酵母細胞壁多糖在鯽魚鰓出血防治中的應用

鄧龍釗

摘 要：鯽魚，為我國大宗淡水養殖水產品，年產量超過260萬噸，癌水產養殖業中占據重要地位。當前，在鯽魚養殖發生的諸多疾病中，出血病是一種較為嚴重的疾病，具有發病急、防治困難的特點，會為養殖戶造成很大的損失，所以必須對不同地區與不同鯽魚種類患有出血病的防治加以重視。免疫多糖作為一種重要的免疫促進劑，具有高效、低毒、無殘留的特點，符合綠色飼料發展的需求。本文對免疫多糖在鯽魚鰓出血防治中的應用進行了研究。

關鍵詞：鯽魚；鰓出血；酵母細胞壁多糖；應用

近些年來鯽魚出血病的發病幾率較高，會對水產養殖戶的利益造成很大的損害，需要養殖戶十分注意。酵母細胞壁多糖作為一種環保型綠色飼料添加劑，能夠提高鯽魚自身的免疫能力，提升對病毒、真菌、寄生與細菌等的抵抗力，并且能夠降低對鯽魚早成的不良應激反應，從而使動物的生產性能得以提高。將酵母細胞壁多糖應用在一些水產動物中，能夠起到低毒性、無殘留且高效等的作用，確保整個養殖產業更加健康的發展。

一、 發病原因

鯽魚鰓出血病主要由CyHV-2（皰疹病毒）致使感染，鰓動脈血管發生病變所到孩子，主要的發病原因共有6項，包括內容：

1.當水溫達到26至28℃時可使疾病爆發，若問題>30℃、小于22℃也可導致該疾病發生。

2.鯽魚品種質量的退化、免疫力下降，具有較差的抗病能力。

3.養殖鯽魚的水質中的硫化氫、氨氮或亞硝酸鹽等的指標超標，水質差；魚塘不及時清理、淤泥較厚，滋生病原體。

4.喂養鯽魚的飼料質量差，或是未對鯽魚進行科學、合理的投喂。

5.相關藥物的盲目使用。

6.飼養鯽魚的放養密度較大。

二、發病癥狀

鯽魚出血病屬于一種具有傳染性疾病，多因病毒、細菌侵襲所引起，其中以細菌性致病最為常見，鯽魚在發病后的癥狀通常表現為不集群、游動無力、顏色變黑，又被稱之為黑頭，全身發紅，鯽魚的胸部、側鱗處尤為明顯，且鰓絲明顯腫脹，在魚體跳躍、鰓蓋張合的過程中鯽魚的鰓部會有鮮紅的血液流出。在鯽魚病死后其鰓蓋處的淤血癥狀明顯，并伴有組織器官出血、充血，脾腎臟腫大以及肝臟糜爛等的癥狀。

三、酵母細胞壁多糖在鯽魚鰓出血防治中的應用研究

1.材料

（1）研究用魚。選擇兩個魚塘中的魚作為研究對象，要求兩個魚塘中魚苗品種、養殖規格、養殖飼料均完全相同，沒有顯著差異。對兩個魚塘中的魚進行血清免疫指標檢驗。

（2）菌株。以患病鯽魚為菌株獲取對象，在病魚體內分離攻毒的嗜水氣單胞菌，明確鑒定后保存于-20℃環境中，備用。

2.方法

（1）投喂飼料。一口養魚塘，在投放商品飼料前混入酵母細胞壁多糖，飼料與酵母細胞壁多糖比例為10：4，另一口魚塘投喂與第一口魚塘等量正常飼料。4月上旬、8月下旬各4個星期。

（2）培養菌液。取出保存的嗜水氣單胞菌菌種，予以活化培養，置于固體培養基上，于37℃持續培養18h。采集單菌落，將其加入到200mL液體培養基中進行培養，150rpm條件下持續培養12h，并擴大培養。

（3）獲取研究對象。

分別于兩口魚塘隨機選取20尾鯽魚作為嗜水氣單胞菌攻毒試驗對象。

死亡率（%）=[（初期魚體尾數-末期魚體尾數）/初期魚體尾數]×100

免疫保護率（%）=（1-試驗組病死率/對照組病死率）×100。

（4）測定免疫指標。在投喂前1星期，投喂后第1星期、第2星期、第3星期、第4星期各時間段選取5條鯽魚用于實驗，對各個時間段兩組魚塘中的魚予以抽血測定堿性磷酸酶（AKP）、超氧化物歧化酶 。

