不同開口餌料對(duì)山區(qū)全人工繁殖雜交鱘生長(zhǎng)發(fā)育的影響

王艷艷， 趙 飛， 白 璐， 劉 霆， 曾 圣， 杜 強(qiáng)

(貴州省水產(chǎn)研究所，貴州貴陽 550025)

鱘魚(AcipensersturioLinnaeus)隸屬于硬骨魚綱(Osteichthyes)輻鰭亞綱(Actinopterygii)軟骨硬鱗總目(Chondrostei)鱘形目(Acipenseriformes)，是現(xiàn)存最古老的脊椎動(dòng)物之一，也是受廣大消費(fèi)者青睞的名貴水產(chǎn)品[1]。隨著天然資源數(shù)量與市場(chǎng)需求差距日漸增大[2-3]，鱘魚養(yǎng)殖業(yè)迅速發(fā)展[4-6]。貴州地下水年排泄量259億m3，此外，全省水庫、河流眾多，水質(zhì)良好，給鱘魚的養(yǎng)殖生產(chǎn)提供了良好的條件[7]。為此，1999年貴州開始引進(jìn)俄羅斯鱘進(jìn)行馴化養(yǎng)殖，并陸續(xù)向全省范圍推廣。目前，鱘魚已成為貴州冷水魚主要養(yǎng)殖品種，其產(chǎn)量占全省冷水魚產(chǎn)量的90%以上[8]。然而，鱘魚性成熟晚、繁殖周期長(zhǎng)，雌魚產(chǎn)卵間隔在1～6年[9]，致使鱘魚苗種及受精卵多從省外或國外購買，極大地制約了鱘魚產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。

仔魚開口培育階段(即由內(nèi)源營養(yǎng)向外源營養(yǎng)轉(zhuǎn)化的階段)是魚類早期生活史中的關(guān)鍵時(shí)期[10]，也是鱘魚養(yǎng)殖過程中死亡率高的重要臨界期[11]。開口餌料是決定仔魚順利實(shí)現(xiàn)初次攝食的主要因素，也是影響仔魚生長(zhǎng)、存活的關(guān)鍵因子，選擇恰當(dāng)?shù)臅r(shí)間投喂合適的餌料，可明顯提高苗種的成活率[12]。仔魚開口期生長(zhǎng)的細(xì)微差別對(duì)其存活以及整個(gè)生活史階段的生長(zhǎng)都有著重要的影響[13]。因此，開口餌料的選擇及其投喂技術(shù)已成為魚類早期生活史研究的主要內(nèi)容之一[14]。國內(nèi)外學(xué)者就不同餌料[15-16]、初次投喂時(shí)間[17]、投喂頻率和投餌率[18]等對(duì)鱘魚仔魚生長(zhǎng)發(fā)育的影響進(jìn)行了研究。

消化酶活力是反映魚類消化生理狀況和對(duì)各種營養(yǎng)物質(zhì)利用的重要指標(biāo)[19]。國內(nèi)外學(xué)者對(duì)鱘魚投喂頻率[20]、不同餌料對(duì)鱘魚仔魚生長(zhǎng)發(fā)育與消化酶活性[12]、鱘魚消化酶的活性與分布[21-22]進(jìn)行了報(bào)道，但對(duì)鱘魚苗種不同開口期消化酶情況及餌料種類的選擇和對(duì)生長(zhǎng)發(fā)育的影響報(bào)道較少。本研究探討了鱘魚苗種不同發(fā)育時(shí)期消耗酶活力及不同餌料對(duì)雜交鱘仔魚生長(zhǎng)發(fā)育的影響，以期了解不同發(fā)育時(shí)期雜交鱘消化酶活性情況，為提高雜交鱘仔魚對(duì)餌料的消化利用率提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，為雜交鱘在苗種培育階段餌料的選擇提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)魚及分組

1.2 餌料種類與投喂方法

本試驗(yàn)分為熟蛋黃、輪蟲、人工配合顆粒飼料、水絲蚓4種餌料。其中熟蛋黃溶水后經(jīng)200目篩絹過濾后投喂；輪蟲為自己擴(kuò)繁蟲(密度約100 ind./L)；水絲蚓購自花鳥市場(chǎng)，暫養(yǎng)7 d以上，投喂前用1%～3%食鹽水浸泡10 min，打漿投喂；人工配合飼料為鱘魚專用微粒飼料，用水泡成漿狀投喂。

1.3 試驗(yàn)過程及管理

每2 h觀察1次，查看有無死亡，及時(shí)撈出死魚并對(duì)其計(jì)數(shù)。日投餌量保持在魚體質(zhì)量的100%；每2 h投喂1次，每次投喂時(shí)間控制在0.5 h以內(nèi)，投喂結(jié)束后用虹吸管清除箱底殘餌糞便。試驗(yàn)過程中保持水質(zhì)清新，每天換1/3養(yǎng)殖用水。

1.4 指標(biāo)的測(cè)定

1.4.1 生長(zhǎng)指標(biāo)的檢測(cè) 分別在試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)隨機(jī)抽取20尾測(cè)量各組仔魚的體長(zhǎng)、體質(zhì)量，每天記錄各組仔魚的死亡情況。計(jì)算公式如下：

1.4.2 粗酶液的制定 選取1日齡仔魚、4日齡仔魚和10日齡仔魚樣品，用濾紙吸干水分后放入1.5 mL離心管中，置于-80 ℃冰箱保存。

將樣品加入10倍體積(m/V)預(yù)冷重蒸水，在玻璃勻漿器中冰浴勻漿，9 000～10 000 r/min冷凍離心30 min，上層為油層，下層為沉淀，小心取中間層，3 000 r/min再次離心后取上清液進(jìn)行消化酶活性的測(cè)定。酶液置于4 ℃冰箱保存?zhèn)溆茫?4 h內(nèi)分析完畢。

