乳腺癌患者ER、PR、C-erbB-2、Ki-67的表達與超聲征象的關系

薛林燕　趙　旭　才讓卓瑪　王　雪　劉 君　張澤愷

(青海大學附屬醫院超聲科，青海　西寧　810001)

1北京民航總醫院婦產科

乳腺癌為女性高發惡性腫瘤類型，目前全球每年大概新增乳腺癌病例120萬例，并且該數據逐年上漲，早確診、早治療對于該病治療效果和生存率均非常重要〔1，2〕。報道顯示，內源性雌激素直接參與影響乳腺上皮本身生長及分化活動，并且對乳腺癌發病及病情進展等起關鍵作用〔3〕。其中比較經典的可用于評估乳腺癌預后情況及指導治療方向的重要調節因子包括雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)、人表皮生長因子受體(C-erbB)-2、增殖細胞核抗原(Ki-67)等，臨床通常根據其表達情況判斷患者激素依賴情況，并決定是否采用內分泌治療。同時，超聲對于乳腺癌臨床診斷及腫瘤良惡性辨別也發揮重要作用，為臨床診療工作提供較大幫助。近期有學者提出，可將影像學及病理學二者相結合用于乳腺癌臨床診療，通過生物學標記物及基因技術等來完成病理分子檢測，并確定乳腺癌特征〔4〕。本文主要探討乳腺癌患者ER、PR、C-erbB-2、Ki-67的表達及與超聲征象的關系。

1　資料和方法

1.1臨床資料選擇2014年1月至2017年5月青海大學附屬醫院接受診治的乳腺癌患者194例納入此次研究。入選標準：(1)符合WHO關于乳腺癌的相關診斷標準〔5〕；(2)經術后病理證實；(3)均為女性；(4)年齡>20歲；(5)對本次研究已知情同意，且已簽署知情同意書。排除標準：(1)其他類別的惡性腫瘤者；(2)入組前已實施手術治療者；(3)病歷資料缺失者。194例患者中，年齡21～68歲，平均(44.67±1.29)歲。病理類型：浸潤型導管癌191例，黏液癌3例。有淋巴結轉移64例，無淋巴結轉移130例。本次研究經醫院倫理委員會評審通過。

1.2研究方法

1.2.1超聲診斷方法選擇東芝660SSA-660A及飛利浦iU-Elite 550A彩超診斷儀為所有患者實施檢查，探頭頻率4～10 MHz及7.5～12 MHz，患者取仰臥位，將雙側乳房和雙腋下予以充分顯露，對以乳頭作為中心位置的四個象限和乳頭下方行多切面掃查，確保掃查的斷面均相互重疊，無掃查盲區。記錄以下數據信息：(1)腺體厚度；(2)腫塊位置；(3)腫塊大小；(4)腫塊的包膜和邊界及形態；(5)腫塊內部回聲；(6)鈣化灶情況等。在腫塊和周邊行彩色多普勒(CDFI)和能量多普勒(CDE)的血流疊加顯像，而后根據Adler半定量法對血流分級進行評定〔6〕，主要分為：(1)0級，無血流；(2)Ⅰ級，可見少量血流，存在1～2個點狀血流，且管徑<1 mm；(3)Ⅱ級，可見中量血流，存在1～2個主要血管，且長度大于腫塊的半徑，或同時存在2～4個小血管；(4)Ⅲ級，可見大量血流，存在≥4個血管，且粗細不等。觀察患者雙側腋下淋巴結的大小和形態及回聲等情況。

1.2.2ER、PR、C-erbB-2及Ki-67的檢測將手術切除的癌灶組織制成石蠟切片，應用產自深圳晶美公司的兔抗人雌激素受體的免疫組化型單克隆抗體(ER)和兔抗人孕激素受體的免疫組化型單克隆抗體(PR)，鼠抗人表皮生長因子的免疫組化型單克隆抗體(C-erbB-2)和鼠抗人Ki-67抗體常規實施免疫組化染色，嚴格根據說明書所描述的步驟實施操作。其中ER、PR和Ki-67的陽性表達均定位在細胞核，在其中有彌漫性或者深淺各異的棕黃色顆粒記為陽性。C-erbB-2主要定位在細胞質，在細胞質內發現棕黃色顆粒則記為陽性。對每張切片在100倍的視野下選擇腫瘤細胞的強染色區，并在400倍的視野下作出100個癌細胞的連續計數，統計陽性細胞的比例，其中比例<6%為陰性，6%～25%為弱陽性，26%～50%為中陽性，≥51%為強陽性。陽性率=陽性細胞數/總細胞數×100%。