3.結果

（1）攻毒感染結果分析。

攻毒感染結果如表1，研究發現鯽魚出血病癥狀為主要表現。

（2）免疫指標的測定。

免疫后檢測結果顯示：投喂后血清AKP、SOD活性明顯下降，停止停喂則有所升高，實驗組與對照組相比，AKP水平差異無統計學意義（P>0.05），SOD差異顯著（P<0.05）。投喂后，AKP、SOD在第2星期達到峰值，后下降至基礎水平。

（3）鰓出血發病率、發病程度。

分析表2，整體自養養殖塘口數相差不大的情況下，鯽魚精養、混養模式，公司2017年度鯽魚鰓出血發病率、發病程度均遠低于2016年。橫向對比也優于周邊養殖戶鯽魚鰓出血防治效果，（P<0.05）。

四、討論

免疫多糖，用于魚苗投喂中，具有增強魚體免疫反應作用，能夠提升魚對各種病毒的抵抗能力，因此可以有效降低各種疾病的發生，在魚類病防治當中應用效果良好。馬淑芳曾以當歸多糖喂點帶石斑魚，分析當歸多糖的影響作用，予以當歸多糖可提高點帶石斑魚自身免疫力，降低發病率、死亡率。本次試驗結果顯示酵母細胞壁多糖喂養組鯽魚感染率、發病程度均較低，應用價值理想，這符合馬淑芳的分析，證實了本次研究的科學性。另外，擴大酵母細胞壁多糖的使用范圍，更能夠優化使用效果。由此判斷在水產養殖過程中，能夠以投喂酵母細胞壁多糖方式提升水產動物的抗病能力，可有效提升水產養殖效益。

堿性磷酸酶（AKP）為各種動物體內普遍存在的一種酶，參與免疫反應。超氧化物歧化酶，可幫助魚類有效清除體內的自由基（SOD），而SOD是影響生物免疫功能的重要指標。劉暢認為黃芪多糖（APS）有助于提升鯽魚血清中AKP、超氧化物歧化酶活性，因此能夠提升鯽魚的自身免疫力。陳昌福認為免疫多糖（酵母細胞壁）可有效提升銀鯽自身免疫應答能力，其中超氧化物歧化酶活性有明顯上升表現。本次研究中超氧化物歧化酶活性的變化情況與上述研究相吻合，但AKP變化差異較大，這可能與不同魚類免疫特性、免疫多糖來源有所差異有關。總之，實際養殖中應分析病因，應該“防治結合、預防為主”。

（1）清塘消毒：①生石灰清塘：完成池塘修整后，應在進行苗種選擇前的3個星期內，在晴天使用生石灰對清塘進行消毒，使用量為75kg/畝，若池塘的淤泥較少，則可使用50kg/畝。②使用生石灰帶水進行清塘：對于并不靠近湖或河的池塘，在清塘前若池水無法向池外排出、排出后難以補入的，使用鄰池進行蓄水進行交相灌注，以此增加了病原傳播的可能性，這樣便失去了進行清塘、疾病防治的目的。所以可使用生石灰帶水清塘，生石灰的使用量為125至150kg/畝，平均水深為1米。③使用漂白粉清塘：漂白粉中通常含有約30%左右的氯，具有較強的殺菌、漂白作用，使用量為13.5kg/畝，平均水深為1米，20g/m2。清塘后>5d再將鯽魚放入池塘中，以保證魚的安全。

（2）嚴格的苗種把關：水產養殖戶必須對鯽魚苗種進行檢疫，千萬不可將帶有病毒的苗種帶入到養殖池塘中。

（3）無污染水源：在進水前，養殖戶要對水源水質進行檢測，以減少鯽魚病毒感染的幾率。

（4）投喂合理性：在越冬后，鯽魚的體質會逐漸變弱、免疫力也會變差，很容易受到病毒和細菌的侵襲，所有養殖戶應在開春后對鯽魚進行飼料投喂，以便更好的增加鯽魚的免疫力、體質。

（5）預防性用藥：養殖戶應對水體實施經常性消毒，并且應在養殖高峰期內投喂一些具有抗病毒、肝膽保護的中藥材。

五、結語

綜上所述，本文通過在飼料中添加酵母細胞壁多糖對鯽魚進行免疫投喂的實驗結果顯示：投喂酵母細胞壁多糖餌料后鯽魚血清AKP與SOD活力明顯升高，非特異性免疫力得到改善與提高。同時，免疫投喂的實驗結果表明，酵母細胞壁多糖可以增強鯽魚對嗜水氣單胞菌的抵抗能力，提高自身免疫力，增強抗病毒能力。

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