1.5 測(cè)定項(xiàng)目及方法

1.5.1 餌料基本營養(yǎng)成分的測(cè)定 不同餌料中水分含量參照GB/T 5009.3—2003方法進(jìn)行測(cè)定，粗蛋白質(zhì)含量參照GB/T 5009.5—2003方法進(jìn)行測(cè)定，粗脂肪含量參照GB/T 5009.6—2003方法進(jìn)行測(cè)定，粗灰分含量參照GB/T 5009.4—2003方法進(jìn)行測(cè)定，粗纖維含量參照GB/T 5009.10—2003方法進(jìn)行測(cè)定。

1.5.2 消化酶活性的測(cè)定 胰蛋白酶、胃蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶活性含量采用南京建成生物技術(shù)公司測(cè)試盒測(cè)定。蛋白含量采用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析，用LSD多重比較分析試驗(yàn)結(jié)果的差異顯著性，當(dāng)P<0.05時(shí)為差異顯著，P>0.05時(shí)為差異不顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同餌料的一般營養(yǎng)成分

由表1可知，3種餌料一般營養(yǎng)成分存在較大差異。水絲蚓、熟蛋黃水分含量較高[含量分別為(83.40±1.40)%、(50.47±0.47)%]，粗蛋白質(zhì)含量較低[含量分別為(8.20±0.18)%、(15.82±0.33)%]，但熟蛋黃粗蛋白質(zhì)的含量顯著高于水絲蚓；人工配合飼料粗蛋白含量較高，為(45.15±0.94)%，除人工配合飼料外其他2種餌料均未檢出粗纖維。

表1 不同餌料一般營養(yǎng)成分的含量 %

注：同一列數(shù)據(jù)上標(biāo)字母相同者表示差異不顯著(P>0.05)；小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05)。

2.2 不同開口餌料對(duì)雜交鱘仔魚生長(zhǎng)及成活率的影響

由表2可見，投喂水絲蚓組末體質(zhì)量最高，為(0.052±0.01)g，其次是投喂人工配合飼料組，為(0.047±0.00)g，投喂輪蟲和投喂熟蛋黃組的末體質(zhì)量無顯著差異(P>0.05)，且顯著低于投喂人工配合飼料和水絲蚓組(P<0.05)。投喂水絲蚓組的末體長(zhǎng)最大，為(2.17±0.08)cm，顯著高于其他投喂組(P<0.05)，投喂人工配合飼料、輪蟲和熟蛋黃組末體長(zhǎng)無顯著差異(P>0.05)。投喂水絲蚓組成活率為72%，投喂人工配合飼料和熟蛋黃開口組成活率均為60%，投喂輪蟲組成活率最低，為49%。

表2 不同開口餌料對(duì)雜交鱘仔魚生長(zhǎng)及成活率的影響

注：同列數(shù)據(jù)后；不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

2.3 不同開口餌料對(duì)雜交鱘魚生長(zhǎng)性能的影響

由表3可知，投喂水絲蚓組的特定生長(zhǎng)率最高，為8.0%，其次是投喂人工配合飼料組，為5.5%；投喂輪蟲組和熟蛋黃組特定生長(zhǎng)率較低(分別為2.8%和1.8%)。投喂水絲蚓組的增質(zhì)量率最高，為52.9%，其次是投喂人工配合飼料組，為38.2%，投喂輪蟲組和熟蛋黃組較低(分別為17.6%和11.8%)。投喂人工配合飼料組肥滿度最高，為0.60%，其次為投喂熟蛋黃組、水絲蚓組和輪蟲組(分別為0.52%、0.51%和0.49%)。

2.4 雜交鱘仔魚不同發(fā)育時(shí)期消化酶活性

由表4可知，孵化初期，4種消化酶活性均較低，隨著不斷生長(zhǎng)發(fā)育，4種消化酶活性逐漸升高。同一發(fā)育期，脂肪酶活性均顯著低于其他3種消化酶(P<0.05)，蛋白酶(胃蛋白酶和胰蛋白酶)活性顯著高于脂肪酶和淀粉酶活性(P<0.05)。

表3 不同開口餌料對(duì)雜交鱘仔魚生長(zhǎng)性能的影響

表4 不同發(fā)育時(shí)期消化酶活性 U/mg prot

注：同列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)。同行后不同大寫字母表示差異顯著(P<0.05)。

3 討論

魚類早期發(fā)育過程中，其消化系統(tǒng)尚不成熟，仔魚在卵黃期其消化系統(tǒng)的酶活性非常低，主要由內(nèi)源性營養(yǎng)維持，隨著消化系統(tǒng)的發(fā)育，一些酶類伴隨著外源性營養(yǎng)的吸收開始合成[28]。試驗(yàn)結(jié)果顯示，孵化初期，仔魚胃蛋白酶、胰蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性均很低，可見開口期消化酶活性弱是造成該時(shí)期死亡率高的重要原因之一[19]。孵化早期，仔魚消化能力較低，雖然攝食量少，但在投喂時(shí)，餌料的量要充足。

4 結(jié)論

孵化早期，雜交鱘消化能力低，開口時(shí)宜選擇易被雜交鱘仔魚消化的餌料，以水絲蚓作為開口餌料效果較好。飼養(yǎng)管理時(shí)，適當(dāng)減少單次投喂量，并增加投喂次數(shù)，隨著仔魚規(guī)格的增大，消化能力的增強(qiáng)，適當(dāng)調(diào)整投喂量及投喂次數(shù)。配合飼料也可以作為雜交鱘仔魚開口餌料。

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