附屬第一醫院診斷為腦卒中并繼發癲癇的老年患者68例為觀察組。納入標準：①經磁共振成像確診為腦卒中；②腦卒中后出現2次及以上的癲癇發作。排除標準：①有神經系統手術史、腦梗死病史及癲癇病史；②嚴重內臟器官疾病。其中男39例，女29例，年齡60～88(平均69.7)歲。其中腦梗死28例，腦出血30例，蛛網膜下腔出血10例。同期腦卒中無繼發癲癇的老年患者30例為對照組，其中男15例，女15例，年齡70～84(平均68.6)歲。同期體檢證實無明顯器質性疾病及神經系統病史的成年人血清標本30例為正常對照組，其中男15例，女15例，年齡50～62(平均55.3)歲。3組一般資料差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2BDNF、S100B和NSE蛋白的檢測觀察組于確診后清晨抽取空腹靜脈血，對照組于腦卒中復查時(發病后4～8 w)抽取空腹靜脈血，正常對照組常規抽取清晨空腹靜脈血，均為3 ml，3 000 r/min離心15 min將血清分清并置于-20℃冰箱中凍存待檢。樣本均于3 w內集中進行檢測，BDNF、S100B和NSE的檢測均應用酶聯免疫吸附實驗，均由同一技師操作，做好質控工作，減少人為誤差。

1.3統計學方法應用SAS6.12統計軟件進行t、χ2檢驗，方差分析及線性相關分析。

2　結　果

2.13組BDNF、S100B和NSE表達比較BDNF在正常對照組、對照組和觀察組中表達有下降趨勢，S100B和NSE在正常對照組、對照組和觀察組中表達有升高趨勢(P<0.05)。見表1。

2.2BDNF、S100B和NSE表達在觀察組不同臨床特征中的比較觀察組BDNF、S100B和NSE表達量均與病變類型有關，S100B表達與腦卒中類型有關。見表2。

表1　3組BDNF、S100B和NSE表達比較

表2　BDNF、S100B和NSE表達在觀察組不同臨床特征中的比較

2.3觀察組BDNF、S100B和NSE相關性BDNF和NSE表達呈負相關(r=-0.46，P=0.042 1)，BDNF和S100B、S100B和NSE表達均無明顯相關性(P>0.05)。

3　討　論

癲癇是大腦神經元突發性異常放電，引起短暫性大腦功能障礙的慢性疾病，繼發性癲癇多發生于多種腦部血管病損和代謝異常〔6〕。腦卒中是一種嚴重的血液循環障礙疾病，患者病變常繼發癲癇，引起并加重患者的腦損害。神經系統損傷與血清中相關蛋白表達失調有關系，其繼發的癲癇也與細胞因子有關〔7〕。BDNF是與神經細胞再生相關的一種蛋白，由119個氨基酸構成，分子量為13 kD，以非共價鍵形式組成。正常情況下中樞神經系統和周圍神經系統神經細胞及膠質細胞均可以有BDNF形成，其常以旁分泌形式分泌，也有自分泌生成的，并與神經細胞的順行軸突運輸有關〔8〕。BDNF在機體中可以通過調控細胞膜上鈣離子通道蛋白發揮作用，主要作用是保護神經細胞，其機制與BDNF抗自由基損傷及抗氧化有關。還有觀點認為BDNF可以減少神經細胞凋亡的形成〔9〕。S100B在機體中是分子量較小的蛋白，常與鈣離子有關，正常情況下在神經細胞中表達量較低〔10〕。在缺血性腦病、腦血管疾病等病變時，S100B生成增加，其可以促進局部細胞增殖，對神經細胞起保護功能，但是其過度表達可以損傷神經細胞，不利于病變修復〔11〕。也有研究認為S100B在體內有促進神經細胞損傷后的級聯反應作用，可以有效調控神經細胞的活性〔12〕。NSE在體內以酶的形式存在，也被認為在2-磷酸甘油轉化為磷酸烯醇式丙酮酸時具有限速作用，當神經細胞損傷和脫髓鞘病變發生后，神經元中NSE可以進入血清中，其量的大小與神經細胞的損傷情況有關，但是在神經元修復期，NSE表達下調的也較慢，可以在一定時間內作為評價神經系統損傷的因子〔13〕。近年也有學者將NSE作為一個敏感的反映神經元損傷的指標，但是其表達并不特異。有研究認為NSE可以在神經內分泌腫瘤中高表達〔14〕。

