注射用丹參多酚酸鹽成品輸液的穩定性

吳妍，耿魁魁，史天陸，劉圣

(安徽省立醫院藥劑科，安徽 合肥 230001)

注射用丹參多酚酸鹽由中藥丹參提取，其主要活性成分為水溶性化合物丹參乙酸鎂[1-2]。有通脈、活血、化瘀的作用，用于治療冠心病穩定型心絞痛，癥見胸痛、胸悶、心悸者。臨床常用量為一次200 mg，溶于5%葡萄糖注射液或0.9%氯化鈉注射液250 mL中，一日一次，符合藥品說明書的要求。因心功能不全患者靜脈輸注0.9%氯化鈉注射液可能會引起水鈉潴留，導致血容量增加，心臟負荷增大，故用藥時首選5%葡萄糖注射液作為注射用丹參多酚酸鹽的稀釋溶媒。但是，當此類患者合并糖尿病或需控制血糖時，臨床傾向于將注射用丹參多酚酸鹽與胰島素混合調配于5%葡萄糖注射液中，以抵消溶媒中所含糖對患者血糖的影響[3-4]。故以上3種調配方式構成了臨床上注射用丹參多酚酸鹽成品輸液的最常見處方組成。課題組前期已通過正交實驗法優選出注射用丹參多酚酸鹽凍干粉的溶媒類型、溶媒量、震蕩時間及強度，優化了濃溶液的調配工藝[5]。同時，采用高效液相色譜紫外檢測法(HPLC-UV)建立了快速測定注射用丹參多酚酸鹽中丹參酸B含量的方法[6]。基于此，本課題組擬進一步探討注射用丹參多酚酸鹽3種臨床常用成品輸液在0～8 h穩定性變化，旨在進一步規范注射用丹參多酚酸鹽成品輸液調配，減少不合理操作所致不良事件的風險，提高成品輸液質量。

1 材料與方法

1.1材料與儀器

1.1.1藥品與試劑 丹酚酸B對照品(上海源葉生物科技有限公司，CAS#：115939-25-8，規格20 mg，純度≥98%)；注射用丹參多酚酸鹽(上海綠谷制藥有限公司，生產批號14040718，規格100 mg)；胰島素注射液(江蘇萬邦生化醫藥股份有限公司，生產批號21509211，規格10 mL：400 U)；5%葡萄糖注射液(生產批號12122098，規格 250 mL)、0.9%氯化鈉注射液(生產批號14072395)，均由安徽豐原藥業股份有限公司提供；甲醇、乙腈均為色譜純，甲酸為分析純，水為純化水。

1.1.2儀器 LC-2010A HT島津高效液相色譜儀(紫外檢測器，四元低壓泵，自動進樣器，LabSolutions Version 5.51色譜工作站)；FA2004B電子天平(上海精科天美科學儀器有限公司)；電子pH計(上海雷磁儀器廠，PHS-3C型)；微粒分析儀(天河醫療儀器有限公司，GWF-5JS型)，振蕩器(江蘇康健醫療用品有限公司，KJ-202型)。

1.2方法

1.2.1空白對照液制備 分別取250 mL的5%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液和混合了4 U胰島素的5%葡萄糖注射液作為空白對照液。

1.2.2成品輸液配制 模擬臨床用藥濃度(0.8 g·L-1)，分別將注射用丹參多酚酸鹽200 mg稀釋于3種空白對照液中各2份，于室溫(25 ℃)和冷藏(4 ℃)保存備用。

1.2.3成品輸液含量測定 采用課題組前期已建立的HPLC法[6]進行丹酚酸B含量的檢測。

1.2.4成品輸液pH值及不溶性微粒數檢測 依據2015版《中國藥典》四部通則0631 pH值測定法和0903不溶性微粒檢查第一法，在室溫(25 ℃)條件下分別測定3種空白對照液及3種成品輸液的pH值及不溶性微粒數。

2 結果

2.1丹酚酸B含量測定分別取室溫和冷藏保存的3種成品輸液，采用HPLC-UV法于0 h、2 h、4 h、6 h、8 h進樣，測定有效成分丹酚酸B的峰面積，據此計算各時間點有效成分的相對含量，見表1。

