酶聯免疫法與冷凝集試驗在小兒支原體肺炎感染診斷中的應用價值分析

湯成玉

摘 要：目的 分析小兒支原體肺炎感染采用酶聯免疫法與冷凝集試驗的診斷價值。方法 選取我院2015年3月～2017年3月收治的支氣管肺炎患兒100例作為此次研究對象，采取所有患兒清晨空腹靜脈血，離心取血清后，分別采用酶聯免疫法及冷凝集試驗檢測血清肺炎支原體抗體IgM水平，比較兩種檢測方法陽性檢出率，以支原體培養為診斷“金標準”，對兩種檢測方式的特異性、靈敏性、準確率、陽性預測值進行評估。結果 酶聯免疫法特異性90.75%較冷凝集試驗高，誤診率為9.26%較冷凝集試驗29.63%低，差異具有統計學意義（P<0.05）；酶聯免疫法敏感性84.78%低于冷凝集試驗97.83%，準確度88.00%，漏診率15.22%高于冷凝集試驗83.00%，2.17%，差異無統計學意義（P>0.05）。結論 酶聯免疫法與冷凝集試驗均各有優勢，其中冷凝集試驗敏感性高，漏診率低，酶聯免疫法特異度高、誤診率較低，故臨床可將兩者聯合檢測，以提升小兒支原體肺炎感染陽性檢出率，降低誤診及漏診率，臨床具有較高的應用價值。

關鍵詞：小兒肺炎支原體感染；酶聯免疫法；冷凝集試驗

中圖分類號：R446.44；R725.6 文獻標識碼：A DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2018.04.004

文章編號：1006-1959（2018）04-0010-03

Analysis of the Value of Enzyme-linked Immunosorbent Assay and Condensate Agglutination Test in the Diagnosis of Mycoplasma Pneumoniae Infection in Children

TANG Cheng-yu

（Department of Laboratory，Maternal and Child Health Hospital，Zhongxiang 431900，Hubei，China）

Abstract：Objective To analyze the diagnostic value of enzyme linked immunosorbent assay and condensate agglutination test for mycoplasma pneumonia infection in children.Methods In our hospital in March 2015 to March 2017，100 cases of children with bronchial pneumonia were selected as the research object，all the children had fasting venous blood in the early morning and centrifuged the serum，and then made a detection of serum mycoplasma pneumoniae antibody IgM level by enzyme-linked immunosorbent assay and condensation agglutination assay，the positive detection rate of the two methods was compared，and the specificity，sensitivity，accuracy and positive predictive value of the two methods were evaluated by using mycoplasma culture as the"gold standard"for diagnosis.Results The specificity of enzyme-linked immunosorbent assay 90.75% was higher than that of cold agglutination test，and the misdiagnosis rate 9.26% was lower than that of cold agglutination test 29.63%，the difference was statistically significant（P<0.05），the sensitivity of enzyme-linked immunosorbent assay was 84.78%，lower than that of cold agglutination test 97.83%，the accuracy rate was 88.00%，and the missed diagnosis rate 15.22% was higher than that of condensation test 83.00%，2.17%，the difference was not statistically significant（P>0.05）.Conclusion Enzyme-linked immunosorbent assay and condensate agglutination test have their respective advantages，among them，the condensation assay has high sensitivity，low missed diagnosis rate，high specificity and low misdiagnosis rate.In order to increase the positive rate of mycoplasma pneumonia in children and reduce the rate of misdiagnosis and missed diagnosis，it has a high clinical value.

Key words：Mycoplasma pneumoniae infection in children；Enzyme-linked immunosorbent assay；Condensate agglutination test

支原體肺炎（mycoplasma pneumonia，MP）是引起哮喘、支氣管炎及呼吸道感染等疾病常見的病原體，支原體介于病毒與細菌之間，主要生長于呼吸道上皮細胞中且可自主繁殖，可損傷細胞膜，對纖毛運動起到一定的抑制作用，最終引起感染[1]。近年來小兒支原體肺炎感染患病率呈逐年上升趨勢發展，且多見于兒童，起病較緩慢，病程持續時間長短不一，臨床癥狀表現為咳嗽、發燒等，由于與其他肺部感染癥狀較為相似，故容易出現漏診或誤診。若患兒不及時治療，可引起多器官功能障礙，嚴重時可致死[2]。因此，尋求一種高效的診斷方式來提高疾病檢出率，對改善患兒生存質量，降低病死率均有重要意義[3]。既往臨床通常采用以支原體培養為診斷“金標準”，但其操作方式較為復雜且檢測所需時間較長，部分醫院難以開展，因此尋求一種操作方便、高效的檢測方式尤為重要[4]。本研究選取我院2015年3月～2017年3月收治的100例支氣管肺炎患兒為研究對象，分別采用酶聯免疫法及冷凝集試驗檢測血清肺炎支原體抗體IgM（MP-IgM）水平，進一步探究酶聯免疫法與冷凝集試驗在小兒支原體肺炎感染診斷中的應用價值，旨在為臨床診斷疾病提供方法和經驗，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2015年3月～2017年3月收治的支氣管肺炎患兒100例，其中男性53例，女性47例；年齡2～13歲，平均年齡（6.12±2.15）歲；其中2～5歲48例，6～13歲52例。本研究經本院倫理委員會批準通過。納入標準：①臨床均有發熱、食欲下降、呼吸困難、刺激性咳嗽等癥狀，肺部X線檢查可見絮狀陰影；②患兒家屬對研究內容知情，并簽署知情同意書。排除標準：①患兒合并先天性心、腎、肝等臟器器官疾??；②其他病因導致的肺炎感染。

