2012－2016年腦膜膿毒性伊麗莎白金菌臨床分布及藥敏結(jié)果

孫 萍 ， 許雨喬 夏文穎 劉根焰 趙旺勝

腦膜膿毒性伊麗莎白金菌（Elizabethkingiameningosepticum，EM）是一種專性需氧、無動(dòng)力呈細(xì)長(zhǎng)略彎曲的的革蘭陰性桿菌，是一種條件致病菌，在自然界中廣泛存在，但在植物中卻不常見。近年來由于超廣譜抗生素以及免疫抑制劑的大量使用，使得該菌導(dǎo)致的感染明顯增多。為了解該菌在臨床標(biāo)本中的分布及耐藥情況，現(xiàn)對(duì)南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院2012－2016年分離的27株EM的臨床分布及藥敏試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行回顧性分析，結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株來源 2012年1月－2016年12月分離自我院臨床送檢標(biāo)本，并剔除同一患者的重復(fù)菌株。

1.1.2 儀器與試劑 VITEK 2-Compact全自動(dòng)細(xì)菌鑒定分析儀及其配套鑒定卡、藥敏卡購(gòu)自法國(guó)生物梅里埃公司；藥敏紙片來自英國(guó)OXOID公司；MH瓊脂平皿、血平皿、麥康凱平皿、巧克力平皿來自法國(guó)生物梅里埃公司。

1.2 方法

1.2.1 菌株鑒定與藥敏試驗(yàn) 通過菌落形態(tài)、革蘭染色鏡檢、氧化酶等定向試驗(yàn)后，經(jīng)VITEK 2-Compact 全自動(dòng)細(xì)菌鑒定分析儀及其配套鑒定卡、藥敏卡進(jìn)行鑒定和藥敏試驗(yàn)。頭孢哌酮-舒巴坦藥敏試驗(yàn)采用紙片擴(kuò)散法，藥敏標(biāo)準(zhǔn)參照腸桿菌科細(xì)菌頭孢哌酮抑菌圈標(biāo)準(zhǔn)，每周用銅綠假單胞菌ATCC 27853和大腸埃希菌ATCC 25922作為質(zhì)控菌株進(jìn)行質(zhì)量控制，35 ℃培養(yǎng)18～24 h觀察結(jié)果，藥敏結(jié)果按照美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)（CLSI） M100-S22[1]規(guī)定判讀。

1.2.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 藥敏試驗(yàn)結(jié)果采用世界衛(wèi)生組織細(xì)菌耐藥性檢測(cè)中心推薦的WHONET5.6軟件進(jìn)行該病原菌科室分布、標(biāo)本來源與藥物敏感性結(jié)果的統(tǒng)計(jì)分析。不同年份EM分離率比較采用SPSS 19.0 軟件處理，以χ2檢驗(yàn)比較組間差異，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 EM的分離率

2012－2016年全院共分離24 608株的革蘭陰性菌，其中10 301株為不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌，分離到EM 27株，占不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌的0.26%（27/10 301）。

在2012－2016年， EM的分離率呈上升趨勢(shì)：2012年、2013年、2014年EM分離率各為0.04%、0.07%和0.14%，而2015年及2016年則分別為0.27%和0.68%。

2.2 菌株臨床科室分布

EM在院內(nèi)分布較廣，27株EM主要來自ICU（12株，44.4%），其次為腫瘤科（2株，7.4%）和全科醫(yī)學(xué)科（2株，7.4%）。見表1。

2.3 標(biāo)本來源

EM主要來自于呼吸道標(biāo)本。其中痰液標(biāo)本21株，占77.8%；血液標(biāo)本2株，占7.4%；尿液、肺泡灌洗液、膽汁、皮膚分泌物標(biāo)本各分離到1株，各占3.7%。

表1 27株EM的臨床科室分布Table 1 Distribution of 27 strains of E. meningospeticum in clinical department

2.4 藥敏試驗(yàn)

27株EM藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示，頭孢菌素類、碳青霉烯類抗生素、單環(huán)β內(nèi)酰胺類以及氨基糖苷類抗菌藥物抗菌效果較差，EM對(duì)其敏感率均在10.0%以下；對(duì)喹諾酮類抗菌藥物左氧氟沙星和含酶抑制劑抗生素（哌拉西林-他唑巴坦、頭孢哌酮-舒巴坦）敏感率均在50.0%左右；甲氧芐啶-磺胺甲唑?qū)M具有良好的抗菌效果，EM對(duì)其敏感率為100%。見表2。

3 討論

EM又稱腦膜膿毒性金黃桿菌、腦膜炎敗血黃桿菌等，在醫(yī)院內(nèi)主要分布在濕度大的地方，如加濕器、呼吸機(jī)、水咀等，甚至在消毒劑中也能存在。國(guó)外的案例報(bào)告顯示醫(yī)院工作人員的手上也曾檢測(cè)出該菌。近年來EM引起醫(yī)院感染的流行正在逐年增加，臨床分離率也日趨升高[2]。ICU、呼吸內(nèi)科、兒科（尤其新生兒）[3]、神經(jīng)內(nèi)科患者均有可能發(fā)生該菌所致醫(yī)院獲得性感染，尤以ICU患者較為常見[4]。EM是一種機(jī)會(huì)致病菌，通常不易感染健康人群，但是對(duì)免疫力低下的老年患者、長(zhǎng)期應(yīng)用廣譜抗菌藥物以及頻繁接受各種侵襲性操作的患者極易發(fā)生感染[5-6]。本資料分析的27株EM主要分布于ICU （12株）、腫瘤科（2株）和全科醫(yī)學(xué)科（2株）等，印證了以上觀點(diǎn)。

EM對(duì)目前常用的抗生素有天然的抵抗力[7]，這與該菌能產(chǎn)生金屬酶（MBL）有關(guān)[8]。MBL是一類活性部位依賴金屬鋅離子的β內(nèi)酰胺酶，該酶的最大特點(diǎn)是可以水解碳青霉烯類、頭孢菌素類等多種β內(nèi)酰胺類抗生素。本次耐藥性監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，該菌對(duì)頭孢菌素類、碳青霉烯類、單環(huán)β內(nèi)酰胺類耐藥率均在90.0%以上，對(duì)阿米卡星、慶大霉素等氨基糖苷類耐藥率也很高，達(dá)到87.0%，這與陳杏春等[9]報(bào)道相近。而EM對(duì)環(huán)丙沙星、左氧氟沙星等喹諾酮類抗菌藥物耐藥率達(dá)到50.0%。含酶抑制劑抗生素中哌拉西林-他唑巴坦耐藥率較低，僅為13.0%，但頭孢哌酮-舒巴坦耐藥率達(dá)到54.5%，這與有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道稍有出入[10]，可能是與不同地域分離的EM株的藥物表型存在差異或細(xì)菌的變異有關(guān)。另外磺胺類抗菌藥物甲氧芐啶-磺胺甲唑?qū)M顯示出良好的抗菌活性，敏感率為100%。因此， 對(duì)于EM引發(fā)的感染，建議臨床選擇酶抑制劑復(fù)合制劑及磺胺類抗菌藥物進(jìn)行治 療。

表2 27株EM對(duì)抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 2 Susceptibility pro fi le of 27 strains of E. meningospeticum to antimicrobial agents（%）

綜上所述，由于EM在醫(yī)院環(huán)境中分布廣泛且通常具有多重耐藥的特性，治療極為困難，臨床應(yīng)引起足夠的重視。一旦分離到該菌，應(yīng)在積極治療原發(fā)病的同時(shí)根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果合理選用抗菌藥物。