無乳鏈球菌臨床分布情況和藥敏結果分析

卓麗文 曾小瓊

無乳鏈球菌亦可稱為 B族鏈球菌（group B streptococcus,GBS），常寄生于健康人的下消化道及泌尿生殖道，是新生兒及孕婦圍產期感染的重要病原體。GBS是一種條件致病菌，可引發孕婦的菌血癥、羊膜炎、切口感染等，與早產、胎膜早破及新生兒敗血癥密切相關[1]。為了解GBS在醫院病區的分布及藥敏情況，提升醫院對 GBS感染的防治水平，本文分析了河源市婦幼保健院近年來 GBS的標本類別、臨床分布情況及抗生素敏感情況，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料分析河源市婦幼保健院2015年1月至2017年12月門診就診及病房住院患者細菌培養分離的GBS菌株480例為研究對象，其中2015年度GBS菌株139份，2016年度GBS標本163份，2017年度GBS標本178份，剔除同一患者重復部位分離的相同菌株。

1.2 試劑與儀器法國梅里埃生產的 ATB 1525 EXPRESSION半自動細菌鑒定儀器鑒定、上海三申二氧化碳培養箱、生化培養箱（上海一恒科公司），質控菌株：肺炎鏈球菌ATCC 49619。

1.3 藥敏試驗細菌鑒定采用法國生產的 RAPID ID32 STREP板條，抗菌藥物最低抑菌濃度（MIC）藥敏采用法國生產的ATB STREP（CLSI）板條，均經ATB 1525 EXPRESSION半自動細菌鑒定儀器鑒定。紙片擴散（K-B）法藥敏試驗采用江門凱琳M-H平板，采用英國OXOID藥敏紙片。取培養好的菌落用0.85%氯化鈉 Medium配至0.5個麥氏濃度，無菌棉簽蘸取菌液，試管壁上擠壓 3～5次，壓去多余菌液，棉簽均勻涂布整個培養基表面，室溫中靜置15 min，然后貼上抗生素藥敏紙片。采用K-B法測定 GBS對臨床常見的抗生素藥敏情況，判斷參照 2016年美國臨床實驗室標準化協會（CLSI）標準[2]。

1.4 統計學分析采用 SPSS 17.0統計軟件進行數據分析，計數資料采用百分率表示，采用χ2、fisher精確概率法，以P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 標本來源分布480份GBS標本來源于血液、陰道分泌物、會陰切口分泌物、胎盤口鼻、咽拭子，占比分別為 18.96%、34.17%、3.74%、30.00%、13.12%。見表1。

2.2 標本病區分布2015—2017年度產科、新生兒科為GBS標本分布最多的臨床科室，2017年度新生兒科的GBS標本占比顯著高于2015年度（P＜0.05）。見表2。

表1 480份GBS標本來源分布

表2 2015—2017年度480份GBS標本病區分布情況

2.3 GBS對常見抗生素的藥敏試驗GBS藥敏試驗顯示，耐藥最高的為四環素，3年最高耐藥率為93.53%，耐藥最低為頭孢噻肟，最低耐藥率為1.12%，其次為頭孢吡肟，最低耐藥率為2.25%。頭孢曲松、頭孢他啶、環丙沙星、加替沙星、左氧氟沙星呈現逐年上升趨勢（P＜0.05）；慶大霉素、妥布霉素、青霉素耐藥率呈現逐年下降趨勢（P＜0.05）。其余常見抗生素耐藥率則呈現波動態勢。見表3。

表3 2015—2017年度480份GBS標本對常見抗生素的耐藥分布情況

3 討論

GBS是β溶血的革蘭陰性鏈球菌中重要的一種，長期以來 GBS圍生期感染得到廣泛關注。報道[3]顯示，歐美育齡婦女GBS攜帶率為10.0%～35.0%，活產新生兒GBS的感染率為0‰～0.36‰，死亡率約為15%。GBS寄生于人類泌尿生殖道及下消化道，攜帶者無癥狀，孕期免疫功能下降后，GBS可經產道上行感染胎膜及子宮，易引發胎兒發育不全、胎膜早破、晚期流產，亦可導致子宮內膜炎、泌尿道感染等。GBS致病能力與其編碼的多種致病因子密切相關，Firon A等[4]將GBS分為10種血清分型，其中Ⅰa、Ⅰb、Ⅱ、Ⅲ和Ⅴ為主要致病血清型，Ⅲ型則含有較多的神經氨酸酶及脂磷壁酸，Ⅳ～Ⅸ型致病機制尚未完全明確。流行病學報道顯示，GBS血清以Ⅲ型為主，占比約為60.0%。Lu B等[5]對北京2850例孕晚期孕婦檢測后發現，GBS攜帶率為7.1%，血清型主要為Ⅲ、Ⅰa、Ⅴ型。

