慢性乙型肝炎中醫證型與患者細胞免疫功能關系研究*

張振宇 黃衍松 李偉冰 程紅球

1.深圳市坪山區人民醫院中醫科 (廣東 深圳， 518000) 2.汕頭大學醫學院第二附屬醫院

筆者將150例慢性乙型肝炎(CHB)患者辨證分型,并檢測其外周血T淋巴細胞亞群(CD4+和CD8+)及Th1細胞分泌的細胞因子(IL-2、IFN-γ)和Th2細胞分泌的細胞因子(IL-6、IL-10),對取得的數據進行統計分析,探討中醫辨證分型與細胞免疫功能之間的關系,為指導臨床辨證分型提供客觀指標。

1 資料與方法

1.1 一般資料 150例CHB患者均為2010年11月-2013年11月在汕頭大學醫學院第二附屬醫院門診或住院就診的患者，其中男96例，女54例，年齡22～60歲，病程2～15年。其診斷均符合2010年《慢性乙型肝炎防治指南》中的標準[1]。中醫辨證分型根據1991年天津會議制定的分型標準[2]，其中濕熱中阻型(A型)67例，肝郁脾虛型(B型)45例，肝腎陰虛型(C型)16例，脾腎陽虛型(D型)12例，瘀血阻絡型(E型)10例。各證型患者在性別、年齡、DNA水平方面比較，差異無顯著性意義，P>0.05，具有可比性。見表1。

表1 150例CHB患者基線特征比較

1.2 檢測方法 流式細胞儀檢測外周血T淋巴細胞亞群，在汕頭大學醫學院第二附屬醫院醫學轉化中心實驗室完成，操作嚴格按照試劑盒說明書進行。酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測患者血清中IL-2、IFN-γ、IL-6和IL-10的濃度，由汕頭大學醫學院生物分析實驗室完成，操作嚴格按照試劑盒說明書進行。HBV DNA檢測采用熒光定量PCR法。肝功能采用全自動生化分析儀檢測，由于本研究著重觀察細胞免疫功能的變化，故肝功能結果未列出。

2 結果

2.1 CHB患者中醫證型與T 淋巴細胞亞群的關系 見表2。

表2 CHB患者中醫證型與T 淋巴細胞亞群的關系比較

與脾腎陽虛型比較，*P<0.01；與濕熱中阻型比較，△P<0.05

2.2 CHB患者中醫證型與IL-2和IFN-γ的關系 見表3。

表3 CHB患者中醫證型與IL-2和IFN-γ關系比較

與脾腎陽虛型比較，*P<0.05，**P<0.01；與肝腎陰虛型比較，△P<0.05；與肝郁脾虛型比較，#P<0.05

2.3 CHB患者中醫證型與IL-6和IL-10的關系 見表4。

表4 CHB患者中醫證型與IL-6和IL-10關系比較

與濕熱中阻型比較，*P<0.05，**P<0.01；與瘀血阻絡型比較，☆P<0.05；與濕熱中阻型比較，#P<0.05。

3 討論

國內外多項研究己經證實,HBV本身對肝細胞無明顯損害,由于存在特異性細胞毒T淋巴細胞介導的肝細胞損傷和病毒清除是CHB的發病機理。HBV DNA的清除主要通過CTL介導的病毒清除和非細胞溶解機制清除病毒，尤其與T細胞積極的應答關系密切,相反,CHB患者體內的特異性T細胞應答功能明顯下降[3～7]。

T淋巴細胞是人體主要的免疫細胞，其T淋巴細胞各亞群數量的變化及所占百分比反映了機體的免疫水平。T淋巴細胞可以分成不同的亞群，亞群的分類主要依其表型及功能的不同，一般將人類外周T淋巴細胞依其不同的表型及功能分為CD4+與CD8+兩個亞群，CD4+細胞主要為輔助T細胞，按所分泌的細胞因子又可分為 Th1和 Th2細胞兩個亞群。在免疫應答中, 主要由Th1細胞分泌的IL-2、IFN-γ和TNF-α等細胞因子促進細胞免疫, 主要由Th2細胞分泌的IL-6、IL-10和IL-4等細胞因子促進體液免疫，兩者的相互協調在免疫應答中起重要作用。CD8+細胞主要為細胞毒性T細胞(CTL)，CTL主要功能就是清除病毒感染，兩者相互影響、相互作用，平衡著機體的免疫狀態，臨床上常將CD4+/CD8+比值作為評估機體免疫狀態的一個重要依據[8]。

近10年來，對CHB各中醫證型與 T 淋巴細胞免疫功能的研究較多，部分研究結果相似，但也有部分研究結果差異較大，本研究結果顯示， CD4+T淋巴細胞水平在濕熱中阻型中最高，從高到低次序為：濕熱中阻型>瘀血阻絡型>肝郁脾虛型>肝腎陰虛型>脾腎陽虛型；而 CD8+T 淋巴細胞水平在脾腎陽虛證中較高，從高到低次序為：脾腎陽虛型>瘀血阻絡型>肝腎陰虛型>濕熱中阻型>肝郁脾虛型；IL-2的水平在濕熱中阻型中最高，從高到低的變化趨勢為：濕熱中阻型>瘀血阻絡型>肝郁脾虛型>肝腎陰虛型>脾腎陽虛型；IFN-γ的水平在濕熱中阻型中最高，從高到低的變化趨勢為：濕熱中阻型>疲血阻絡型>肝郁脾虛型>肝腎陰虛型>脾腎陽虛型；IL-6的水平在脾腎陽虛型中最高，變化趨勢為：濕熱中阻型<瘀血阻絡型<肝腎陰虛型<肝郁脾虛型<脾腎陽虛型；IL-10的水平在脾腎陽虛型中最高，變化趨勢為：濕熱中阻型<瘀血阻絡型<肝郁脾虛型<肝腎陰虛型<脾腎陽虛型。這提示外周血T淋巴細胞亞群及Th1、Th2細胞分泌的細胞因子在CHB患者不同證型中是有差異的。筆者分析這些數據得出：CHB患者外周血T淋巴細胞亞群(CD4+和CD8+)的百分比和Th1細胞分泌的細胞因子(IL-2、IFN-γ)和Th2細胞分泌的細胞因子(IL-6、IL-10)的水平在不同證型間存在一定的統計學差異，部分指標(CD4+、CD8+、IL-2、IFN-γ、IL-6和IL-10)可以作為臨床辨證分型的參考依據。

由于收集樣本量不夠大，且以住院患者為多，尤其是脾腎陽虛型和瘀血阻絡型患者數量太少，以致于各證型間的部分檢測結果的統計學差異不能充分體現。總之，通過研究筆者認為CHB患者中醫證型與其細胞免疫功能存在一定關系，具有一定的臨床應用價值，可為從細胞免疫角度為中醫辨證分型提供更多的客觀參考指標。

[1] 中華醫學會肝病學分會，中華醫學會感染病學分會.慢性乙型肝炎診斷標準(2010年版)[J]．中西醫結合肝病雜志，2011，21(2)：121-122.

[2] 中國中醫藥學會內科肝病專業委員會 ．病毒性肝炎中醫療效判定標準(試行) [J]．中醫雜志，1992，33(6)：53.

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