表1 室溫(25 ℃)和冷藏(4 ℃)條件下丹酚酸B的含量變化

含量測定結果顯示，注射用丹參多酚酸鹽經0.9%氯化鈉注射液和5%葡萄糖注射液溶解的成品輸液8 h內丹酚酸B含量變化小于10%，但經已加入4 U胰島素的5%葡萄糖注射液溶解后的成品輸液丹酚酸B含量2 h內下降已超過10%。

2.2成品輸液外觀、pH值及不溶性微粒檢測

2.2.1外觀觀察 各成品輸液在室溫和冷處放置8 h內外觀均顯示淡黃色，無渾濁、沉淀及氣泡生成。

2.2.2pH值檢測 經測定，3種空白對照液及其成品輸液0 h、2 h、4 h、6 h、8 h的pH值結果見圖1。

圖1 室溫(25 ℃)和冷藏(4 ℃)條件下pH值變化

pH值變化趨勢圖顯示，已加入4 U胰島素的5%葡萄糖注射液溶解后的成品輸液，無論室溫或冷藏保存，2 h內pH值均超過6。

2.2.3不溶性微粒檢測 經測定，3種空白對照液及其成品輸液0 h、2 h、4 h、pH值變化趨勢圖顯示，已加入4 U胰島素的5%葡萄糖注射液溶解后的成品輸液，無論室溫或冷藏保存，2 h內pH值均超過6。

2.2.4不溶性微粒檢測 經測定，3種空白對照液及其成品輸液0 h、2 h、4 h、6 h、8 h的不溶性微粒數，結果見圖2。

不溶性微粒數變化趨勢圖顯示，在冷處保存的3種成品輸液各時間段內不溶性微粒的數量均較室溫明顯增加，例如：在冷處，使用0.9%氯化鈉注射液稀釋后的成品輸液，6 h后不溶性微粒的數量超出規定范圍(≥10 μm微粒數超過25個/毫升，≥25 μm微粒數超過3個/毫升)；而5%葡萄糖注射液稀釋后的成品輸液，2 h內不溶性微粒的數量超出規定范圍。此外，經已加入4 U胰島素的5%葡萄糖注射液溶解后的成品輸液即刻不溶性微粒的數量超出規定范圍。

3 討論

研究[7-9]顯示注射用丹參多酚酸鹽主要活性成分可能通過激活抗凋亡通路及減弱細胞的凋亡通路，從而減少高血糖引起的氧化應激和內皮功能紊亂，修復胰腺β細胞，同時對糖尿病心肌病也產生保護作用。多項關于注射用丹參多酚酸鹽在糖尿病患者中的臨床應用研究[4,10]均發現糖尿病患者用藥后相關臨床指標明顯改善，且選用5%葡萄糖注射液作為稀釋溶媒時，注入一定單位的胰島素可以抵消溶媒中所含糖對患者血糖的影響，因而注射用丹參多酚酸鹽與胰島素同瓶滴注的現象在臨床普遍存在，但目前尚無丹參多酚酸鹽與胰島素存在配伍禁忌的報道。因靜脈輸液中大于10%的藥物有效成分被分解，則認為該藥物與輸液不宜配伍[11]。本實驗含量測定結果顯示，注射用丹參多酚酸鹽與0.9%氯化鈉注射液配伍穩定性良好，與5%葡萄糖注射液配伍穩定性次之，在5%葡萄糖注射液輸液中加入4 U胰島素后，2 h內丹酚酸B含量下降超過10%。此外，注射用丹參多酚酸鹽廠家質量標準規定的pH值范圍為4～6，且《中國藥典》(2015年版)規定[12]標示裝量≥100 mL靜脈注射液，除另有規定外，≥10 μm微粒不得超過25個/毫升，≥25 μm微粒不得超過3個/毫升。本研究中，注射用丹參多酚酸鹽與胰島素混合調配的成品輸液pH值及不溶性微粒的數量均超出規定范圍。提示臨床注射用丹參多酚酸鹽與胰島素存在配伍禁忌，不可同瓶滴注。

