高效液相色譜法檢測(cè)注射用頭孢呋辛鈉含量

茍建亞

摘 要：本文采用高效液相色譜法測(cè)定了注射用頭孢呋辛鈉中頭孢呋辛的含量，固定相為十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動(dòng)相為醋酸鹽緩沖液-乙腈（85：15），檢測(cè)波長為273nm，頭孢呋辛在0.04～0.14mg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。頭孢呋辛的平均回收率為99.3%。本方法是一種簡便、準(zhǔn)確、安全的測(cè)定注射用頭孢呋辛鈉含量的方法。

關(guān)鍵詞：頭孢呋辛鈉；含量；測(cè)定

頭孢呋辛鈉為一種半合成第二代頭孢菌素類抗生素[1]，藥物別稱為：西力欣、頭孢羥芐四唑甲酸酯、達(dá)力新Zinacef、呋肟頭孢菌素、頭孢呋肟酯、頭孢呋肟、頭孢氨呋肟鈉等。因其對(duì)革蘭氏陰性菌的？內(nèi)酰胺酶相當(dāng)穩(wěn)定，有穿透血腦屏障等特點(diǎn)，臨床上廣泛應(yīng)用于敏感菌引起的呼吸道、泌尿系統(tǒng)、皮膚、軟組織、骨關(guān)節(jié)及女性生殖器等組織器官的感染，對(duì)敗血癥、腦膜炎也有效[2-4]。頭孢呋辛鈉的測(cè)定方法主要有微生物法、旋光法、紫外分光光度法、近紅外光譜法和高效液相色譜法等[5]。本文采用高效液相色譜法對(duì)注射用頭孢呋辛鈉進(jìn)行了含量測(cè)定。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

分析天平 METTLER TOLEDO XP205；pH計(jì) METTLER TOLEDO FE20；電熱恒溫水浴鍋 天津泰斯特 DK-98-IIA；液相色譜儀Agilent 1260；檢測(cè)器 Agilent 1260；色譜柱 依利特hypersil ODS C18 （4.6*250*5u ）。

1.2 試藥

色譜乙腈（TEDIA）、醋酸鈉AR（天津市光復(fù)科技發(fā)展有限公司）、冰醋酸AR（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）。

2 含量測(cè)定

2.1 色譜條件：色譜柱為依利特hypersil ODS C18色譜柱（4.6*250*5u）；流動(dòng)相為醋酸鹽緩沖液（取醋酸鈉0.68g，冰醋酸5.5ml加水稀釋成1000ml，用冰醋酸調(diào)節(jié)pH值至3.4）-乙腈（85：15）；檢測(cè)波長為273nm；流速0.7mL·min-1；柱溫：25℃。

2.2 對(duì)照品溶液的制備

取頭孢呋辛對(duì)照品約11mg，精密稱定，置100mL容量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得對(duì)照品溶液（每1mL溶液中含約0.1mg），取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。

2.3 供試品溶液的制備

取注射用頭孢呋辛鈉約11mg，精密稱定，置100mL容量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液（每1mL溶液中含約0.1mg），取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。

2.4 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

取頭孢呋辛對(duì)照品約27mg，置50mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度（每1mL溶液中含約0.5mg），搖勻，至60℃水浴放置30分鐘，放冷，使頭孢呋辛部分轉(zhuǎn)變?yōu)槿グ奔柞ｎ^孢呋辛，作為系統(tǒng)適用性溶液，取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，頭孢呋辛峰和去氨甲酰頭孢呋辛峰的分離度應(yīng)大于3.0，頭孢呋辛峰與相對(duì)保留時(shí)間約為1.1處雜質(zhì)峰間的分離度應(yīng)符合要求[6]，即大于1.5。取對(duì)照品溶液連續(xù)進(jìn)樣5次，記錄色譜圖，頭孢呋辛峰面積積分值的RSD應(yīng)不大于2.0%。

