宮頸癌患者人乳頭狀瘤病毒感染與陰道細菌感染的相關性*

郭冰杰 楊彩梅

(北京中醫醫院順義醫院婦產科，北京 101300)

宮頸癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，在女性中的發病率僅低于乳腺癌，嚴重威脅著廣大婦女的生命[1-2]。流行病學調查顯示全世界每年宮頸癌新發病例約有 50萬人，我國示每年新發宮頸癌14萬病例左右[3]。人乳頭狀瘤病毒(human papilloma virus，HPV)是乳多空病毒科乳頭瘤病毒屬，具雙鏈閉環DNA基因組，其長度為7200～8000bp，為無包膜的小分子(55nm)DNA腫瘤病毒[4-5]。HPV感染是宮頸癌發生的主要原因，其中高危型HVP主要為HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52，不過多數HPV感染都是暫時的，只有少部分HPV感染發生可發展為宮頸癌前病變或宮頸癌，也表明還有因素的參與協同促進宮頸癌發生發展[6-8]。宮頸癌患者多合并有陰道感染，使得陰道分泌物有特殊腥臭氣味，影響患者的身心健康[9]。特別是條件致病菌便會在陰道內大量繁殖，可改變陰道的微環境，繼而誘發出現陰道的菌群紊亂，不過是否有增加HPV感染與宮頸致癌的風險還不得而知[10-11]。本文將宮頸癌患者及同期慢性宮頸炎患者的陰道分泌物細菌培養結果及HPV感染情況進行回顧性分析，了解宮頸癌患者中HPV感染和陰道細菌感染的情況，分析其可能的協同作用。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象 2014年2月～2017年1月選擇在我院診治的宮頸癌患者150例作為觀察組，同期選擇非宮頸癌的慢性宮頸炎患者150例作為對照組。納入標準：研究得到醫院倫理委員會的批準；已婚，均有性生活史；年齡20～90歲；觀察組與對照組均經病理檢查證實診斷明確；沒有合并其他惡性腫瘤的患者。排除標準：曾經放療或行新輔助化療后的患者；無性生活史的患者；合并有其他婦科及系統的惡性腫瘤患者；既往被診斷過宮頸病變，并接受治療的患者。兩組的年齡、孕次、產次、體重指數等對比無明顯差異(P>0.05)，見表1。

表1 兩組患者一般資料對比Table 1 The general data of two groups

1.2 方法

1.2.1 標本采集 ①陰道分泌物培養采集：在月經結束后第5～7d，采用碘伏常規消毒外陰后，暴露子宮頸部，用無菌長柄棉簽采集陰道內中上1/3 內側壁粘膜，取出標本后置于無菌試管中，送檢驗科細菌室進行細菌培養鑒定分析。②宮頸HPV采集方法：暴露宮頸部，選擇專用小刷子置于子宮頸口與粘膜交界處，順時針旋轉 5 圈，停留 10 s，取出后將小刷子置于無菌試管中，送檢驗科細菌室進行宮頸HPV分析。

1.2.2 檢測方法 ①細菌分離培養與鑒定：將細菌標本接種于麥康凱培養平板、巧克力平板、血瓊脂平板等，標本接種后培養 18-24h，觀察菌落形態，采用全自動微生物鑒定儀 VITEK2 compact進行鑒定。②HPV-DNA檢測：采用美國高危HPV-DNA檢測試劑盒進行檢測，其為一種非放射性相對快速而且能同時檢測13種高危亞型HPV方法，檢測結果 RLU/CO>1.0pg/ml為HPV陽性，HPV 陰性為檢測結果 RLU/CO<1.0pg/ml。

1.3 統計學分析 將所有資料數據輸入 Microsoft Excel 工作表中，應用SPSS20.00軟件進行分析，計數數據采用百分比、率表示，計量數據選擇均數±標準差表示，對比方法為t檢驗與卡方分析，相關性分析采用直線相關分析，檢驗水準ɑ=0.05，P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 陰道細菌感染情況對比 觀察組中檢出陰道細菌78例，檢出率為52.0%，其中革蘭陰性菌60例，革蘭陽性菌18例，具體病原菌分布及構成比(見表2)。對照組中檢出陰道細菌70例，檢出率為46.7%，其中革蘭陰性菌55例，革蘭陽性菌15例，具體病原菌分布及構成比(見表3)。兩組陰道細菌感染檢出率對比差異無統計學意義(2=0.087,P>0.05)。

表2 78例宮頸癌患者陰道分泌物的病原菌分布及構成比Table 2 Distribution and proportion of pathogens in vaginal secretions of cervical cancer patients

表3 70例宮頸炎患者陰道分泌物的檢出分布及構成比Table 3 Detection distribution and ratio of vaginal secretions in patients with cervicitis

