苦味酸速率法和酶法測定血清肌酐方法學評價

秦連英　鞏文平

【中圖分類號】R466.11 【文獻標識碼】A 【文章編號】2095-6851（2018）02-0-02

腎臟疾病是嚴重危害人類健康的疾病之一，據估計，目前全世界腎病患者人數超過6億，每年死于慢性腎病相關疾病的患者人數超過100萬，且腎病患病率還在不斷上升。肌酐檢測是腎功能檢測的一個重要指標。血中肌酐的濃度能準確地反映腎小球的功能。它的檢測結果對腎臟患者的臨床診斷、療效觀察及預后判斷有很重要的意義。測定血清肌酐最重要的兩種方法是酶法和苦味酸法。這兩種方法因為測定原理不同，抗干擾能力不同，導致兩種檢測結果有差異。但具體兩種方法各有什么優缺點，筆者采用Cobas C 501全 自動生化分析儀用兩種方法對50例臨床患者進行對照測定，并對結果進行統計學分析，為實驗室選擇適合的檢測方法提供依據。了解酶法與苦味酸速率法測定血清肌酐的優缺點，為檢驗科選用檢測方法提供參考依據。

血清中肌酐的測定是診斷和監測腎功能損傷與療效觀察的一項重要生化指標，由于苦味酸法容易被內源性物質干擾，特異性差，故通常采用Trinder反應（偶聯終點比色法）為指示系統的肌酐酶偶聯肌氨酸氧化酶法、肌酐亞胺水解酶偶聯谷氨酸脫氫酶法來測定血清肌酐，但在臨床檢測中往往會遇到部分血清標本肌酐結果假性升高或下降，與尿素氮結果不匹配的情況。因此現結合臨床實際對影響酶法測定的因素進行分析。

在堿性苦味酸速率法測定肌酐時膽紅素干擾清除劑高鐵氰化鉀的量對測定結果有一定影響，試劑中加入高鐵氰化鉀后，標準液的反應速率有下降趨勢。血清標本反應速率在加入高鐵氰化鉀濃度較低時有下降，但下降比率遠較標準液為小，而加入濃度較高時反應速率有明顯升高、總的效果是加入高鐵氰化鉀后使肌酐測定結果升高，且隨高鐵氰化鉀濃度的加高而加高。不同廠家的標準液則反應速率變化的規律又略有差異。

1 材料與方法：

1.1 對象：我院康復科患者共50例，其中男23例，女27例，年齡32～70歲。全部測試為空腹狀態。

1.2 測試儀器：Cobas C 501全 自動生化分析儀

1.3 測試試劑： 酶法和苦味酸法所用試劑、定標液，質控品均為羅氏診斷產品（上海）有限公司試劑。

1.4 測試方法：由醫務人員于清晨7點抽取空腹靜脈血3ml，在2小時內分別用兩種方法測定血清肌酐濃度。同時按美國臨床實驗室標準化委員會 EP9-A文件方案，將測定結果進行相關回歸分析，計算兩種方法間的偏倚。每天選取10份臨床患者血液標本加一份質控品，并分別用兩種方法 進行測定，每份重復做兩遍，共測定5天，記錄結果。

1.5 統計學方法：用spss14.1統計學軟件進行統計學分析。

2 結果

兩種方法測定50份標本的肌酐濃度，苦味酸法肌酐濃度為39～102umol/l，平均為（62+-7.12）umol：；酶法測定的血清肌酐為45～110umol， 平均為（70+-7.53）umol。并且從測定的50份標本的肌酐濃度結果來看，方法內和方法間重復測定值離群點的檢驗，未發現有超出質控范圍 數據，且酶法和苦味酸法相關系數R=0.998， 回 歸方程為Y=0.921X+7.963。由此 回歸方程，對兩種方法檢測血清肌酐的結果進行預期偏倚和相對偏倚的估計，發現隨著標本肌酐濃度的升高偏倚增大。建議苦味酸法測實驗室標本，當肌酐濃度大于300umol /l時，酌情稀釋結果會更準確，否則結果偏低。兩種方法測定肌酐的精密度、準確度均符合要求，而且兩種方法測定結果有良好的相關性，但是酶法與苦味酸速率法比較，線性范圍更寬，精密度、準確度、靈敏度也更高，特異性即抗干擾力也更強。

3 討論

肌酐是肌酸代謝的終產物，在機體正常狀態下，它的產生和排泄都較穩定。苦味酸法是比較經典的一種檢測方法，但它的不足之處是特異性差，血中丙酮，丙酮酸，葉酸，抗壞血酸，葡萄糖，乙酰乙酸等都可能在此反應中呈色，因此被稱為“非肌酐色源”。用血清作樣品測定時此類物質可占到發色強度的百分之二十。此外，一些頭孢類藥物也可與苦味酸反應顯色引起干擾。綜上原因，隨著醫學檢驗技術的進步，目前大多數醫院采用肌氨酸氧化酶法測定血清肌酐。它的優點是特異性強，準確度高，受干擾的物質少，但試劑價格相對較貴。苦味酸法價格便宜，但筆者多年的檢驗工作經驗來看，苦味酸法也有很多的局限性，它的穩定性不夠，因為有較重的著色，對比色杯的污染不容忽視。苦味酸對儀器管道也有一定的腐蝕作用。再一個就是苦味酸法受到諸多干擾物的干擾，尤其是膽紅素和血紅蛋白，造成肌酐檢測結果偏低。各醫院檢驗科根據實際情況選用檢測方法。有條件的大醫院建議用酶法，一些基層醫院考慮成本問題，也可用苦味酸法。用酶法測定血清肌酐比苦味酸法更可靠，雖然價格相對較高，但為了給病人提供更準確的檢驗結果，建議各醫院檢驗科還是選用酶法。

由于本次研究樣本量少，研究時間短，結果又一定的局限性。建議采用大樣品，多中心研究，期待與各位同仁作進一步的深度分析和探索。

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