母親血清抗-HBs陽性對其新生兒接種乙肝疫苗接種效果的影響研究

陳奮，林道炯

防控乙型肝炎病毒（HBV）感染仍是我國一項具有挑戰性的工作。目前，國內預防HBV感染的主要措施為接種乙肝疫苗，并已將接種乙肝疫苗納入新生兒免疫保護計劃[1，2]。自我國開展接種乙肝疫苗以來，人群抗-HBs陽性率呈現明顯升高的趨勢[3]。由于IgG型抗-HBs抗體可通過胎盤進入胎兒，所以孕婦產出的嬰兒體內來自母親的抗-HBs抗體陽性率也在不斷升高，母親抗-HBs抗體能夠起到保護、預防新生兒和幼兒感染HBV的作用，但其可能對新生兒接種乙肝疫苗的免疫應答造成一定的影響[4，5]。本文分析了血清抗-HBs陽性的孕婦所產新生兒接種乙肝疫苗后主動應答情況，現將研究結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2012年6月～2013年6月我院產科住院待產的60名單胎妊娠婦女，年齡為20～35歲，平均年齡(26.7±1.4)歲。其新生兒出生體質量為2.8～4.5（3.1±0.5）kg。所有孕婦血清 HBsAg、HBeAg、抗HBc和抗HBe均為陰性，其中血清抗-HBs陽性31名，抗-HBs陰性孕婦29名。納入標準：（1）新生兒出生體質量≥2.75 kg；（2）出生后1分鐘內Apgar評分≥8分。排除存在嚴重畸形或有疾患的新生兒。本研究獲得醫院醫學倫理委員會批準，孕婦及其丈夫簽署知情同意書。

1.2 乙肝疫苗接種 在新生兒出生24 h內，注射第一次乙肝疫苗，之后于出生后1個月注射第二次疫苗，出生后6個月注射第三次疫苗。分別由專業人員在新生兒右上臂三角肌內注射重組(酵母)乙肝疫苗（深圳康泰生物制品股份有限公司）5 μg。對于應答后血清抗-HBs水平降低者或未接種成功者，則再次加強注射乙肝疫苗20 μg或重新按上述方案再次接種。

1.3 檢測方法 采集幼兒12個月和36個月齡時血液3 mL，離心，-20℃保存血清。采用ELISA法檢測血清HBV標記物（試劑盒購自上海酶聯生物公司）；使用AXSYM全自動免疫分析儀和微粒子酶聯免疫法檢測血清抗-HBs(美國Abbott公司，以mlU/m1表示)。當母體外周血和/或臍血抗-HBs≥1000 mlU/ml時，用20%小牛血清稀釋后，重新檢測。血清抗-HBs≥10 m IU/ml為陽性，即表明人體具有保護能力；血清HBsAg陽性則表明HBV感染；HBsAg陰性而抗-HBc陽性則表明過去感染HBV；血清抗-HBs水平以幾何平均濃度（GMC）表示。

1.4 評價標準 血清抗-HBs定量檢測判定[6]：無應答：抗-HBs<10 m IU/ml，且HBsAg陰性；低水平應答：抗-HBs濃度在 10 mIU/ml～99.9 mIU/ml；正常應答：抗 HBs濃度在100 mIU/ml～999.9 mIU/ml之間；高水平應答：抗-HBs大于1000 mIU/ml。

1.5 統計學處理 應用SPSS 22．00統計學軟件分析，計量資料以±s表示，采用t檢驗，對不符合正態分布的計量資料以M（IQR）表示，采用秩和檢驗，計數資料的比較采用卡方檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清抗-HBs陽性與陰性母親所生新生兒一般資料比較 兩組新生兒一般資料比較，差異無統計學意義（P>0.05，表 1）。

2.2 兩組幼兒接種效果比較 在1歲時，檢測接種乙肝疫苗的效果，結果兩組應答水平無統計學差異（P>0.05，表2）；在1歲和3歲時，兩組幼兒血清抗-HBs陽性率和抗-HBs水平比較，差異也無統計學意義（P>0.05），而在3歲末，兩組幼兒血清抗-HBs水平均明顯低于1歲時（P<0.05，表3）。

2.3 加強接種情況 在3歲末，60名幼兒血清HBsAg和抗-HBc均為陰性。對7名血清抗-HBs陰性兒童加強接種后，結果6個月后，6名幼兒血清抗-HBs轉陽。

表1 血清抗-HBs陽性與陰性母親所生新生兒一般資料（%，±s）比較

表1 血清抗-HBs陽性與陰性母親所生新生兒一般資料（%，±s）比較

例數 孕周 自然分娩 剖宮產 男性 出生體質量（kg） 1 min內Apgar評分抗-HBs陽性 31 38.2±1.0 10（32.3） 21（67.7） 17（54.8） 3.2±0.4 8.5±1.1抗-HBs陰性 29 37.9±1.1 9（31.0） 20（69.0） 15（51.7） 3.1±0.5 8.4±1.2