本研究結果提示BDNF、S100B和NSE 3種蛋白異常表達對腦卒中形成有一定促進作用，也對腦卒中后癲癇形成具有明顯作用，癲癇與神經細胞異常放電有關，在此過程中常伴隨著神經元修復性改變和神經細胞結構的異常，3種蛋白可能在一定程度上對這些改變有提示作用。BDNF、S100B和NSE 3種蛋白表達量檢測可能對觀察病變的恢復及進展有一定意義。蛛網膜下腔出患者形成的癲癇病變可能更重，臨床中應當關注，并在治療中密切隨診觀察。S100B在病變鑒別中可能也區別于其他兩個因子而有一定價值。本文提示BDNF和NSE二者在病變形成中具有一定的負向協同效應，臨床中可以將二者聯系起來觀察病變的發展，研究認為BDNF和NSE在神經系統損傷中是相互拮抗的因素，其動態平衡對于觀察病變的進展可能有一定價值〔15，16〕。

1鄒蓉，戴永萍，趙合慶.抗癲癇藥物對卒中后癲癇患者血清同型半胱氨酸、葉酸、B族維生素水平的影響〔J〕.臨床神經病學雜志，2017；30(2)：93-7.

2張瑜，鄒颯楓，馬莉，等.卒中后癲癇危險因素的病例對照研究〔J〕.中風與神經疾病，2015；32(8)：734-5.

3Wang L，Jiang J，Du L，etal.The prognostic value of serum pregnancy-associated plasma protein A，S100 and high sensitivity C-reactive protein in acute ischemic stroke patients without heparin administration〔J〕.Clin Biochem，2014；47(16-17)：187-91.

4Bharosay A，Bharosay V，Varma M，etal.Correlation of brain biomarker neuron specific enolase (NSE) with degree of disability and neurological worsening in cerebrovascular stroke〔J〕.Indian J Clin Biochem，2012；27(2)：186-90.

5Castren E，Rantamaki T.The role of BDNF and its receptors in depression and antidepressant drug action：reactivation of developmental plasticity〔J〕.Devel Neurobiol，2010；70(32)：289-97.

6周立春，陳天風，伍文清.腦卒中與腦卒中后癲癇-附1000例臨床分析〔J〕.卒中與神經疾病，2000；7(3)：174-5.

7李俊蘭.36例腦卒中后癲癇的臨床分析〔J〕.重慶醫學，2011；40(34)：3495-7.

8Kanemoto K，Kawasaki J，Tarao Y，etal.Association of partial epilepsy with brain-derived neurotrophic factor (BDNF) gene polymorphisms〔J〕.Epilepsy Res，2003；53(3)：255-8.

9Mcnamara J，Scharfman H.Temporal lobe epilepsy and the BDNF receptor，trkb〔J〕.Epilepsia，2010；51(5)：46-7.

10Lu C，Li J，Wei S，etal.Elevated plasma S100B concentration is associated with mesial temporal lobe epilepsy in Han Chinese：a case-control study〔J〕.Neurosci Lett，2010；484(2)：139-40.

11Portela L，Tort A，Walz R，etal.Interictal serum S100B levels in chronic neurocysticercosis and idiopathic epilepsy〔J〕.Acta Neurol Scand，2003；108(6)：424-7.

12Falcone T，Janigro D，Lovell R，etal.S100B blood levels and childhood trauma in adolescent inpatients〔J〕.J Psych Res，2015；62(2)：14-22.

13趙麗梅，趙玉萍，高翠紅，等.熱性驚厥患兒血氣指標變化與BDNF、NSE、S100B表達水平的相關性分析〔J〕.熱帶醫學雜志，2015；15(7)：920-1.

14Sankar R，Shin D，Wasterlain C.Serum neuron-specific enolase is a marker for neuronal damage following status epilepticus in the rat〔J〕.Epilepsy Res，1997；28(2)：129-36.

15鄧向紅，劉迪輝，羅向陽，等.BDNF在癲癇兒童的表達及意義〔J〕.臨床醫學工程，2010；17(2)：15-6.

16Martinowich K，Manji H，Lu B.New insights into BDNF function in depression and anxiety〔J〕.Nature Neurosci，2007；10(9)：1089-93.