藿香正氣水的微乳薄層色譜法鑒別

楊瀅 李婷 許雪峰 緱慧君 任杰 李帆

（漢中市食品藥品檢驗檢測中心 陜西 漢中 723000）

藿香正氣水為《中國藥典》收錄品種，由蒼術(shù)、陳皮、厚樸（姜制）、白芷、茯苓、大腹皮、生半夏、甘草、廣藿香油及紫蘇葉油組成，具有解表化濕，理氣和中的功效。主要用于外感風(fēng)寒、內(nèi)傷濕滯或夏傷暑濕所致的感冒，療效確切，是一種常用藥。其中主以藿香芳香化濕、力氣和中兼能解表；輔以紫蘇葉、白芷解表散寒而兼化濕滯，三藥合用，其解表化濕之功，相得益彰；佐以厚樸、大腹皮去濕消滯，半夏、陳皮理氣和胃、降逆止嘔；又佐以茯苓、白術(shù)、甘草益氣健脾，以助運化。

微乳液是在1958年由Schuiman等人提出的，上世紀(jì)90年代以來，微乳液得到了廣泛的應(yīng)用，尤其是在工業(yè)和技術(shù)領(lǐng)域[1]。微乳薄層色譜是利用微乳液作為展開劑，聚酰胺薄膜為固定相，對有效成分進行分離和鑒定。康純等[2]在2000年，首次利用微乳薄層色譜法對13種黃連中的生物堿進行了分離和鑒定，并得到了滿意的結(jié)果。近十幾年，利用微乳薄層色譜法對中藥材及中成藥的有效成分進行分離和鑒定運用的較為廣泛[3-7]，但對藿香正氣水利用微乳薄層色譜法分析其有效成分尚未見報道。

本研究則采用微乳薄層色譜法，同時對中陳皮、白芷、厚樸酚、和厚樸酚4種成分進行分離和鑒定，為藿香正氣水的有效成分分離鑒定提供準(zhǔn)確快速的方法。

1.儀器與試藥

1.1 儀器

電子天平：JY10002，上海舜寧恒平；恒溫水浴鍋：國華電器有限公司；超聲清洗儀：昆山市超聲儀器有限公司；聚酰胺薄膜：浙江臺州路橋生化材料廠點樣針：上海安亭微量進樣器廠；薄層層析展開缸：上海信誼儀器廠有限公司；暗箱式紫外分析儀：WFH-203B，杭州齊威儀器有限公司。

1.2 試藥

對照藥材：陳皮對照藥材（批號：120969-201510，中國藥品生物制品鑒定所）、白芷對照藥材（批號：120945-201510，中國藥品生物制品鑒定所）；對照品：厚樸酚（批號：110729-201714，中國藥品生物制品鑒定所）、和厚樸酚（批號：110730-201614，中國藥品生物制品鑒定所）。藿香正氣水（四川彩虹制藥有限公司）購于四川。十二烷基硫酸鈉（分析純，成都市科龍化工試劑廠）、正丁醇、無水乙醇、甲醇、正庚烷、正己烷、丙酮及甲酸均為分析純。

2.方法

2.1 溶液制備

2.1.1 展開劑配制 分別取適量的十二烷基硫酸鈉、助表面活性劑（正丁醇、乙醇、甲醇）、油相（正己烷、正庚烷）、水，混勻，放置24小時備用。臨用加適量改良劑（丙酮、甲酸）制成展開劑。

2.1.2 對照藥材溶液 取陳皮對照藥材1g，置具塞錐形瓶中，加甲醇10ml，超聲40min，濾過，濾液蒸干，加甲醇1ml，使溶解，即得陳皮對照藥材溶液。另取白芷對照藥材2g，同法制成白芷對照藥材溶液。

2.1.3 對照品溶液 分別取厚樸酚、和厚樸酚適量，加甲醇分別制成1mg/ml、2mg/ml、的溶液，作為對照品溶液。

2.1.4 供試品溶液 取藿香正氣水5ml，蒸干，加甲醇2ml溶解，作為供試品溶液。

2.1.5 陰性樣品溶液 按照藿香正氣水的處方，分別取除去陳皮、白芷的其余藥材，按照制備工藝制成相應(yīng)的陰性樣，按照2.1.4項下方法制備陰性樣品溶液。