2.5 專屬性

供試品溶液出峰時(shí)間與對(duì)照品溶液出峰時(shí)間一致，專屬性強(qiáng)。

2.6 精密度試驗(yàn)

取對(duì)照品溶液20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。重復(fù)測(cè)定6次，對(duì)照品峰面積積分值的RSD為0.33%。結(jié)果表明，本實(shí)驗(yàn)精密度良好。

2.7 重現(xiàn)性試驗(yàn)

分別稱取同批注射用頭孢呋辛鈉6份，測(cè)定含量并計(jì)算含量的RSD為0.77%。結(jié)果表明，此含量測(cè)定方法的重現(xiàn)性良好。

2.8 檢測(cè)限與定量限

將對(duì)照品溶液用水逐級(jí)稀釋，每次取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。信噪比為10：1時(shí)的進(jìn)樣量為定量限，為10ng，信噪比為3：1時(shí)的進(jìn)樣量為檢測(cè)限，為3ng。

2.9 線性與范圍

制備濃度為0.04、0.06、0.08、0.10、0.12、0.14mg·mL-1的對(duì)照品溶液，分別取20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以進(jìn)樣濃度（mg）為橫坐標(biāo)，峰面積積分值A(chǔ)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程，y=164124x+33.65，r=0.9999。試驗(yàn)表明，頭孢呋辛對(duì)照品在0.04～0.14mg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.10 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取供試品溶液，存放于4℃樣品室中，分別在0，2，4，6h取20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，供試品溶液頭孢呋辛峰面積的RSD為0.57%。結(jié)果表明在4℃條件下頭孢呋辛至少在6h內(nèi)穩(wěn)定。

2.11 回收率試驗(yàn)

采用加樣回收試驗(yàn)，稱取3份供試品約22mg，精密稱定，按照供試品溶液制備方法制備，分別準(zhǔn)確移取3份3ml供試品溶液至9個(gè)10ml容量瓶中，再稱取對(duì)照品約22mg，精密稱定，按照對(duì)照品溶液制備方法制備，分別移取1ml、2ml、3ml對(duì)照品溶液至已加入供試品溶液的容量瓶中，制備成3個(gè)供試品高、中、低濃度共9份樣品，測(cè)定含量，計(jì)算回收率。9次測(cè)定的平均回收率為99.3%，RSD為0.59%，回收率良好。

2.12 樣品含量測(cè)定

依照外標(biāo)法測(cè)定三批注射用頭孢呋辛鈉的含量，以頭孢呋辛計(jì)分別為標(biāo)示量的100.1%、100.2%、99.9%。

3 討論

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定注射用頭孢呋辛鈉的含量，操作簡便、準(zhǔn)確度高，能夠很好的控制藥品質(zhì)量，保證了臨床用藥的安全。

參考文獻(xiàn)

[1]高碩，楊錯(cuò)，王紅.頭孢呋辛鈉藥動(dòng)學(xué)的研究進(jìn)展[J].中國藥房，2012（1）.

[2]鄧寶軍，林詩貴，李蜀巍，等.頭孢呋辛的臨床抗感染研究進(jìn)展[J].中國臨床藥理學(xué)雜志，2000（5）.

[3]白林，王曉蕾，王璐，等.頭孢呋辛鈉與5種常用輸液的配伍穩(wěn)定性研究[J].中國藥師，2008（3）.

[4]注射用頭孢呋辛鈉說明書.

[5]謝守霞，董淳.旋光法測(cè)定注射用頭孢呋辛鈉的含量[J].華西藥學(xué)雜志，2003（3）.

[6]袁琦，郭新社，楊浩.HPLC法測(cè)定注射用頭孢呋辛鈉的含量[J].河南大學(xué)學(xué)報(bào)，2012（4）.

[7]中國藥典：二部[S].國家藥典委員會(huì).中國醫(yī)藥科技出版社，2015.