黃娜 魏明莉 王貝 李萬成
在臨床上有很多原因都可能引起胸腔積液,而結核性胸腔積液是胸腔積液中最常見的原因之一。白介素-27(interleukin-27, IL-27)屬于IL-12家族中的一員[1],是免疫介導炎癥性疾病的一個重要的介質。在炎癥反應的初期IL-27是促進T輔助細胞1(helper T cell1, Th1)應答和γ-干擾素(interferon-γ, IFN-γ)生成的主要因素,而在炎癥反應的晚期則起著相對次要的免疫調控作用。IL-12是一個異二聚體抗炎癥反應的細胞因子,由IL-12A和IL-12B分別編碼p35和p40的兩個亞單位構成。p40亞單位的表達受活化的巨噬細胞嚴格的調控和制約。研究表明IL-27在炎癥性疾病、抗腫瘤、自身免疫性疾病和寄生蟲感染中起到關鍵作用[2]。目前,有關IL-27基因多態性與結核性胸腔積液的文獻罕有報道。為此,我們采用PCR/RFLP的方法,分析IL-27基因多態性與結核性胸腔積液的相關性,報道如下。
選取2015年1月至2016年12月在成都醫學院第一附屬醫院呼吸內科就診且經胸腔鏡病理確診的漢族結核性胸腔積液患者160名,男87例,女73例;年齡( 24.2±5.7) 歲。選擇190名健康對照體檢者為對照組,男102例、女88例,年齡( 25.3±6.4) 歲。兩組之間在性別、年齡上差異無統計學意義。
1. 基因組DNA的提取: 每位受試者簽訂知情同意書后,采集(包括結核性胸腔積液患者和健康對照體檢者)靜脈血約4ml,EDTA-Na抗凝,提取基因組DNA后,-20 ℃保存備用。
2. PCR擴增、PCR-RFLP及測序分析: 查閱相關文獻并根據Genbank dbSNP數據庫中核對序列,選取了IL-27其3個位點,編號分別為: rs181206、rs153109和rs17855750(http://www.ncbi.nlm.nih.gov)。PCR引物的設計參照genebank數據庫提供的全序列,運用引物設計軟件進行設計并合成各位點所需引物及其內切酶[3]。……