2.2 微乳薄層色譜條件

分別取陳皮、白芷對照藥材溶液，厚樸酚、和厚樸酚對照品溶液及供試品溶液各1μL，點于聚酰胺薄膜上。分別以不同微乳液展開劑，飽和30min，按上行法展開，展距15cm，取出晾干，置紫外光下（254nm、365nm）檢視。

表 微乳液的組成及結(jié)構(gòu)

3.結(jié)果與討論

3.1 結(jié)果

3.1.1 微乳液中水的考察 在保證微乳液SDS：正丁醇：油相（27:63:10）保持不變的條件下，按照表1改變含水量，2.2項下方法進行展開。可得，隨著水的質(zhì)量比的增加（除水的質(zhì)量比為90%時，展開劑分層外），展開得到的斑點數(shù)隨之增加，且斑點清晰度也隨之增加，展開所用時間在不斷縮短。當(dāng)含水量為85%時，斑點最為清晰，分離效果較好，展開時間最短。因此最終選擇85%為最佳含水量。

3.1.2 微乳液中油相的考察 分別用正己烷、正庚烷為油相，進行微乳液中油相的考察對象。以含水量85%的微乳液作為展開比例，在對各個成分分離的效果顯示，正庚烷的展開效果較正己烷理想，得到的斑點清晰，分離效果較好，展開時間較短。故選擇正庚烷為微乳液油相。

3.1.3 微乳液中助表面活性劑的考察 選擇甲醇、乙醇、正丁醇作為助表面活性劑，以75%、85%和90%為微乳液含水比例進行微乳液配置。最終只有當(dāng)正丁醇作為助表面活性劑時，所配溶液未出現(xiàn)分層現(xiàn)象。故選擇正丁醇為助表面活性劑。

3.1.4 微乳液展開劑中改良劑的考察 在最終選定的微乳液中分別加入丙酮、甲酸作為改良劑。分別以85%微乳液-改良劑進行展開。結(jié)果顯示，加入丙酮容易出現(xiàn)分層現(xiàn)象，且對拖尾的改善效果不大；而甲酸消除拖尾的效果較好，且展開時間較短，故選擇甲酸為微乳液展開劑中的改良劑。

3.2 微乳薄層層析結(jié)果

以85%微乳液-甲酸（5:1）為展開系統(tǒng)按照2.2的方法展開，取出晾干后，置紫外燈（365nm）下檢視，在供試品色譜和對照藥材色譜相應(yīng)位置上，陳皮顯兩個橙色及一個黃綠色斑點，白芷顯一個橙色主斑點。置紫外燈（254nm）下檢視，在供試品色譜和對照品色譜相應(yīng)位置上，厚樸酚顯紫色斑點，和厚樸酚顯紫色斑點。陰性樣在相應(yīng)位置上均無干擾斑點。

圖1 藿香正氣水主要成分鑒別微乳薄層色譜圖

3.3 討論

在中國藥典中，采用經(jīng)典薄層色譜法分別以6個不同的TLC方法鑒定陳皮、厚樸酚、和厚樸酚、白芷等11種對照藥材及對照品，需進行較為復(fù)雜的前處理，且使用試劑種類較多。

本實驗利用微乳薄層對藿香正氣水中的有效成分進行分離鑒定，本實驗對展開劑的各個組成成分進行考察，最終確定微乳液（SDS：正丁醇：正庚烷：水=4.05：9.45：1.05：85，g/g）-甲酸（5:1）為展開劑，能夠同時分離和鑒定陳皮、白芷、厚樸酚及和厚樸酚4種有效成分。用此法可大大簡化藿香正氣水有效成分分離鑒別的步驟，縮短了實驗時間，同時減少了試劑使用的種類和用量，減少實驗成本，為中國藥典完善提供方法的可能。

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