1例溫自身抗體引起的疑難配血的分析與探討

高凌峰

（臨汾市中心血站 山西 臨汾 041000）

自身抗體是指機體自身耐受的完整性遭到破壞，無法識別自身組織器官、細胞及細胞成分，導致免疫系統產生針對自身相應組織器官、細胞及細胞成分的抗體。自身抗體一般分為冷自身抗體和溫自身抗體2類。冷自身抗體多產生于某些疾病的活動期，這些抗體由于不引起溶血反應，因此沒有臨床意義。溫自身抗體多產生于惡性腫瘤、淋巴組織增生性疾病、自身免疫紊亂等，能引起溶血反應，具有臨床意義[1]。自身抗體一般無特異性，可凝集自身紅細胞以及所有人的紅細胞，因此對血型鑒定、抗體篩查及交叉配血造成影響。因本次發現一例病例，特作進一定的探討，進行臨床意義分析。

1.資料與方法

1.1 標本情況

市第二人民醫院送至本單位的一例疑難配血標本，醫院正反正型不符，送本單位進行鑒定并交叉配血。

1.2 試劑

ABO標準紅細胞(本室自制)；抗-A、抗-B標準血清（長春博德）；抗-D、抗-C、抗-c、抗E、抗-e等血型定型試劑、譜細胞、篩選細胞（上海血液中心）。聚凝胺試劑盒(珠海貝索生物技術有限公司)；抗人球蛋白試劑(長春博訊生物技術有限責任公司)。試劑均為合格試劑并在有效期內。

1.3 方法及操作

1.3.1 方法 ABO血型、Rh（D）血型鑒定；吸收、放散試驗；直接抗人球蛋白試驗；間接抗人球蛋白試驗；抗體篩選及特異性鑒定均按照標準方法操作。對送檢患者的血樣進行直接抗球蛋白試驗，吸收放散試驗，ABO、Rh血型鑒定，抗體篩查及抗體鑒定試驗。

1.3.2 操作 患者紅細胞的處理：取患者標本紅細胞適量，用37℃溫鹽水洗滌3次，去除冷自身抗體對試驗的影響。取試管2支，分別標記，在1管中加入1體積洗滌的患者紅細胞和3體積的鹽水，在2管中，加入同等體積的鹽水和洗滌后的已知血型的壓積紅細胞，45℃孵育10min，振蕩。1000轉/分離心1分鐘，吸去上清液。在1管中加入少量鹽水，離心，觀察，與未經放散時紅細胞進行自身凝集強度作對比，如果標本紅細胞仍有自身凝集但自身凝集強度減弱，重復上述試驗，直至沒有自身凝集。將放散后的標本紅細胞用生理鹽水洗滌3次，配成2%～5%的紅細胞懸液，準備用于血型鑒定。如果處理后的己知血型的紅細胞不與對應的抗血清發生凝集，則本次試驗無效。

1.3.3 患者血清的處理 將放散之后的標本紅細胞鹽水洗滌3次，最后吸盡上清液，取壓積紅細胞1份，與等量的患者標本血清混合，在4℃孵育60分鐘，不時搖勻，然后1000轉/分離心5分鐘，吸取上清液，檢查凝集情況，以確定冷自身抗體對患者標本的影響；另取壓積紅細胞1份，與等量的患者血清混合，在37℃孵育60分鐘，不時搖勻，1000轉/分離心5分鐘，吸取上清液，檢查凝集情況，如果仍存在自身凝集，重復上述實驗，排除溫自身抗體對患者標本血清的影響

1.3.4 血型鑒定 取4支潔凈試管，分別加入抗-A、抗-B、抗-AB、抗-H血清各2滴，并標記，再分別加入放散處理后的患者2～5%的紅細胞懸液各1滴，混勻；取潔凈試管3支，分別加入A、B、O型2～5%試劑紅細胞懸液1滴，并標記，然后加入吸收處理后的患者血清2滴，混勻；另取試管1支，做自身對照，加入吸收后的患者血清2滴和放散后的患者2～5%紅細胞懸液1滴，混勻。3000轉/分離心10s，記錄結果。

1.3.5 抗體篩查試驗 血清兩滴加入標有ⅠⅡⅢ的試管中，對應加入ⅠⅡⅢ套2%～5%篩選紅細胞懸液1滴，37℃孵育30分鐘。3000轉/分離心10秒，觀察凝集和溶血情況，并記錄。鹽水法如為陰性繼續做抗人球蛋白法。如為陽性，則做譜細胞格局。

1.3.6 直接抗人球蛋白 實驗取潔凈試管2支，各加入患者洗滌3次后配制的3%紅細胞懸液1滴，加入抗人球蛋白試劑1滴，混勻；不完全抗-D血清致敏的3%D陽性紅細胞懸液1滴加抗人球蛋白試劑1滴，混勻，做陽性對照；正常人3%D陽性紅細胞懸液1滴加抗人球蛋白1滴，混勻，做陰性對照。1000轉/分離心1分鐘，記錄結果[2]。

2.結果

未經處理的患者標本血樣ABO血型鑒定結果見表1。吸收放散處理后的患者標本血樣ABO血型鑒定結果見表2。

表1 未經處理的患者標本血型鑒定結果

表2 處理后的患者標本血型鑒定結果

由上述結果可以看出，吸收放散處理后的標本紅細胞和血清正反定結果在4℃、室溫、37℃下均顯示相同的反應，確定該患者血型為A型。處理后的血清抗篩試驗為陰性，處理后的紅細胞直接抗人球蛋白實驗為陰性。

3.討論

由以上結果可知，該患者血樣中存在IgG和IgM性質的溫自身抗體。溫自身抗體多為IgG性質，IgM性質抗體較少，引起患者自身細胞凝集而影響血型鑒定的更為少見。當冷凝集自身抗體影響血型鑒定時，可以采用37℃溫鹽水洗滌紅細胞的方法去除自身抗體的影響；當溫自身抗體影響血型鑒定時，采用熱放散的方法可以去除自身抗體的影響，但在熱放散過程中需注意加入對照試驗，以檢查放散過程中是否破壞了抗原的反應性。對于此類病人的輸血治療，應注意嚴格掌握其輸血指征，既要考慮輸血的必要性，也要考慮輸血后的危險性。在達到臨床相應的輸血指征并必須要輸血的時候，既使交叉配血不相合，仍然可以輸注配血不相合的血液。可選擇ABO、Rh等重要血型相同的同型血多份，逐一與病人血液進行配血，從而選擇“最小不相容性”，即配血中反應最弱的血液輸注，洗滌紅細胞為此類患者輸血的首選。此時對于成人每次輸血以不超過2U為宜，以盡量慢的速度輸血，時刻觀察[3]。

[1]張志峰，劉佳.溫反應自身抗體導致兩種交叉配血結果不一致分析[J].國際輸血及血液學雜志，2012.35.2.

[2]中華人民共和國衛生部.中國輸血技術操作規程（血站部分).

[3]向東，劉曦，王健蓮，沈偉，陸瓊.金沙紅細胞溫自身抗體的血清學特點分析及配血對策[J].中國輸血雜志，2008.21.12.