高效液相色譜法測定小兒瀉痢停片中醋酸潑尼松的含量

齊心 趙崇羚

摘 要：目的：探究小兒服用類型瀉痢停片當醋酸潑尼松物物質含量。方法：以高效液相類型色譜分析法為主要分析方式，選擇Hypersil色譜柱，在配置流動相的階段選擇比例為58比42的甲醇和水的混合溶液，并將流動相的實際流速控制為每分鐘一毫升，設定檢測波的長度數值為240納米，將氫化可物質作為內標物。結果：在探究實驗中，醋酸潑尼松以及內標物的實際保留時間長度分別為11.7分鐘和7.8分鐘，在80毫克每毫升到240毫克每毫升的濃度區間內，醋酸潑尼松物質與內標物的具體峰面積比例和相應的濃度比例表現出了線性關系，醋酸潑尼松物質的具體平均回收率數值達到百分之99.93。結論：在對小兒服用類瀉痢停片當中醋酸潑尼松物質含量進行分析的時候，采用高效液相類型色譜分析方式在分析精準性、操作便捷性以及分析靈敏度方面表現良好，可采用這一技術對藥劑質量進行控制。

關鍵詞：液相色譜；瀉痢停片；含量；測定；醋酸潑尼松；醫學

小兒服用類瀉痢停片常被歸類一種抗菌類型的藥物制劑，這種藥物在應對痢疾桿菌導致的急慢性類型痢疾、各種腸道病菌導致小兒胃腸炎癥等疾病。這種藥物當中有效治療藥物為磺胺甲惡唑以及醋酸潑尼松等物質。在當前部分地區的藥品生產標準當中僅僅對小兒服用類瀉痢停片中的磺胺甲惡唑物質的含量檢測方法進行了記述，但是卻未對藥物當中醋酸潑尼松物質的含量測定方式進行規定。但就小兒服用類瀉痢停片而言，由于其對應的群體為小兒，所以要求藥品中醋酸潑尼松物質的含量標準為每片1.5毫克，為了在保證小兒服用類瀉痢停片在發揮作用的同時避免藥物對小兒的身體健康造成影響，因此也就要建立藥物中醋酸潑尼松物質含量的測定方法，使小兒服用類瀉痢停片的質量能得到控制。

1 儀器設備以及處方

1.1 儀器設備以及試藥

液相色譜儀系統（日本島津）。色譜甲醇，水為重蒸水；醋酸潑尼松、磺胺甲惡唑、甲氧芐氨嘧啶、氫化可的松對照品（中國藥品生物制品檢定所）。

1.2 小兒服用類型瀉痢停片藥物處方

磺胺甲惡唑100g，甲氧芐氨嘧啶20g，醋酸潑尼松1.5g，顛茄浸膏2g，制成1000片。

2 方法以及結果

2.1 檢測中波長數值選擇

在這一環節中，以精密稱量的方式稱取適量的醋酸潑尼松物質，用這些物質制成含量為每毫升120微克的甲醇溶液，并將甲醇當做空白，在波長數值為200納米到400納米區間內進行掃描，發現醋酸潑尼松物質240納米波長數值上吸收率最大，最終決定將240納米設定為檢測階段所用的波長數值。

2.2 色譜條件以及適應實驗

以高效液相類型色譜分析法為主要分析方式，選擇Hypersil色譜柱，在配置流動相的階段選擇比例為58比42的甲醇和水的混合溶液，并將流動相的實際流速控制為每分鐘一毫升，設定檢測波的長度數值為240納米，將氫化可物質作為內標物。監護柱體的溫度調整到25攝氏度到26攝氏度之間，以20微升為單位定量進樣。

2.3 對照物質溶液制備

采用精確稱量的方式稱取醋酸潑尼松對照物40毫克，將這些物質放置到100毫升規格的量瓶當中，在搖勻后留做后續使用。制備的內標物物質的時候，精密量取氫化可的松物質30毫克，將這些物質放到規格為100毫升的量瓶當中，向其中加入甲醇溶液使其溶解，并使用甲醇溶液將其稀釋到刻度線留做后續使用。

2.4 標準曲線的繪制

分別精密量取醋酸潑尼松對照品溶液5毫升，6毫升，7.5毫升，10毫升，12.5毫升，14毫升，15毫升，放置到25毫升的容量瓶當中。各加內標溶液10毫升，分別用甲醇稀釋至刻度，搖勻，分別進樣，記錄峰面積，以質量濃度（X）為橫坐標，醋酸潑尼松峰面積與內標物峰面積之比（Y）為縱坐標。