成品輸液丹酚酸B含量變化與同時間內pH值及不溶性微粒數的增加趨勢相符，可能的原因是，注射液丹參多酚酸鹽作為中藥注射液，其所含生物堿、氨基酸、皂苷等成分以及一些沒有被除盡的雜質與輸液配伍后，會隨著時間的延長pH值不斷增高，pH值的改變導致不溶性微粒增多，藥品有效成分的含量逐漸降低，從而影響到成品輸液的穩定性與質量[13-14]。此外，溫度也可能通過影響不溶性微粒數影響到成品輸液穩定性。在4 ℃保存條件下，注射用丹參多酚酸成品輸液各時間段內不溶性微粒數均較室溫明顯增多，甚至超出規定范圍，原因在于，低溫能促使溶液中大分子物質聚集增多，藥物的溶解度下降，不溶性微粒數增加，而5%葡萄糖注射液的粘度較0.9%氯化鈉注射液大，更加速了大分子物質的聚集，所以不溶性微粒數在5%葡萄糖注射液中增加更為明顯，該現象與其他研究結果相符[15-16]，故不推薦5%葡萄糖注射液稀釋后的注射用丹參多酚酸鹽成品輸液在冷處保存。

總之，注射用丹參多酚酸鹽臨床常用的3種成品輸液0～8 h穩定性考察結果提示，臨床不可將其與胰島素同瓶混合調配；經5%葡萄糖注射液和0.9%氯化鈉注射液稀釋的成品輸液于室溫可保存8 h；但在冷藏條件下，建議采用0.9%氯化鈉注射液稀釋后的成品輸液保存不得超過6 h，采用5%葡萄糖注射液稀釋后的成品輸液保存不得超過2 h。

[1] 趙業清,朱慧娟,文九芳.丹參多酚酸鹽注射液治療冠心病心絞痛的系統評價[J].現代中西醫結合雜志,2012,21(16):1722-1724,1726.

[2] 趙瓊，任大偉，楊瑞花，等.丹參不同產地加工方法對丹參多酚酸鹽質量的影響[J].中華中醫藥雜志，2013，28(3)：645-648.

[3] 呂世文，郭佳奕，朱亞蘭.三級甲等醫院注射用丹參多酚酸鹽使用情況分析[J].中國醫藥導報，2014，11(36)：96-99.

[4] 周忻，郭代紅，朱曼，等.注射用丹參多酚酸鹽在糖尿病患者中的臨床應用觀察研究[J].中國藥物應用與監測，2014，11(3)：142-145.

[5] 耿魁魁,劉圣,吳妍.正交實驗法優選注射用丹參多酚酸鹽調配技術[J].中成藥,2015,37(1):220-222.

[6] 吳妍,耿魁魁,鄧曉媚,等.改進HPLC法測定注射用丹參多酚酸鹽中丹酚酸B的含量[J].中國藥房,2016,27(36):5135-5137.

[7] KIM SH,KIM SH,CHOI M,et al.Natural therapeutic magnesium lithospermate B potently protects the endothelium from hyperglycaemia-induced dysfunction[J].Cardiovasc Res,2010,87(4):713-722.

[8] LEE BW,CHUN SW,KIM SH,et al.Lithospermic acid B protects β-cells from cytokine-induced apoptosis by alleviating apoptotic pathways and activating anti-apoptotic pathways of Nrf2-HO-1 and Sirt1[J].Toxicol Appl Pharmacol,2011,252(1):47-54.

[9] 衛銀芝，趙芳，熊世熙，等.丹參多酚酸鹽對糖尿病心肌病保護作用及可能機制[J].安徽醫藥,2013,17(10):1656-1659.

[10] 章紅艷,章蘭芳,吳艷華.注射用丹參多酚酸鹽在早期糖尿病腎病治療中的應用[J].醫學綜述,2015,21(15):2867-2869.

[11] 謝軍,劉圣,朱文君,等.苦碟子注射液與5種常用輸液及注射用鹽酸川芎嗪配伍后的穩定性考察[J].中成藥,2013,35(8):1788-1792.

[12] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(四部)[S].北京：中國醫藥科技出版社，2015：115.

[13] 任賢,謝楠,徐向陽,等.注射用丹參多酚酸鹽與21種臨床常用藥品配伍穩定性研究[J].中國藥業,2012,21(2):22-25.

[14] 王忠壯.注射用丹參多酚酸鹽與12種溶劑的配伍穩定性考察[J].中國藥師,2009,12(6):774-776.

[15] 王少珊，王娟.溫度對丹參注射液與溶媒配伍后微粒時量變化的研究[J].護理學報，2013，20(3)：69-71.

[16] 孫沖環,楊文清,陳玲玲.靜脈注射液中藥物配伍后不溶性微粒的考察[J].中國藥業,2011,20(5):41-42.