GBS標本來源豐富，本組480份GBS標本來源于血液、陰道分泌物、會陰切口分泌物、胎盤口鼻、咽拭子，占比分別為18.96%、34.17%、3.74%、30.00%、13.12%。GBS培養要求較高，應采用選擇性培養基行母體GBS篩查，篩查過程中規范標本采集及運輸，同時加強GBS的血瓊脂平板培養，并由經驗豐富的檢驗醫師對菌落進行鑒別及細菌鑒定，明確GBS菌落。本研究結果顯示2015—2017年度產科、新生兒科為GBS標本分布最多的臨床科室，2017年度新生兒科的GBS標本占比顯著高于2015年度。說明產科、新生兒科是GBS標本的主要來源科室，且該院 GBS標本在新生兒科呈逐年上升趨勢。由于GBS垂直傳播的特點，分娩期易感染新生兒，引發新生兒肺炎、腦膜炎、敗血癥等疾病，因而應加強對孕晚期婦女陰道分泌物及直腸分泌物的GBS培養篩查，避免GBS感染可能帶來的母嬰嚴重后果。歐美國家鑒于GBS圍生期感染帶來的嚴重不良妊娠結局，疾病控制與預防中心（CDC）[6]指南（2010）建議對高危因素或篩查陽性的孕晚期婦女使用預防性抗菌素處理，首選青霉素G500萬U，而后每日以250～300萬/U于4 h內滴注完畢直至分娩，效果良好。

GBS感染后待血培養結果出來后采用抗生素進行處理，往往較晚，耽誤病情，易導致病情進展，增加預后不良風險，因而美國臨床實驗室標準委員會（CLSI）[7]推薦對 GBS感染后無需實施藥敏實驗，可經驗性的采用青霉素類預先處理。本研究對GBS藥敏實驗結果顯示，耐藥最高的為四環素，最高耐藥率 93.53%，耐藥最低為頭孢噻肟，最低耐藥率為 1.12%，其次為頭孢吡肟，最低耐藥率為2.25%。提示GBS對四環素的耐藥性日趨嚴重，不大適合 GBS的經驗性抗菌治療；頭孢噻肟、頭孢吡肟耐藥率低，臨床上可以使用，但其作為廣譜抗生素，大量應用后可導致菌群失調。盡管 GBS對多數抗生素較為敏感，但可能對部分抗生素的耐藥性則呈現逐年上升趨勢，本研究顯示 GBS對頭孢曲松、頭孢他啶、環丙沙星、加替沙星、左氧氟沙星在 2015—2017年度的耐藥性明顯上升，這可能與上述抗生素臨床應用增加導致 GBS耐藥性上升有關，環丙沙星、左氧氟沙星影響新生兒軟骨發育，因此孕婦和新生兒應避免使用[8-9]。本研究還發現，慶大霉素、妥布霉素、青霉素耐藥率呈現逐年下降趨勢，青霉素抗菌譜廣、副作用小，可作為 GBS感染的首選抗生素，但使用前需做過敏試驗，針對過敏的患者可選擇慶大霉素、妥布霉素作為抗菌的替代方案。

綜上所述，該院 GBS臨床科室分布以產科、新生兒科及泌尿外科為，新生兒科則呈現逐年上升趨勢；隨著抗生素的廣泛應用，GBS的耐藥菌譜產生較大的變化，給臨床抗感染治療帶來較大的挑戰，及時監測本地區的 GBS抗生素耐藥情況，有助于提升經驗性用藥的準確率，對提升合理用藥有積極意義。

[1]Capanna F,Emonet SP,Cherkaoui A,et al.Antibiotic resistance patterns among group B Streptococcus isolates:implications for antibiotic prophylaxis for early-onset neonatal sepsis[J].Swiss med wkly,2013(143):w13778.

[2]DiPersio LP,DiPersio JR,Beach JA,et al.Identification and characterization of plasmid-borne erm (T) macrolide resistance in group B and group A Streptococcus[J].Diagn microbiol Infect Dis,2011,71(3):217-223.

[3]Edmond KM,Kortsalioudaki C,Scott S,et al.Group B streptococcal disease in infants aged younger than 3 months: systematic review and meta-analysis[J].Lancet,2012,379(9815):547-556.

[4]Firon A,Dinis M,Raynal B,et al.Extracellular nucleotide catabolism by the Group B Streptococcus ectonucleotidase NudP increases bacterial survival in blood[J].J Biol Chem,2014,289(9):5479-5489.

[5]Lu B,Li D,Cui Y,et al.Epidemiology of Group B streptococcus isolated from pregnant women in Beijing,China[J].Clin Microbiol Infect,2014,20(6):370-373

[6]Verani JR,McGee L,Schrag SJ,et al.Prevention of perinatal group B streptococcal disease-revised guidelines from CDC,2010[J].MMWR Recomm Rep,2010,59(RR-10):1-36.

[7]CLSI.Performance standards for antimicrobial susceptibility testing[S]. Twentieth informational supplement.M100-S21,2011:93-95.

[8]鐘匯,成玲,邱華紅.254株無乳鏈球菌的臨床分布和藥敏分析[J].海峽藥學,2013,25(7):167-168.

[9]伍彬.左氧氟沙星臨床應用研究進展[J].中國藥業,2010,19(3):61-63.