2.5 加樣回收率試驗

精密稱取同一批號已知含量的小兒瀉痢停片粉末適量（約相當于醋酸潑尼松，20毫克），置100毫升量瓶中，精密加入醋酸潑尼松對照品20毫克，加甲醇使溶解，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過。各加內標溶液10毫升，加甲醇稀釋至刻度。

2.6 樣品的測定

取小兒瀉痢停片60片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于醋酸潑尼松40毫克），置100毫升量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，過濾，取續濾液10毫升置25毫升量瓶中，加內標溶液10毫升，加甲醇稀釋至刻度。

2.7 結果

在探究實驗中，醋酸潑尼松以及內標物的實際保留時間長度分別為11.7分鐘和7.8分鐘，在80毫克每毫升到240毫克每毫升的濃度區間內，醋酸潑尼松物質與內標物的具體峰面積比例和相應的濃度比例表現出了線性關系，醋酸潑尼松物質的具體平均回收率數值達到百分之99.93。

3 討論

以紫外掃描光譜結果圖可以發現，醋酸潑尼松物質在240納米波長數值條件下有最大吸收峰顯現，所以降240納米設備定為檢測中的使用波長。

但從醋酸潑尼松物質的特點來看，醋酸潑尼松為白色或幾乎白色的結晶性粉末；無臭，味苦。不溶于水，微溶于乙醇、醋酸乙酯，略溶于丙酮，易溶于氯仿。主要用于各種急性嚴重細菌感染，嚴重過敏性疾病，膠原性疾病。如果藥物中某些物質含量超標或者服用方式不科學，則會產生不良副作用交叉過敏反應。對一種磺胺藥呈現過敏的患者對其他磺胺藥也可能過敏。肝臟損害。可發生黃疸、肝功能減退，嚴重者可發生急性肝壞死，故有肝功能損害患者宜避免應用。腎臟損害。可發生結晶尿、血尿和管型尿，故服用小兒瀉痢停片期間應多飲水，保持高尿流量，如應用小兒瀉痢停片療程長、劑量大時，除多飲水外，宜同服碳酸氫鈉，以防止此不良反應。失水、休克和老年患者應用小兒瀉痢停片易致腎損害，應慎用或避免應用小兒瀉痢停片。腎功能減退患者不宜應用小兒瀉痢停片。對呋塞米、砜類、噻嗪類利尿藥、磺脲類、碳酸酐酶抑制藥呈現過敏的患者，對磺胺藥亦可過敏。胃與十二指腸潰瘍及心力衰竭患者慎用。

在文中實驗條件下，醋酸潑尼松峰的色譜行為與其他成分的差異較大，在7分鐘前，磺胺甲口惡唑峰、甲氧芐氨嘧啶峰與溶劑峰相繼出峰完畢7分鐘后，醋酸潑尼松峰與內標峰才出現。理論板數以醋酸潑尼松峰計算為1500，醋酸與各組分峰的分離度不少于2.8。

由于該藥品主要的受眾是小兒，因此要更加重視藥品中各物質含量的管理，讓藥物中各物質的含量都被控制在合理的范圍內，在保證藥物治療效果的同時避免藥物中某些物質含量過高而造成患者身體出現副作用。

在對小兒服用類瀉痢停片當中醋酸潑尼松物質含量進行分析的時候，采用高效液相類型色譜分析方式在分析精準性、操作便捷性以及分析靈敏度方面表現良好，可采用這一技術對藥劑質量進行控制。

參考文獻

[1]鐘穎.高效液相色譜法測定小兒瀉痢停片中醋酸潑尼松的含量[J].中國現代應用藥學，2005，22（z3）：862-863.

[2]鐘穎，曾志堅.HPLC法測定瀉痢停片中醋酸潑尼松的含量[J].今日藥學，2003，13（1）：17-18.

[3]王建秀，馮樹梅.反相高效液相色譜法測定瀉痢停片的含量[J].中國藥學雜志，1995，30（4）：241-241.

[4]趙平華，宋軍，楊慈海.高效液相色譜法測定瀉痢停片中磺胺甲噁唑的含量[J].中國藥師，2003，6（3）：157-158.

[5]趙雪娥，譚幫華，伍蓉.HPLC法測定瀉痢停片中磺胺甲口惡唑和甲氧芐氨嘧啶的含量[J].西北藥學雜志，2000，15（5）：197-198.

[6]楊準，楊開寧.HPLC法測定瀉痢停片中磺胺甲惡唑、甲氧芐氨嘧啶和醋酸潑尼松的含量[C]//第十次全國色譜學術報告會.1995.