表2 兩組幼兒接種乙肝疫苗后應答效果（%）比較

表3 兩組幼兒接種效果[%，M（IQR）]比較

3 討論

HBV感染可能會通過母嬰傳播，通常發生于圍生期和嬰幼兒期，接種乙肝疫苗是目前國內控制HBV感染率的有效方法[7]。由于乙肝疫苗接種的普遍推廣，國內幼兒人群血清HBsAg陽性率已大幅下降。國外一項在意大利針對HBV高流行區域的研究[8]結果顯示，為新生兒接種乙肝疫苗后，HBV感染率明顯降低，證明接種乙肝疫苗對防止乙型肝炎具有重要的實踐意義。雖然母親抗體能夠保護新生兒避免受到病毒的感染，但國外相關研究[9，10]表明，一些如破傷風或甲型肝炎病毒等，來自于母親的病原抗體能夠抑制新生兒在接種疫苗后產生的免疫應答，且由于疫苗及病原種類不同，母親抗體對其免疫應答的抑制程度也有所不同，但都與母親抗體的濃度呈正相關。0時、1個月和6個月接種乙肝疫苗是經過大量研究證明的最佳接種方案。國內胡婭莉等[11]的研究結果表明，按照0、1、6方案為新生兒接種三針乙肝疫苗后一個月，母親有高滴度抗-HBs抗體的幼兒血清抗-HBs水平明顯低于低滴度或陰性組母親的幼兒，證明了母親抗-HBs對幼兒短期免疫應答有不利影響。而本文在此研究基礎上進一步研究母親抗-HBs對主動免疫的遠期影響。

國外研究結果[12-15]表明,新生兒在接種3次重組Hep B（釀酒酵母）疫苗后，僅有20%可出現低免疫應答或無應答的情況，在完成3次疫苗接種后血清抗-HBs滴度越高的新生兒抗-HBs陽性率也會越高，在母親血清HBsAg陰性的兒童，該特征則更加明顯。本研究結果顯示，在新生兒接種3針疫苗經過3年的隨訪則發現所有母親血清HBsAg均為陰性，完成接種后嬰幼兒血清抗-HBs滴度均>100 m IU/ml。雖然在接種3針乙肝疫苗后3年，有7名（11.7%）幼兒血清抗-HBs滴度轉為陰性（<10m IU/ml），但是均未檢測到血清HBsAg或抗-HBc陽性，與國外研究[16]結果基本一致，說明在隨訪期間內所有新生兒均未受到HBV的感染。這一現象可能與所有新生兒不存在紋身、大手術、母親感染HBV等危險暴露因素有關。國外[17]研究結果顯示，乙肝疫苗具有免疫記憶，能夠在5～15年間對接種乙肝疫苗的兒童產生持續免疫反應。本研究中新生兒未受到HBV感染的原因更有可能與完成乙肝疫苗接種后，疫苗產生的持續性免疫記憶而獲得免疫保護有關，表明注射乙肝疫苗能夠有效控制幼兒的HBV感染率[18，19]。由于本研究中 7 名血清抗-HBs<10 mIU/ml的幼兒血清HBsAg和抗-HBc均為陰性，且不存在暴露HBV的危險因素[20]，但還是給予了加強接種乙肝疫苗。如果研究中檢測出兒童母親HBsAg為陽性，則易發生宮內感染，導致出生后接種的乙肝疫苗無法發揮保護作用。如果幼兒母親或者其他家庭成員有攜帶HBV或慢性乙型肝炎病史，并且該兒童血清抗-HBs平均水平也<10 m IU/ml的話，因存在有感染HBV的危險，需要及時對新生兒進行加強免疫接種[21,22]。

國外Junqueira et al[23]在對巴西地區的新生兒的研究結果表明母親血清抗-HBs抗體不會對新生兒接種乙肝疫苗應答產生影響。本研究結果證明，在完成全程免疫后1年和3年間，母親血清抗-HBs陽性組和陰性組幼兒血清抗-HBs水平和陽性率差異無統計學意義。完成接種1年后幼兒血清抗-HBs水平分別為1162.1 mIU/ml和1104.2 mIU/ml，差異無統計學意義（P>0.05），3年后他們的血清抗-HBs水平分別降低至74.3 m IU/ml和73.6 mIU/ml，差異無統計學意義（P>0.05），提示母親血清抗-HBs陽性與否并不會影響幼兒接種乙肝疫苗的應答效果，不會對嬰幼兒體內抗-HBs的產生發生影響。但研究中1年后嬰幼兒血清抗-HBs水平明顯高于三年后血清抗-HBs水平，提示在接種乙肝疫苗后產生的抗-HBs滴度會隨著年齡的增加而下降，需要及時監測，及時給予加強注射。

綜上所述，按照目前國家推薦的3針方案注射乙肝疫苗，能夠有效阻止新生兒受到HBV的感染。母親血清抗-HBs陽性并不會對新生兒接種乙肝疫苗的應答產生不利影響。但本研究還存在一些不足，如研究樣本數量較小，可能會影響研究結果的客觀性。由于一些客觀因素，未對新生兒采血，檢測血清抗-HBs水平和陽性率，以便對照分析。也未進行乙肝疫苗劑量的分層研究對照，還不能確定多大劑量的乙肝疫苗是合適的。針對國產乙肝疫苗，也需要進行多廠家多批次的對照試驗，以找到合適的劑量和免疫療程。檢測方法也需要規范和統一，以排除主觀因素的對研究結果的影響。因此，還需進一步擴大研究范圍，以便為乙型肝炎的防治提供更多更準確的參考依據。