2.2 HPV-DNA檢測結果比較 觀察組中檢出HPV-DNA感染90例，陽性率60.0%；對照組中檢出HPV-DNA感染40例，陽性率26.7%，觀察組的HPV-DNA陽性率明顯高于對照組(P<0.05)，見表4。

表4兩組患者HPV-DNA檢測結果比較

Table4ComparisonofHPV-DNAbetweenthetwogroups

組別nHPV-DNA陽性HPV-DNA陽性率(×10-2)觀察組1509060.0對照組1504026.724.781P<0.05

2.3 HPV感染與陰道細菌感染的相關性 在觀察組中，HPV-DNA感染狀態與陰道細菌感染的結果差別無統計學意義(2=0.872，P>0.05)，見表5。

表5150例宮頸癌患者HPV感染與陰道細菌感染的相關性

Table5CorrelationbetweenHPVinfectionandvaginalbacterialinfectionincervicalcancerpatients

HPV-DNA狀況n陰道細菌感染[n,(×10-2)]陽性(n=78)陰性(n=72)陽性9048(53.3)42(46.7)陰性6030(50.0)30(50.0)20.872P>0.05

注：直線相關分析宮頸癌患者HPV感染與陰道細菌感染無明顯相關性(r=0.092,P>0.05)。

3 討論

宮頸癌在女性生殖系統中比較常見，雖然當前其發病率與死亡率有所下降，但是依然是當前女性最主要的惡性腫瘤之一[12]。我國是宮頸癌的高發國家 之一，特別是在城市的宮頸癌發病率和死亡率遠超過全國平均水平。宮頸癌發病的危險因素包括生物學因素、行為危險因素、遺傳易感性等，生物學因素主要為細菌、病毒和衣原體等各種微生物的感染等[13,14]。

HPV的持續感染是宮頸癌發生的主要原因，HPV基因可分為早期區(E區)，晚期區(L區)及非編碼區(LCR)；在所有已知HPV亞型中，約90-95%的HPV陽性腫瘤為高危[15，16]。為此通過檢測HPV來篩查宮頸感染易感人群，是預防宮頸癌發生的關鍵[17]。本研究顯示觀察組中檢出HPV-DNA感染90例，陽性率60.0%；對照組中檢出HPV-DNA感染40例，陽性率26.7%，觀察組的HPV-DNA陽性率明顯高于對照組(P<0.05)，也表明宮頸癌患者伴隨有HPV-DNA高陽性狀況。

健康女性生殖道內寄居著多種正常的微生物群落，可與機體、 環境之間構成了相互協調、制約、動態的微生態平衡體系。正常情況下在陰道菌群中，最主要的是以陽性乳酸桿菌為優勢菌群的微生態系統[18]。陽性乳酸菌有利于維持陰道酸性環境，可對自身宿主起占位性保護作用，而使外襲菌無法立足；陽性乳酸菌對宿主體液免疫和機體免疫有一定的影響，有利于防御外襲菌的侵入[19]。當因各種原因破壞生殖道微生態系統的菌群動態平衡時，可使得乳酸桿菌的減少或者造成生殖道菌群菌株的變化，從而導致宮頸疾病的發生[20]。本研究顯示觀察組中檢出陰道細菌78例，檢出率為52.0%，其中革蘭陰性菌60例，革蘭陽性菌18例；對照組中檢出陰道細菌70例，檢出率為46.7%，其中革蘭陰性菌55例，革蘭陽性菌15例，兩組陰道細菌感染檢出率對比差異無統計學意義(2=0.087,P<0.05)。也表明宮頸癌患者陰道分泌物致病菌檢出率較高，病原菌菌株多，革蘭陰性菌相對較多。從機制上分析，宮頸癌患者由于臨床癥狀表現為長期的不規則陰道流血，可造成免疫功能低下，導致陰道細菌感染[21，22]。

炎癥觸發癌癥這一觀點一直是醫學界的焦點， 除了 HPV-DNA病毒之外，陰道細菌感染是否是其協同因素之一值得探討[23]。特別是女性感染 HPV大多呈隱性感染，宮頸感染可發生在宮頸癌發生前及發展的早期階段，但是是否有宮頸癌的誘發因素還不明確。研究發現宮頸癌和癌前病變中宮頸局部細胞因子存在明顯變化，局部炎癥在宮頸癌發生過程中存在一定作用。合并陰道細菌感染者發生宮頸癌風險增加的機制還有局部炎癥可能導致局部組織化生，在腫瘤發生發展過程中發揮重要作用[24]。也有研究合并生殖道感染的患者宮頸癌發病風險顯著增加，可能增加HPV感染機會和HPV病毒載量[25]。

本研究顯示在觀察組中，HPV-DNA感染狀態與陰道細菌感染的結果差別無統計學意義(2=0.872，P>0.05)，直線相關分析宮頸癌患者HPV感染與陰道細菌感染無明顯相關性(r=0.092,P>0.05)。表明陰道細菌感染尚不足以作為HPV的協同因子促進宮頸癌的發生，將在下一步進行更系統和廣泛的調查研究，以進一步確定生殖道中細菌感染在HPV導致的宮頸癌中的作用。

4 結論

本文資料顯示，宮頸癌患者的HPV陽性率高于宮頸炎患者，且陰道分泌物中致病菌檢出率較高，革蘭陰性菌檢出率居首位。陰道細菌感染與HPV感染協同因素促進宮頸癌的發生還有待進一步研究。

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