1.3觀察指標分析患者超聲特征與ER、PR、C-erbB-2及Ki-67的表達的相關性。

1.4統計學方法應用SPSS21.0統計軟件進行分析，其中計數資料用(n，%)表示，采用χ2檢驗，相關性分析采用Pearson法實施評價，P<0.05為差異有統計學意義。

2　結　果

2.1患者的超聲特征分析194例乳腺癌患者的超聲特征中，腫塊邊緣均不整齊，且無包膜，超聲顯示的界限不清。腫塊的直徑最小者為0.4 cm×0.5 cm，最

大者5.2 cm×6.4 cm。且腫塊直徑<2.0 cm、有毛刺征、有鈣化灶、血流信號分級為Ⅱ～Ⅲ級、無淋巴結轉移為主要的超聲特征表現見表1。

表1　患者的超聲特征分析〔n(%)〕

2.2患者超聲征象與ER、PR、C-erbB-2及Ki-67表達ER陽性表達者有毛刺征、無淋巴結轉移及血流信號分級為Ⅱ～Ⅲ級的比例明顯更高，PR和C-erbB-2陽性表達者無淋巴結轉移及血流信號分級為Ⅱ～Ⅲ級的比例明顯更高，Ki-67陽性表達者腫塊直徑≥2 cm及血流信號分級為Ⅱ～Ⅲ級的比例明顯更高，差異均有統計學意義(均P<0.05)，見表2。

2.3患者的超聲征象與其ER、PR、C-erbB-2及Ki-67表達的相關性患者的ER表達與毛刺征和血流信號分級均呈正相關，與淋巴結轉移呈負相關。患者的PR及C-erbB-2均與淋巴結轉移呈負相關，與血流信號分級呈正相關。患者的Ki-67與腫塊直徑和血流信號分級呈正相關。見表3。

表2　患者的超聲征象及ER、PR、C-erbB-2及Ki-67陽性表達結果〔n(%)〕

表3　患者的超聲征象與ER、PR、C-erbB-2、Ki-67表達的相關性分析(r值，P值)

3　討　論

多數乳腺癌患者初次就診時已進入進展期階段，對患者身心均造成較大傷害，伴隨臨床對于乳腺癌發病、病情進展及浸潤轉移等活動不斷地深入研究，其治療方法也不斷擴展，逐漸發展為手術、放化療及內分泌治療等多種方法相結合的新型綜合療法〔7〕。同時，治療方案的選定主要依據患者病理分型、分期及雌激素受體表達情況等信息，并且臨床規定當患者ER、PR、C-erbB-2、Ki-67等表達結果為陽性時才可以選用內分泌治療，因此乳腺癌組織內雌激素受體表達情況直接關系到患者治療方式選擇及預后評估等〔8〕。而超聲檢查屬于無創性檢查，可重復進行，能夠較好地適用于乳腺腫瘤臨床診斷，對腫瘤良惡性鑒別起到重要輔助作用，并對臨床治療工作提供可靠依據〔9〕。

本研究發現，194例乳腺癌患者的超聲特征中，腫塊邊緣均不整齊，且無包膜，超聲顯示的界限不清，且腫塊直徑<2.0 cm、有毛刺征、有鈣化灶、血流信號分級為Ⅱ～Ⅲ級、無淋巴結轉移為乳腺癌的主要超聲特征表現，這與黃巍等〔10〕的報道結果基本相符，提示對乳腺癌患者實施超聲診斷時，較易發現毛刺征和鈣化灶，以及更加豐富的血流信號，這主要與乳腺癌的腫瘤形成機制有關。癌灶形成后，其需要的血供明顯增多，且邊緣變化較大，與乳腺正常組織的超聲影像明顯存在差異。但本研究發現多數患者的腫塊直徑相對較小，且較少出現淋巴結轉移，主要是因為乳腺癌發病位置較為特殊，患者因乳腺不適就診的時間相對提前。同時，本文提示乳腺癌患者機體的ER、PR、C-erbB-2及Ki-67表達與其超聲征象之間存在著緊密聯系。原因主要是因為ER、PR、C-erbB-2及Ki-67的表達與腫瘤的發生發展有關，而超聲征象所反映的即腫瘤的病變情況，因此二者之間具有一定的相關性〔11〕。臨床對于激素依賴類型乳腺癌患者，通常應用ER類型拮抗劑進行治療，此治療方案對于ER、PR陽性結果患者臨床預后效果較理想，進而受到廣泛認可及接受，也證實了ER和PR的表達情況有助于乳腺癌臨床預后評估以及治療指導。C-erbB-2屬于表皮生長因子類型受體家族，可作為細胞生長、分化及存活等活動關鍵調節因子，同時在細胞生長和增殖及分裂等活動均有所參與并起到重要調控作用。此外，臨床研究發現〔12〕，C-erbB-2對腫瘤生長發揮控制作用，當其蛋白產物呈過度表達或者異性增生時，會與致瘤性之間產生一定聯系，并且C-erbB-2和腫瘤預后直接相關。當C-erbB-2表達上升時，患者臨床預后往往較差。Ki-67和腫瘤產生以及發展等關系十分密切，屬于核增殖性標志物，有助于判斷腫瘤細胞本身增殖水平。惡性腫瘤整個生長過程中會分泌出大量多種生長因子，進而促進新生血管產生，以確保自身生長所需。而腫瘤中新生血管通常表現為血管壁缺少肌細胞，通常是由內皮細胞及腫瘤細胞構成，使得血管壁薄并且管腔較大，粗細不勻且走行扭曲，呈紊亂血管網，甚至表現為動靜脈瘺，此類病理學特點均是超聲對乳腺癌組織血供情況診斷依據。通過對乳腺癌組織內血流狀況進行半定量分析，可見其組織周邊和內部血流分布狀態分成穿入型、周邊型及內部型和無血型幾種。并且研究結果顯示，穿入型血流和患者C-erbB-2、Ki-67的表達呈明顯正相關，當癌灶組織內血流豐富，C-erbB-2陽性率較高，且Ki-67的表達越高〔13〕。同時，腫瘤直徑和Ki-67水平高低呈正相關，腫瘤直徑越大則Ki-67表達水平往往也越高；這在賈志鶯等〔14〕的報道中也有類似結論。