1.2 方法 患兒均同時進行支原體分離培養：采取患兒痰液、鼻咽下拭子或支氣管分泌物，將其放置培養基中，含有足量的新鮮酵母及血清浸出液，將其放置于37 ℃環境下培養5 d后，觀察記錄菌落。采取所有患兒清晨空腹靜脈血3 ml，以3500 r/min離心15 min后取血清，將其放置在-20 ℃冰箱內冷藏備測，采用酶聯免疫吸附試驗（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測血清支原體抗體（MP-IgM）水平，試劑盒由深圳安群生物技術有限公司提供，操作過程嚴格遵守試劑盒操作說明，當滴度>1：80則為陽性。此外，采用冷凝集試驗血清MP-IgM水平，將致敏離子和未致敏粒子加入血清中，將其充分搖勻后，采用深圳安群生物技術有限公司提供的配套試劑盒檢測MP-IgM水平，操作過程嚴格遵守試劑盒操作說明，當滴度≥1：64時，則為陽性。

1.3觀察指標 記錄兩種檢測方法陽性、陰性檢出率，以支原體培養為診斷“金標準”分析兩種檢測方式的特異性、靈敏性、準確率、陽性預測值進行評估。

1.4 統計學方法 采用SPSS19.0統計學軟件，計數資料以[n（%）]表示，組間比較采用？字2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

酶聯免疫法特異性90.75%較冷凝集試驗高，誤診率為9.26%較冷凝集試驗29.63%低，差異具有統計學意義（P<0.05）；酶聯免疫法敏感性84.78%略低于冷凝集試驗97.83%，準確度88.00%，漏診率15.22%，略高于冷凝集試驗準確度83.00%，漏診率2.17%，差異無統計學意義（P>0.05），見表1、表2。

3討論

肺炎支原體是誘發支原體肺炎感染的關鍵病毒，是一種獨立存活在細胞外的最小微生物，臨床發病機制尚未完全表達清楚[5]。小兒肺炎支原體感染具有較高的患病率，早期病情較為隱匿，且臨床癥狀缺乏特異性，進而增加疾病誤診及漏診率[6]。此外，還可導致臨床抗生素的濫用、錯用，加之病情反復發作，引發患兒免疫系統、中樞神經系統等并發癥，嚴重危害患兒生長發育[7]。因此早期診斷疾病，并給予其相應的治療對提高患兒生存質量具有重要意義[8]。

目前臨床診斷疾病的方法較多，包括酶聯免疫法、冷凝集試驗、支原體培養、免疫熒光法等，其中支原體培養被臨床視為診斷小兒肺炎支原體感染“金標準”，臨床雖具有較高的檢出率，但其實驗難度較大，操作過程繁雜且檢測時間較長，不能快速的得出檢測結果，且部分醫院難以實行，故而臨床推廣難度較大[9]。因此采用高效、操作方便、快速準確的診斷方式對臨床治療尤為重要。近年來隨著臨床不斷的研究，發現血清抗MP-IgM是患兒發病后機體內出現最早的特異性抗體，發病1周后出現，且在3～4周內可達到最高峰，由于早期病情較為隱匿，當患兒到院就診時絕大多數患兒體內已出現血清抗MP-IgM，因此早期檢測MP-IgM對疾病的檢出率尤為重要。臨床將冷凝集試驗視為檢測肺炎支原體感染一種傳統輔助檢測方式之一，具有較高的敏感性且漏診率較低，但臨床診斷過程中往往被誤診為其他病原體感染，因此單獨采用冷凝集試驗易增加疾病誤診率。酶聯免疫法是臨床輔助檢查另一重要檢測方式，不受患兒自身免疫應答影響，具有較高的特異性，且誤診率較低，被臨床廣泛應用。兩種檢測方式操作均較為簡便，且檢測結果較快，可為臨床治療爭取更多時間。本研究結果顯示，酶聯免疫法特異性90.75%較冷凝集試驗高，誤診率為9.26%較冷凝集試驗29.63%低，差異具有統計學意義（P<0.05）；酶聯免疫法敏感性84.78%低于冷凝集試驗97.83%，準確度88.00%，漏診率15.22%高于冷凝集試驗83.00%，2.17%，差異無統計學意義（P>0.05）。結果提示，兩種方法均可檢測小兒肺炎支原體感染，但臨床均會出現誤診及漏診情況。因此，臨床檢測可將兩種方式聯合進行檢測，進而提高臨床疾病檢出率，降低疾病漏診及誤診率，為臨床治療提供依據。

綜上所述，酶聯免疫法與冷凝集試驗均各有優勢，冷凝集試驗敏感性高，漏診率低，酶聯免疫法特異度高、誤診率較低，故臨床可將二者聯合檢測，以提升小兒肺炎支原體感染陽性檢出率，降低誤診及漏診率，臨床具有較高的應用價值。

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收稿日期：2017-12-18；修回日期：2017-12-21

編輯/雷華