微波萃取-水蒸氣蒸餾純化測定金銀花揮發(fā)油成分

夏愛清，王彥娜，邢翠娟，趙 哲，董麗麗,于肖東

(邢臺學院，河北 邢臺 054001)

揮發(fā)油為金銀花中的有效成分之一，由于含量低、易揮發(fā)，人們對金銀花中揮發(fā)油的研究相對較少。因此，對邢臺地區(qū)金銀花的揮發(fā)油成分進行科學分析具有很重要的意義。在先前的研究中常用揮發(fā)油提取器提取法，水蒸氣蒸餾法，索氏提取法，共水蒸餾法，微波提取法，超聲波法提取等單一的提取揮發(fā)油法方式[1-3]，其存在著提取成分不完全、峰分離困難以及含有色素及石蠟等沸點高的物質(zhì)會對色譜柱、MS檢測器造成比較大的污染等缺點[4]。本文兩種方法交叉使用進行實驗，成功的提取、成功地純化了金銀花揮發(fā)油組分進而利用GC-MS法對其進行分析檢測，解決了金銀花單一提取方式目前存在的問題。

1 實驗部分

1.1 儀器及試劑

GCMS-QPQP2010ULTRAW氣相色譜條件[5]：進樣口250 ℃；毛細管色譜柱為SH-RXI-5SIL MS；升溫條件:60 ℃以5 ℃/min升溫至150 ℃，以8 ℃/min升至250 ℃；He為保護氣，流速:1 mL/min；壓力:57.4 kPa；不分流進樣；1 μL進樣量。

質(zhì)譜條件：EI離子源，70 eV電子能；接口250 ℃；離子源200 ℃。

XH100B微波催化合成/萃取儀(北京祥皓科技發(fā)展有限公司),試劑均為分析純。

1.2 實驗條件

稱粉碎待用的金銀花粉末20 g于燒瓶中，加入100 g正己烷提取劑，分別進行索式回流2h(索氏提取-水蒸氣蒸餾法);超聲2h(超聲提取-水蒸氣蒸餾法);400 W，60 ℃的微波條件下，萃取40min(微波萃取-水蒸氣蒸餾法)三種方法提取，保留濾液。將濾液進行水蒸氣蒸餾，可以觀察到有油狀餾分餾出，于瓶底發(fā)生分層現(xiàn)象。取餾出物于分液漏斗中進行分液，保留上層餾分。密封冷藏，待測[6]。

2 結(jié)果與討論

2.1 實驗條件的優(yōu)化

圖1是微波法提取金銀花揮發(fā)油組分圖，揮發(fā)油提取器提取法與水蒸氣蒸餾提取法均提取效果不好，未見明顯揮發(fā)油成分，這二者未能上機檢測。將待測的剩余幾種單種提取法提取的產(chǎn)品用注射器經(jīng)濾膜過濾后注入進樣瓶中，系統(tǒng)自動進樣檢測。超聲波提取法(石油醚、無水乙醇)具有一定的可行性。石油醚組由于其沸點太低，出峰具有一定干擾，分析出幾種烷類及酯類；無水乙醇組存在著后期峰分離較差只鑒定出幾種烷類。蒸煮法提取方法提取結(jié)果后半部分未見明顯峰值出現(xiàn)效果不理想。直接對金銀花進行提取，多種實驗方法最終所得產(chǎn)品均顯示黃綠色，所以金銀花中的色素及石蠟等沸點高的物質(zhì)，會對MS檢測器造成比較大的污染，不能直接上機檢測。所以超聲波提取，微波波提取，蒸煮法，索式提取，這幾種方法不可直接利用。需要提純除色素。有過柱、吸附、蒸餾這幾種常用純化方法。過柱溶劑損耗較為嚴重；吸附找不到合適的催化劑；蒸餾采用電熱套溫度高于水蒸氣，導致部分揮發(fā)油的熱解。采用水蒸氣蒸餾的方法對提取液進行提純，除去色素對于本實驗的干擾，微波萃取-水蒸氣蒸餾法方法提取得無色透明液體。

圖1 微波萃取法GC-MS圖

圖2 微波萃取-水蒸氣蒸餾法GC-MS圖

微波萃取-水蒸氣蒸餾法能夠?qū)⒔疸y花中揮發(fā)油成分提取較完整，峰分開較明顯。比單一方式提取的效果更具有優(yōu)勢,所得溶液經(jīng)GC-MS檢測，得出其提取成分相對較好，見圖2。

2.2 揮發(fā)油成分分析

多種方法結(jié)合而進行的三種方式提取的實驗樣品經(jīng)上機檢測，其具有多個特征峰且峰分開明顯，可進行定性分析，證明其實驗結(jié)果符合要求。用面積歸一法分別從總離子流圖中確定了每種成分的相對含量[7](見表1)。

表1 揮發(fā)油成分分析表*

表1(續(xù))

*:a:索氏提取-水蒸氣蒸餾法；b:微波萃取-水蒸氣蒸餾法；C:超聲波提取-水蒸氣蒸餾法。

三種提取方法所提取的物質(zhì)種類為24、28、26種，占揮發(fā)油總量的59.17%、68.25%、71.93%，三種方法提取邢臺地區(qū)的金銀花共有成分而且含量最高的是十六酸甲酯(17.39%，11.96%，14.63%)，相對含量>10%；其次是9.12-十八碳二烯酸甲酯(5.02%，5.05%，3.46%)，9,12,15-十八碳三烯酸甲酯(6.05%，4.32%，3.95%)。

3 結(jié)論

微波萃取-水蒸氣蒸餾解決了金銀花的揮發(fā)油成分測定中MS檢測器污染的問題。邢臺金銀花揮發(fā)油的成分為烷烴類(46.3%)，酯類(22.2%)烯烴類(2.2%)，醇類(4.7%)，醛類(4.1%)[8]以及酮類(2.8%)；其它物質(zhì)占7.4%,為邢臺地區(qū)金銀花的開發(fā)和利用提供了科學數(shù)據(jù)。

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