1劉麗，徐文貴，戴東，等.小乳腺癌的超聲診斷特征及其與ER、PR、c-erBb-2表達相關性研究〔J〕.中國實驗診斷學，2016；20(3)：389-92.

2蔡培偉，林騰，朱曉歡，等.三種超聲成像技術對乳腺腫瘤大小的測量誤差與雌激素受體、孕激素受體、血管內皮生長因子表達的相關性研究〔J〕.中國基層醫藥，2016；23(5)：641-4.

3楊紹英，劉朝榮，張志剛，等.乳腺癌新輔助化學治療前后雌激素受體、乳激素受體、Ki-67抗原和人類表皮生長因子受體-2的表達〔J〕.新鄉醫學院學報，2017；34(2)：125-8.

4李美鶯，吳陽，夏寅娟，等.乳腺癌超聲數據分級系統與雌激素受體、孕激素受體、原癌基因的相關性〔J〕.實用臨床醫藥雜志，2017；21(1)：103-5.

5姜文彬，任甫.乳腺浸潤性導管癌超聲征象與生物學指標相關性的研究〔J〕.中國臨床醫學影像雜志，2017；28(2)：89-94.

6Li B，Zhao X，Dai SC，etal.Associations between mammography and ultrasound imaging features and molecular characteristics of triple-negative breast cancer〔J〕.Asian Pac J Cancer Prev，2014；15(8)：3555-9.

7王雯，劉紀鋒.乳腺癌超聲征象與分子生物學表達的相關性研究〔J〕.中國中西醫結合影像學雜志，2016；14(4)：400-2.

8李亞帥，王知力，李曄，等.非腫塊型與腫塊型乳腺癌的免疫組織化學指標研究〔J〕.中國醫學影像學雜志，2016；24(12)：897-9，902.

9馬少君，劉延梅，張月浪，等.雌激素受體陰性乳腺癌HER-2過表達及與影像學和臨床病理特征的關系〔J〕.現代腫瘤醫學，2016；24(23)：3725-9.

10黃巍，程文，高崧瀛，等.乳腺癌彩色多普勒血流分布類型與分子生物學的相關性研究〔J〕.臨床超聲醫學雜志，2010；12(11)：736-8.

11顏丹，何文，鄔冬芳，等.乳腺癌超聲聲像圖表現與免疫組化指標的關系及意義〔J〕.臨床超聲醫學雜志，2008；10(10)：659-61.

12Xu G，Han T，Yao MH，etal.Three-dimensional ultrasonography for the prediction of breast cancer prognosis〔J〕.J BUON，2014；19(3)：643-9.

13郭冀魯，李遠，牛俊波，等.乳腺浸潤性導管癌超聲特征與分子生物學表達的相關性研究〔J〕.中國醫學創新，2015；12(26)：32-5.

14賈志鶯，艾秀清，張銀華，等.乳腺浸潤性導管癌直接超聲征象與雌激素受體和孕激素受體表達的關系研究〔J〕.中國全科醫學，2016；19(27)：3291-5.